Спосіб отримання антигену для серологічної діагностики бабезіозу собак

Завантажити PDF файл.

Формула / Реферат

Спосіб отримання антигену для серологічної діагностики бабезіозу собак, що включає зараження собак-донорів 3-4-місячного віку кров'ю від спонтанно хворої на бабезіоз собаки в дозі 2 мл, тотальне знекровлення тварин в період максимальної паразитемії, використання як стабілізатора лимоннокислого натрію з розрахунку 50 мл 20 %-го розчину на 2 літри крові, відокремлення плазми центрифугуванням при 6000 об/хв. протягом 60 хв, відмивання еритроцитів від плазми фізіологічним розчином при 6000 об/хв. протягом 60 хв - триразове, лізування осаду еритроцитів у морозильній камері 12 годин з наступним поступовим розморожуванням при кімнатній температурі, відмивання лізату еритроцитів шляхом змішування з десятьома об'ємами фізіологічного розчину і центрифугування протягом 60 хв при 6000 об/хв три рази до просвітлення надосадової рідини, перенесення у флакон з бусами світлого осаду, отриманого після лізису еритроцитів, розведення його 1:1 фізіологічним розчином, консервування тіомерсалом 1:10000 і гомогенізування в шуттель-апараті або вручну протягом години, який відрізняється тим, що цуценят-донорів 4-5-місячного віку без попереднього проведення спленектомії заражають підшкірним введенням 0,5 мл крові від спонтанно хворої на бабезіоз собаки, знекровлюють їх в період максимальної паразитемії (яка має бути не меншою 10 %), використовують як антикоагулянт та консервант крові розчин Глюгіциру з розрахунку 1:4 для подовження терміну обробки крові на 1-2 доби, відокремлюють плазму шляхом центрифугування при 3000 об/хв. 15 хв., відмивають еритроцити в фізіологічному розчині при 6000 об/хв. протягом 15 хв. 2-3 рази, лізують осад еритроцитів сапоніном 1:10000, відмивають лізат еритроцитів з 10-кратним об'ємом фізіологічного розчину шляхом центрифугування 30 хв. при 6000 об/хв. 2-3 рази до просвітлення надосадової рідини, переносять верхній шар осаду сірого кольору у флакон, гомогенізують отриманий осад вручну у флаконі з бусами протягом години, консервують виготовлений антиген азидом натрію 1:10000 і зберігають в холодильнику при +2-4°С.

