Спосіб моделювання гепатиту

Изобретение относится к области экспериментальной терапии и физиологии, и может найти применение для изучения ультраструктурных и метаболических закономерностей протекания восстановительных процессов в печени при скрининге новых лекарственных средств, а также природных и преформированных физических факторов. Прототипом изобретения является способ моделирования гепатита путем подкожного введения 50%-ного раствора ССІ4 на оливковом масле из расчета 0,1 мл на 100 г массы животного [1]. Приведенные авторами результаты морфологического анализа показали, что изменения в структуре паренхимы печени (некротизированные гепатоциты, отек и разрыхление стромы, клеточная инфильтрация лейкоцитами, разрастание соединительной ткани т. п.) сходы с изменениями в печени больных персисти-рующими гепатитами, с последующим прогрессированием процесса в фиброзогенном направлении (жировая и вакуольная дистрофия гепатоцитов, фокальные и перипортальные некрозы, нарушение балочного строения долек и грубые прорастания соединительной ткани). Принципиальным недостатком данного способа является развитие патологического процесса в сторону фиброза. Кроме этого, практически отсутствуют или выражены весьма слабо основные морфологические признаки восстановительного периода гепатита - клеточная пролиферация с наличием митозов, уменьшение воспалительной инфильтрации лимфоцитами, резорбция некротических масс, нормализация структурных долек, увеличение числа одноядерных поли-плоидных клеток и пр. Динамика метаболических показателей (активность АлАТ и АсАТ в сыворотке крови), а также иммунологических тестов в условиях модели не соответствуют наблюдаемой в восстановительную фазу процесса у больных, перенесших вирусный гепатит. В основу изобретения поставлена задача усовершенствования способа моделирования гепатита, путем комплексного воздействия химического и физического факторов развивающих специфические морфологические, биохимические и иммунологические изменения и за счет этого обеспечивается приближение модели к клиническому течению восстановительного периода гепатита. Благодаря этому появляется возможность изучения ультраструктурных и метаболических закономерностей протекания восстановительных процессов в печени при скрининге новых лекарственных средств, природных и преформированных физических факторов. Поставленная задача решается тем, что в способе моделирования гепатита, использующем подкожное введение экспериментальным животным 50% раствора четыреххлористого углерода на оливковом масле, согласно изобретению, дополнительно экспериментальных животных ежедневно в течение 17 дней подвергают двухчасовому воздействию давлением 220 мм рт. ст., а чётыреххлористый углерод вводят в дозе 0,05 мл на 100 г массы животного через два часа после гипоксического воздействия в первый, четвертый и седьмой дни. Указанная совокупность существенных признаков заявляемого изобретения обеспечивает получение технического результата: - При применении ССІ4 в виде подкожных инъекций экспериментальным животным удается достичь получения модели с признаками, характерными для острой фазы гепатита; - Установлено, что барокамерная гипоксия указанных параметров повышает гепатотоксичность ССІ4 в наибольшей степени при назначении гипоксии в среднем за два часа до введения ССІ4; - Потенцирующий эффект гипоксии особенно отчетливо проявляется при дозах 0,05 мл на 100 г массы после трехкратной инъекции яда; - Сочетание гипоксии с низкими дозами ССІ4 (0,05 мл на 100 г массы) не только вызывает острое поражение печени, но и стимулирует репаративные процессы в ней; - Назначение гипоксии ежедневно до 17 процедуры позволило воспроизвести поражение печени с продолжительным восстановительным периодом, т. е. более адекватным по длительности к таковому у больных гепатитом; — Комплексное воздействие (гипоксия +ССІ4) для формирования острой фазы гепатита ограничилось 7 днями (поэтому ССІ4 вводят в первый, четвертый и седьмой дни), что примерно соответствуе т продолжительности формирования острой фазы у больных вирусными гепатитами. Изобретение иллюстрируется следующим примером. Крысы линии Вистар (12 штук) массой 180-200 г подвергались на протяжении 17 дней ежедневному воздействию давлением 220 мм рт, ст. в барокамере. На 1-ые, 4-ые и 7-ые сутки через два часа после гипоксического воздействия крысам вводилось подкожно 0,05 мл на 100 г массы животного 50%-ный раствор ССІ4 на оливковом масле. По внешним признакам особых изменений не наблюдалось: крысы чистые, относительно бодрые, несколько снижен аппетит. На различных стадиях воспроизведения модели (8, 17 и 42 дни) было забито по 4 крысы. На 8-ой день моделирования выявлены обширные дистрофические и некробиотические изменения с наличием вакуольной и жировой дистрофии и развитым воспалительным процессом в паренхеме печени. На 17-ый день изменения в печени характеризовались затуханием дистрофических и воспалительных реакций, резорбцией некротических масс, активацией репаративных процессов с увеличением двуядерных и гипертрофированных гепатоцитов. На 42-ой день отмечалось восстановление балочного строения долек, уменьшение лимфоцитарной инфильтрации. Во всех отделах долек встречались двуядерные и гипертрофированные гепатоциты. Печень приобрела нормальные размеры и окраску. Данные биохимических и иммунологических исследований приведены в табл. Морфологические, биохимические и иммунрлогические показатели подтверждают ярко выраженный восстановительный период, приближающийся к клиническому.