Спосіб отримання та культивування фібропластів та міогенних клітин новонароджених щурів

1. Спосіб отримання та культивування фібробластів та міогенних клітин новонароджених щурів, що включає отримання в асептичних умовах субстрату із скелетно-м'язової тканини, відмивання від крові розчином Хенкса з додаванням гентаміцину із розрахунку 10мкг/мл, механічного подрібнення та розміщення в суміші для диспергування з подальшим відмиванням від суміші для диспергування, розміщенням у культуральній суміші і культивуванням 5-7 діб, який відрізняється тим, що як компоненти суміші для диспергування вико U 1 3 18444 4 10мкг/мл, механічного подрібнення з подальшим стерильний посуд для того, щоб при посадці в курозміщенням в суміші для диспергування, потім льтуральних флаконах була однакова початкова відмиванням від суміші для диспергування, розмікількість клітин. На другу добу культивування пощенням у культуральну суміш і культивуванням 5водили заміну поживного середовища і в подаль7 діб. шому культивували без змін. Суть способу отримання та культивування пеНовим у способі, що заявляється, є те, що вирвинних культур полягає в тому, що для отриманкористовували 1-2-х денних новонароджених щуня міогенних клітин новонароджених щурят дезирят, що зберігало життя самці, в якості компоненнфікували в 70° етиловому спирті, декапітували та тів суміші для диспергування використовували проводили девісцерацію з видаленням щкіри. Ту0,25% розчин трипсину та розчин версену в співшки після трьохкратного відмивання від форменвідношенні 1:1 і гентаміцин із розрахунку 10мкг/мл, них елементів крові в розчині Хенкса з антибіотифрагменти тканини інкубують протягом 40 хвилин ками (гентаміцин із розрахунку 10мкг/мл), на магнітному змішувачі при температурі 37°С, подрібнювали ножицями. Подрібнену таким чином першу порцію суміші, яка містить багато форментканину для дезагрегації переносили в колбу з них елементів крові, зливають, осад заливають розчином для диспергування. Співвідношення ткасвіжим розчином для диспергування, знову інкунини і розчину складало 1:3. В якості розчину для бують 20 хвилин і тільки тоді вже відбирають клідиспергування використовували суміш 0,25% розтинну завись в центрифужні пробірки, центрифучин трипсину та розчин версену в співвідношенні гують при 1000об/хв протягом 5хв, надосадкову 1:1 з додаванням гентаміцину із розрахунку рідину зливають, а осад ресуспендують в пожив10мкг/мл. Диспергування проводили на магнітному ному середовищі складу: середовище RPMI змішувачі при температурі 37°С протягом 40 хви1640, ембріональна теляча сироватка у співвіднолин з двократною зміною розчину для диспергушенні 9:1 та гентаміцин із розрахунку 10мкг/мл та вання для видалення крові. Далі клітинну завись поміщають в стерильний посуд. піддавали повторному диспергуванню: кожні 10 Використання розчину версену як одного з хвилин суміш зливали в центрифужні пробірки та компонентів суміші для диспергування дозволяє центрифугували при 1000об/хв протягом 5хв. Далі добитися ретельного розділення тканин на фрагосад ресуспендували поживним середовищем менти і видалення продуктів життєдіяльності кліскладу: середовище RPMI - 1640, ембріональна тин, оскільки розчин версену потенціює дію розчителяча сироватка у співвідношенні 9:1 та гентаміну трипсину та знижує здатність клітин до цин із розрахунку 10мкг/мл та поміщали в стериагрегації. Використання гентаміцину надає можлильний посуд. Таку маніпуляцію проводили стільки вість знищення більш широкого спектра інфекційразів поки не отримували необхідну кількість кліних агентів, і в той же час концентрація антибіотитин. Підрахунок клітин проводили в камері Горяєка, що використовується, є порівняно малотоксичва. Клітини після дипергування збирали в окремий малотоксичною для клітин культури. Комп’ютерна верстка Л. Купенко Підписне Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601