Спосіб одержання біостимулюючого засобу

Изобретение относится к области фармакологии лекарственных биостимулирующих средств растительного происхождения и может быть использовано для повышения устойчивости организма к действию неспецифических повреждающих факторов, например, радиации. Получаемое средство предлагается использовать в комплексе мероприятий при лечении последствий радиационного облучения, в процессе интенсивной химиотерапии, для ускорения заживления ран. Наиболее близким является способ получения биостимулирующего средства из листьев дуба, собранных в процессе вегетации. Собранный лист дважды экстрагируют водным раствором воды в концентрации 0,4-0,5г/л при соотношении сырье:экстракт - 1:8. Каждую процедуру экстракции проводят 2,5-3,0 часа при давлении 16,5атм, затем экстракт кипятят 2,5-3 часа и сушат при пониженном давлении до сухого остатка. Полученное средство, помимо высокой стоимости, обусловленной большой продолжительностью получения и низким выходом (8%) в процессе изготовления, характеризуется наличием большого количества балластных веществ, влияющих на биологическую активность. Так, содержащийся в листьях дуба в фазе вегетации хлорофилл в процессе экстракции распадается с образованием азотсодержащих гетероциклических соединений, окисляющихся и полимеризующихся на воздухе. Образовавшиеся смолы обладают токсическим действием, в результате, в зависимости от концентрации средства, оно обладает как стимулирующим (при высоких концентрациях), так и ингибирующим эффектом. Из-за наложения обоих эффектов невозможно получить достаточно высокое биостимулирующее действие даже тогда, когда оно наблюдается. Поскольку химический состав дубовых листьев в процессе вегетации зависит от их освещенности, состава почв и состояния растения, в целом, средство, полученное известным способом, обладает нестабильным терапевтическим действием. Следовательно, для получения только положительного эффекта необходимо предварительное исследование биостимулирующих свойств каждой партии средства и точная его дозировка при употреблении. Это удорожает средство-прототип и усложняет его использование. Задачей изобретения является разработка способа получения средства, обладающего высоким биостимулирующим эффектом в большом интервале концентраций. Поставленная задача решается тем, что биостимулирующее средство получают из листьев, собранных по окончании вегетации, путем экстракции водой в соотношении сырье:экстрагент 1:13-17, в течение 0,3-1,4 часа в условиях, когда произведение давления на продолжительность экстрагирования составляет 14,4-15,5атм. час. 1. Исходным сырьем для получения средства являются листья дуба, собранные по окончании вегетации: а) на последних стадиях вегетации листьев происходит максимальное накопление в них флавоноидов, каротиноидов и микроэлементов с одновременным переходом их в наименее связанную форму; б) одновременно в листьях наблюдается естественное понижение концентрации хлорофилла. По окончании вегетации хлорофилл полностью распадается. Поэтому в процессе экстракции не образуется токсичных смол. В результате средство обладает большим биостимулирующим действием, чем прототип и его терапевтический эффект в меньшей степени зависит от концентрации; в) разрушение клеточных мембран способствует более полному извлечению всех биологических компонентов. Это обуславливает больший выход средства и большее содержание в нем активных веществ. Так происходит повышение концентрации флавоноидов, обладающих витаминной активностью, способностью реагировать со свободными радикалами. В результате повышается радиопротекторные и витаминные свойства заявляемого продукта; г) заготовка сырья по окончании вегетации безболезненна для растений, так как производится сбор пожелтевших или опавших листьев. В последнем случае сбор сырья существенно упрощается. 2. Предложенные условия экстракции позволяют получить максимальный выход средства и сократить в 2-4 раза время его производства. 3. Полученное средство содержит значительное количество фенольных соединений, что обусловливает его антиокислительное и радиопротекторное действие. Это позволяет использовать объект изобретения для повышения устойчивости организма к действию неспецифических повреждающих факторов или для ликвидации последствий такого действия. 4. Полученное средство не содержит в своем составе посторонних солей (в данном случае, соды), изменяющих его терапевтический эффект и ограничивающих области его применения. Пример 1. Получение биостимулирующего средства. Листья дуба, собранные по окончании вегетации, осушивались в тени в течение 25 дней с последующим увлажнением в течение 20 минут в родниковой воде, закладывались в автоклав и заливались родниковой водой с соотношением массы воды к массе листьев, равным 15,7. Масса сухих листьев равнялась 2,1кг. Экстрагирование проводилось при давлении 30,0атм в течение 0,5 часа (произведение величины времени экстрагирования [t] на величину фиксированного давления [Р], равном 1,5). Полученный экстракт фильтровался и полимеризовался в течение 2 часов до консистенции твердой массы в условиях естественного ультрафиолета в присутствии атмосферного кислорода. Готовый продукт имел зеркально черную поверхность, а нанесенный на стекло тонкий слой имел цвет переспелой вишни. Плотность сухой массы полученного продукта имела величину, равную 1,62г/см. Масса полученного продукта составляла 155г на 1кг исходного сырья. Пример 2. Сравнительные испытания средства, полученного согласно прототипу и предлагаемым способом. Сравнение заявляемого средства и средства, полученного известным способом, проводили путем изучения их химического состава, биологической активности и технологических параметров. Концентрации биоактивных агликонов и гликозидов фенольных соединений определяли по гравиметрической методике [2], относительное количество таннинов и танниноподобных веществ оценивали с использованием таннинового теста с FeCl3. Биологическая активность средств определялась методом дрожжевого культивирования на среде УЕРТ по скорости колониеобразования микроорганизмов под влиянием различных концентраций тестируемых продуктов. Количество микроорганизмов определяли нефелометрически. Были также проведены измерения продолжительности их производства и величины конечного выхода продукта. Результаты экспериментов приведены в таблицах 1 и 2. Из табличных данных следует, что получаемое средство содержит в среднем на 12,2-33,4% большее содержание компонентов, обеспечивающих антиокислительное и радиопротекторное действие. Оно оказывает значительный биостимулирующий эффект в водных растворах в большом интервале концентраций от 0,1 до 0,001%, и не обладает биоингибирующим действием при низких концентрациях. Выход продукта почти вдвое выше, чем прототипа, скорость изготовления последнего в 3-4 раза ниже. Пример 3. Сравнительные испытания прототипа и предлагаемого способа. Оптимальные режимы экстракции - давление и оптимизационный коэффициент Р´t подбирали варьированием параметров Р от 0,76 до 43,0атм. и времени от 0,34 до 22,4 часа. Из приведенных в таблице 3 данных следует, что оптимальное время экстракции равно 0,3-1,4 часа, а оптимизационный коэффициент при этом должен составлять 14,5-15,5атм.ч.