Текст

Спосіб отримання антигену для серологічної діагностики бабезіозу собак, що включає зараження собак-донорів 3-4-місячного віку кров'ю від спонтанно хворої на бабезіоз собаки в дозі 2мл, тотальне знекровлення тварин в період максимальної паразитемії, використання як стабілізатора лимоннокислого натрію з розрахунку 50мл 20%-го розчину на 2 літри крові, відокремлення плазми центрифугуванням при 6000об/хв. протягом 60хв, відмивання еритроцитів від плазми фізіологічним розчином при 6000об/хв. протягом 60хв - триразове, лізування осаду еритроцитів у морозильній камері 12 годин з наступним поступовим розморожуванням при кімнатній температурі, відмивання лізату еритроцитів шляхом змішування з десятьома об'ємами фізіологічного розчину і центрифугування протягом 60хв при 6000об/хв три рази до просвітлення надосадової рідини, перенесення у флакон з бусами світлого осаду, отриманого після U 2 (19) 1 3 14392 4 10хв; відмивання еритроцитів фосфатноосад еритроцитів сапоніном 1:10000, відмивають буферним розчином до просвітлення надосадової лізат еритроцитів з 10-ти кратним об'ємом фізіолорідини і лізування осаду сапоніном; відмивання гічного розчину шляхом центрифугування 30хв. лізату тричі при режимі 3500об/хв. протягом 10хв. при 6000об/хв. 2-3 рази до просвітлення надосапри t=+4°C до просвітлення надосадової рідини; дової рідини, переносять верхній шар осаду сірого перенесення сірого осаду у флакон та зберігання кольору у флакон, гомогенізують отриманий осад при t= -20°C. вручну в флаконі з бусами протягом години, конНедоліком вказаних способів є те, що кров пісервують виготовлений антиген азідом натрію сля знекровлення собак-донорів необхідно оброб1:10000 і зберігають в холодильнику при +2-4°С. ляти в день отримання, втрачається активність Приклад виготовлення антигену для серологіантигену при лізуванні осаду еритроцитів шляхом чної діагностики бабезіозу собак. Для отримання заморожування і розморожування та при зберекрові з максимально високою паразитемією викоженні при t= -20°C, висока вартість консерванта ристовується 4-місячне цуценя живою вагою 6кг. тіомерсалу, що впливає на собівартість антигену Проводиться його дегельмінтизаця препаратом та проведення серологічних досліджень. Прател з розрахунку 1/2 таблетки одноразово. З Корисною моделлю ставиться завдання вигометою знищення ектопаразитів використовується товлення антигену для серологічної діагностики інсектоакарицидна пудра «Bolpho». бабезіозу собак з метою вдосконалення діагностиПісля підготовчої роботи проводиться зараки цього захворювання при хронічному та атипоження тварини збудником бабезіозу. З цією метою вому перебігу, а також з метою визначення титру тварині підшкірно вводиться 0,5мл стабілізованої антитіл в сироватці крові перехворілих тварин для гепарином крові, взятої від спонтанно хворої на визначення рівня їх імунітету. бабезіоз собаки. За твариною встановлюється Поставлене корисною моделлю завдання допостійний клінічний нагляд з обов'язковою щоденсягається тим, що у способі отримання антигену ною термометрією та дослідженням мазків крові, для серологічної діагностики бабезіозу собак, що взятих з кінчика вуха. Коли паразитемія досягає включає, зараження собак-донорів 3-4-місячного 25%, проводиться тотальне знекровлення тваривіку кров'ю від спонтанно хворої на бабезіоз собани. Кров збирається в стерильні флакони з розчики в дозі 2мл, тотальне знекровлення тварин в ном Глюгіциру з розрахунку 1:4 і обробляється на період максимальної паразитемії, використання в наступний день. Плазма відокремлюється від фоякості стабілізатора лимоннокислого натрію з розрмених елементів крові центрифугуванням при рахунку 50мл 20%-го розчину на 2 літри крові, ві3000об/хв. 15хв.; еритроцити відмиваються в фізідокремлення плазми центрифугуванням при ологічному розчині при 6000об/хв. протягом 15хв. 6000об/хв. протягом 60хв, відмивання еритроцитів триразово; отриманий осад еритроцитів лізується від плазми фізіологічним розчином при 6000об/хв. сапоніном, контроль лізису еритроцитів і чистоти протягом 60хв. – триразове, лізування осаду еритматеріалу проводиться шляхом виготовлення мазроцитів у морозильній камері 12 годин з наступним ків та їх дослідження; змішування лізату еритроципоступовим розморожуванням при кімнатній темтів з 10-ти кратним об'ємом фізіологічного розчину пературі, відмивання лізату еритроцитів шляхом і центрифугування 30хв. при 6000об/хв. 2-3 рази змішування з десятьома об'ємами фізіологічного до просвітлення надосадової рідини; робота пророзчину і центрифугування протягом 60хв. при водиться з дотриманням стерильності і при пос6000об/хв. три рази до просвітлення надосадової тійному контролі пофарбованих препаратів під рідини, перенесення у флакон з бусами світлого мікроскопом; зняття верхнього шару осаду (сизуосаду, отриманого після лізису еритроцитів, розватого кольору, який містить найбільшу кількість ведення його 1:1 фізіологічним розчином, консерпаразитів); гомогенізування суміші паразитів вручвування тіомерсалом 1:10000 і гомогенізування в ну в флаконі з бусами протягом години; перевішуттель-апараті або вручну протягом години, згідряння суспензії на чистоту шляхом мікроскопії прино корисній моделі цуценят-донорів 4-5-місячного готованих з неї мазків; флакони з виготовленим віку без попереднього проведення спленектомії антигеном консервують азідом натрію 1:10000, заражають підшкірним введенням 0,5мл крові від щільно закривають кришками і зберігають в холоспонтанно хворої на бабезіоз собаки, знекровлюдильнику при +2-4 °С. Вихід антигену з 0,5 літрів ють їх в період максимальної паразитемії (яка має цільної крові становить 10мл. бути не меншою 10%), використовують в якості Виготовлений запропонованим способом анантикоагулянта та консерванта крові розчин Глютиген для серологічної діагностики бабезіозу собак гіциру з розрахунку 1:4 для подовження терміну може знайти застосування для діагностики бабезіобробки крові на 1-2 доби, відокремлюють плазму озу в державних лабораторіях ветеринарної мешляхом центрифугуванням при 3000об/хв. 15хв., дицини, в державних підприємствах ветеринарної відмивають еритроцити в фізіологічному розчині медицини, приватних клініках. при 6000об/хв. протягом 15хв. 2-3 рази, лізують Комп’ютерна верстка Л.Литвиненко Підписне Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601

Дивитися

Додаткова інформація

Назва патенту англійською

Method for producing antigen for serological diagnosis of canine babesiosis

Автори англійською

Semenko Olena Valentynivna, Halat Vladyslav Fedorovych

Назва патенту російською

Способ получения антигена для серологической диагностики бабезиоза собак

Автори російською

Семенко Елена Валентиновна, Галат Владислав Федорович

МПК / Мітки

МПК: A61K 39/018

Мітки: діагностики, отримання, антигену, спосіб, серологічної, собак, бабезіозу

Код посилання

<a href="https://ua.patents.su/2-14392-sposib-otrimannya-antigenu-dlya-serologichno-diagnostiki-babeziozu-sobak.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентів України">Спосіб отримання антигену для серологічної діагностики бабезіозу собак</a>

Подібні патенти