Спосіб моделювання дитячих органічних ушкоджень головного мозку

Изобретение относится к области медицины, а именно, к моделированию патологических процессов. Исходя из данных исследования мозга у пациентов с детским церебральным параличом, указывающих на наличие вялотекущего энцефалита и патоморфологических признаков аутоимунного поражения мозга, мы предположили, что наиболее близким решением к предлагаемому способу является способ моделирования аллергического энцефаломиелита путем введения энцефали-тогенной смеси и оксипирилидина. Известный способа имеет существенный недостаток - введение гомогената мозга интактного животного, хотя и вызывает развитие энцефаломиелита, однако клиническое течение его не совпадает с клиникой при детском церебральном параличе и проявляется вялыми, а не спастическими параличами. В основу изобретения поставлена задача по созданию модели детского церебрального паралича у морских свинок наиболее близкого по клиническому течению у больных. Достижение указанных результатов обеспечивается тем, что животное иммобилизуют в течение 12-13 часов, затем оно голодает 23-24 часа, после чего внутрибрюшинно вводят смесь в дозе 57 мг на 100 г веса, состоящую из сыворотки крови больного детским церебральным параличом и неполного адъюванта Фрейнда. который состоит из 85% минерального масла и 15% естественных восков. Смесь сыворотки и адъюванта в соотношении 1:1 вводится трехкратно с интервалом 3 дня. Иммобилизация животных вызывает развитие стресса. При этом отмечается сердцебиение, повышение давления, опорожнение кишечника, Для снижения защитно-приспособительных возможностей у животных голодом в течение 23-24 ч продлевали стресс. Хронический стресс использовался для максимального приближения условий возникновения церебрального паралича у животных к условиям данного заболевания у людей. .Сыворотку больных вводили с учетом данных о роли мейропептидов во взаимосвязи нервной и иммунной систем, отсутствия у нейропептидов видовой специфичности, изменения их уровня у больных с поражениями центральной нервной системы. Адъювант применяли для стимуляции высокого и длительного иммунного ответа и возникновения аутоиммунного поражения мозга у экспериментальных животных. Кратность введения Смеси сыворотки С адъювантом, интервалы между введениями и количеством вводимой смеси подбирались эмпирически. На 5-6-е сутки после введения сыворотки у животных возникали и развивались трофические нарушения в виде выпадения шерсти. На 15-17-е сутки появлялась клиническая картина поражения мозга (животные начинали "тянуть" ножки из-за спастических параличей), соответствующая клиника у больных, чья сыворотка использовалась для введения. На протяжении 20 дней после первого введения сыворотки у экспериментальных животных снижалась масса тела. На чертеже показана динамика развития двигательных и трофических расстройств у экспериментальных животных (морских свинок) при моделировании детского церебрального паралича, где 1. Возникновение трофических растройств (выпадение шерсти), 2. Двигательные нарушения (паралича в конечностях). 3.Начало восстановления двигательных и трофических расстройств, 3. Восстановление двигательных функций и шерсти. Контрольной группе животных после иммобилизации 12-13чи голода 24 ч внутрибрюшинно вводилась смесь неполного адъюванта Фрейнда и физиологического раствора (Nad 0,9%) в дозе 57 мг на 100 г массы и соотношении 1:1 трехкратно с интервалом 3 дня. У животных контрольной группы после падения массы тела во время стресса отмечалось постепенное ее восстановление (к 18-21 дню). Выпадение шерсти и паралич не развивались. При сопоставлении способа с прототипом получают следующий технический результат: создание модели детского церебрального паралича, характеризующейся органическими нарушениями головного мозга и отражающей клинику данного заболевания у больных, т.е. возникновение трофических нарушений и спастических параличей. Сущность изобретения поясняется конкретным примером применения способа. Пример 1. Морскую свинку/самку массой 700 г иммобилизовали на спинке в течение 12 часов, затем она голодала 24 часа. После этого ей внутрибрюшинно вводилась смесь сыворотки больного детским церебральным параличом с неполным адъювантом Фрейнда в соотношении 1:1 трехкратно с интервалом 3 дня. Ежедневно проводилось взвешивание животного и контроль двигательных возможностей (подъем по наклонной плоскости видеосьемкой). На 5 сутки у животного появились небольшие участки облысения, которые увеличились в дальнейшем до размеров 1 см χ 1 см к 20 суткам опыта. На 15-е сутки после первого введения смеси сыворотки больному детским церебральным параличом с неполным адъювантом Фрейнда животное начало "тянуть" ножки, перестало подниматься по наклонной плоскости. Отмечалось снижение массы тела на протяжение 20 суток с 700 до 550г. С 24 суток началось восстановление массы тела, однако так и не достигшее первоначального уровня, шерсти и движений в конечностях. Шерсть и двигательные функции восстановились к 33 дню опыта. Пример 2. Морскую свинку-самку массой 650 г иммобилизировали на спинке а течение 12 ч, затем она голодала 24 ч. После этого трехкратно с интервалом 3 дня вводилась внутрибрюшинна смесь сыворотки больного детским церебральным параличом с неполным адъювантом Фрейнда (соотношение 1:1). На протяжении опыта проводилось взвешивание животного и контроль двигательных функций. На 6-е сутки после первого введения смеси у животного появились небольшие участки облысения, увеличивающиеся до размеров 0,7 χ 0,7 к 19 суткам. На 16-е сутки после введения сыворотки с адъювантом морская свинка перестала подниматься по наклонной плоскости. Масса тела в течение 20 дней опыта снизилась на 170 г. С 28 дня началось восстановление массы тела, шерсти и двигательных функций, окончившееся к 40 дню. Предлагаемый способ создания модели детского церебрального паралича был применен у 30 морских cdm-нок, В качестве контрольной группы брались дополнительно 30 морских свинок. Динамика опыта отражена на чертеже. Таким образом предложенная нами модель позволяет достичь развития органических поражений головного мозга у взрослых особей морских свинок при использовании сыворотки крови больных детским церебральным параличом для изучения клиники течения данной патологии в эксперименте.