Спосіб видалення кріопротектора із суспензії тромбоцитів

Спосіб видалення кріопротектора із суспензії тромбоцитів шляхом розведення суспензії клітин аутологічною плазмою, центрифугування, вида 3 15014 4 еритроцитів, центрифугування проводять при 15хвилин. Плазму над осадом клітин видаляли. 1700-1800g протягом 12-13 хвилин, після видаЗалишок плазми і шар тромбоцитів з шаром еритлення супернатанту здійснюють відбір залишку роцитів відбирали за допомогою пластикової піпеплазми і шару тромбоцитів з шаром еритроцитів, тки, до одержаного концентрату клітин додавали до одержаного концентрату клітин додають аутопаутологічну плазму у співвідношенні 1:2, ретельно лазму у співвідношенні 1:2, після чого центрифуперемішували та центрифугували при 3000 об/хв. гують протягом 1 хвилини при 1700-1800g і здійс(1760g) протягом 1 хвилини. Після центрифугунюють відбір суспензії тромбоцитів. вання обережно відбирали суспензію тромбоцитів Щадне осадження клітин з меншою центробінад осадом еритроцитів. Введенням жною силою на пружну "еритроцитарну подушку" у додаткового об'єму аутологічної плазми до супухкий осад виключає необхідність додаткового спензії доводили концентрацію клітин до необхідвведення антикоагулянта, а повторне центрифугуного для досліджень рівня. вання отриманої суспензії клітин (тромбоцити, При порівняльному аналізі встановлено, що еритроцити з аутоплазмою), дозволяє уникнути тромбоцити, які перенесли процедуру видалення ресуспендування тромбоцитів, так як вони лишакріопротектору заявленим способом, зберігають ються суспендованими у плазмі. Це забезпечує здатність агрегувати у відповідь на АДФ достовірпідвищення рівня збереженості функціональних но вищою, ніж тромбоцити, які перенесли процевластивостей тромбоцитів та зменшення втрат дуру видалення кріопротектору за способомклітин під час видалення кріопротектору. прототипом. Кількісні втрати клітин після видаленСпосіб здійснюють таким чином. ня кріопротектору заявленим способом були досСуспензію тромбоцитів, що містить кріопротектовірно нижчими (див. табл.). тор, повільно розводять аутологічною плазмою у співвідношенні 1:2. Швидкість додавання залежить Таблиця від концентрації і проникності кріопротектору для мембрани тромбоцитів. Отриману суспензію обеАгрегаційна здатність та режно нашаровують на аутологічні еритроцити кількісні втрати тромбоцитів після (одержані при фракціонуванні крові), центрифугувидалення кріопротектору двома способами ють. Супернатант максимально видаляють. Здійснюють відбір залишку плазми і шару тромбоцитів з корисна модель спосіб-прототип шаром еритроцитів. До одержаного концентрату Степінь агрегаклітин додають аутологічну плазму у співвідноції на АДФ (200 38±6% 10±5% шенні 1:2, ретельно перемішують і центрифугують. мкмоль) Проводять обережний відбір суспензії тромбоциКількісні втрати 8±3 % 21±4% тів, що знаходиться над осадом еритроцитів. Вветромбоцитів денням додаткового об'єму аутологічної плазми до суспензії доводять концентрацію клітин до необДжерела інформації: хідного для досліджень рівня. 1. Arnaud F., Kapnik E., Meryman H.T. // Приклад. Platelets.- 2003. -Vol. 14. - P. 131-137 Видаляли ДМСО із суспензії тромбоцитів з ме2. Arnaud F.P and Pegg D.E. // Cryobiology. тою оцінки впливу 30-хвилинної еквілібрації кон1990. - Vol. 27. - P.130-136 центрату тромбоцитів з 0,75М розчином ДМСО на 3. Beaujean Fr., Leforestier Ch., Mannoni P. // агрегаційні властивості тромбоцитів. Cryo-Letters. - 1979. - Vol. 1. -P.98-103 До 4мл суспензії тромбоцитів, що містить кріо4. Hester J.P., Ventura G.J.// Abstract book of 3протектор, додавали протягом 1 хвилини 8мл ауrd International Congress of World Apheresis тологічної плазми. Одержану суспензію обережно Assotiation. Amsterdam, the Motherlands.-1996.- P. нашаровували на аутологічну еритроцитну масу в 103. об'ємі 2мл у пластиковій 15-мл пробірці і центрифугували при 3000 об/хв. (1760g) протягом Комп’ютерна верстка Г. Паяльніков Підписне Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601