Спосіб одержання противірусного засобу

Способ получения противовирусного средства путем обработки активного начала, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что морскую воду смешивают с 6-8% водным раствором уксусной кислоты и стрерилиэуют полученную смесь холодной фильтрацией. разведен для того, чтобы стать изотоническим по отношению к плазме крови. Раствор может быть введен клизмы в виде клизмы кишечника. Изобретение иллюстрируется следующим примером. Смешивают при перемешивании и при комнатной температуре 1 л морской воды и 1 л белого уксуса. Получают гомогенный раствор. Ниже представлены данные испытаний полученного средства. Материал и методы. Мышиные клетки L, культивированные в монослое, использованы для испытания вируса HSV-1, штамм S/HD Е 16/84 013084. 1 ампулу HSV-1 используют для инфекции слившихся L клеток. После клеточного лизиса, надосадочную жидкость культур отделяют центрифугированием и вирус затем осаждают полиэтиленгликолем (ПЭГ) в присутствии NaCI (4 М). Вирусный осадок затем суспендируют в 4 мл трис-NaCI (50 моль. рН 7.4). Аликвоты по 1 мл вирусной суспензии инкубируют в течение 60 минут при 20°С в с > Сл> V| ш О 13377 присутствии 2 мл A (PBS, Б) раствора нитрата калия с концентрацией 1 часть на 500, В (смеси морской воды и белого уксуса (50:50), Г) белого уксуса. По окончании инкубации, каждую аликвоту разбавляют 30 мл PBS и вирус снова осаждают с помощью ПЭГ в присутствии NaCI. Каждый из таким образом полученных осадков клеток снова суспендируют в 1 мл трис-NaCI (50 моль, рН 7,4), 0,2 мл этих вирусных суспензий добавляют к монослоям клеток L, культивируемых на пластинках COSTAR (экспериментирование осуществляю т в тройном экземпляре). После инкубации в течение 60 минут при 37°С добавляют 2 мл RPMI, содержащего 10% зародышевой телячьей сыворотки. Культуры затем инкуби руют при 37°С в атмосфере, содержащей 5% СОг, в течение 5 дней. По окончании этого периода, клеточные монослои на пластинках COSTAR промыва5 ют с помощью PBS и фиксируют с помощью 10%-ного раствора формалина в течение 10 минут, при комнатной температуре. После дополнительной промывки с помощью PBS пластинки COSTAR окрашивают с помощью 10 Glesma в течение 12 часов и затем промывают дистиллированной водой. Бляшки клеточного лизиса, полученные за счет вируса, подсчитывают с помощью лупы. Вирусный титр выражают в единицах 15 лизиса на мл (pfu:plaque - forming units). Таким образом, предложенный способ позволяет получить более активный продукт, чем согласно известному способу. 20 Инкубация 1 мл HSV-1 "*" в течение 60 мин с: Вирусный титр, выраженный в р(ч/мл 9 А/2 мл PBS (контроль) 7.60x10 Б/2 мл нитрата калия с 1 р?500 б.бОх 10 9 В/2 мл смеси морской воды 9 с уксусом /50:50/ 6.45х 10 Г/2 мл белого уксуса 1.15х10 Упорядник Замовлення 4112 Техред М.Моргентал 9 Коректор л. Лукач Тираж Підписне Державне патен тне відомство України, 254655, ГСП, КиТв-53, Львівська пл., 8 Відкрите акціонерне товариство "Патент", м. Ужгород, вул.ГагарІна, 101