Спосіб виділення стовбурових клітин гемопоезу з ембріональних кровотворних органів ембріонів людини
Номер патенту: 41302
Опубліковано: 17.09.2001
Автори: Новицька Алла Володимирівна, Марков Ігор Семенович, Смикодуб Олександр Іванович
Формула / Реферат
1. Способ выделения стволовых гемопоэтических клеток из кроветворных органов эмбрионов человека , включающий в себя криоконсервирование, оттаивание и центрифугирование, отличающийся тем, что клеточную суспензию гемопоэтических клеток подвергают криоконсервированию с криопротектором, а оттаивание осуществляют при комнатной температуре.
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что полученную после центрифугирования надосадочную жидкость повторно подвергают криоконсервированию с криопротектором.
Текст
1. Способ выделения стволовых гемопоэтических клеток из кроветворных органов эмбрионов человека, включающий в себя криоконсервирование, оттаивание и центрифугирование, отличающийся тем, что клеточную суспензию гемопоэтических клеток подвергают криоконсервированию с криопротектором, а оттаивание осуществляют при комнатной температуре. 2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что полученную после центрифугирования надосадочную жидкость повторно подвергают криоконсервированию с криопротектором. (19) (21) 94042151 (22) 04.04.1994 (24) 17.09.2001 (46) 17.09.2001, Бюл. № 8, 2001 р. (72) Смикодуб Олександр Іванович, Новицька Алла Володимирівна, Марков Ігор Семенович (73) Центр ембріональних тканин "Емселл", UA (56) WO 89/04168. Клиническое применение криоконсервированных гемопоэтических клеток эмбриональной печени человека // Методические рекомендации МЗ Украины, 1991, 9 с. Touraine J.I. and al. Fetal liver transplantation in immunodeficiencies and inborn errors of metabolism // Fetal liver transplantation, New York, 1985, р. 299-313. 41302 Toxoplasmo-sis/IgM), содержание CД34 (Progenitor Cells). Контейнеры извлекают из жидкого азота, и они медленно оттаивают при комнатной температуре. Затем проводится центрифугирование при 1500 об/мин. в течение 5 минут. Недифференцированные лимфоидные клетки находятся в надосадочной жидкости и в зависимости от задачи или трансплантируются или переносятся в стерильных условиях в новые контейнеры и вновь криоконсервируются по программе с криоконсервантом. Проводится повторное исследование на бактериальную стерильность, вновь определяется содержание CД34. Исследование проведено на клеточных суспензиях, выделенных из печени человеческого эмбриона возрастом 5-6 недель. Именно в эти сроки содержание недифференцированных лимфоидных элементов достигает 15-17% в клеточной массе. В более поздние сроки их содержание заметно падает. Способ позволяет выделить до 70-80% недифференцированных лимфоидных элементов, процент СД34 в клеточной суспензии достигает 71,2±1,6%. При объеме материала от 0,3 до 5,0 мл способ позволяет получить клеточную суспензию на 70-80% состоящую из недифференцированных лимфоидных элементов, при содержании СД34 до 71,2±1,6%. Обогащённая таким образом клеточная суспензия может расцениваться как состоящая из стволовых клеток. Процент сохранности СД34 при таком способе выделения в среднем равен 64,8 ± 3,26%. Источники информации 1. Клиническое применение криоконсервированных гемопоэтических клеток эмбриональной печени человека. Методические рекомендации МО3 Украины, 1991 г. 9 стр. 2. Touraine J.I. and al. Fetal liver transplantation in immunodeficiencies and inborn errors of metabolism // Fetal liver transplantation, New York, 1985, р. 299-313. 3. Алексанян М.Ж., Рыжко В.В., Селезнева О.М. Получение стволовых гемопоэтических клеток из периферической крови больных гемобластозами Гематология и трансфузиология, 1990, № 6, с. 9-12. Содержание стволовых клеток в клеточных суспензиях эмбриональной печени человека (N=5) Перед криоконсервированием N Общее содерж. клеток (х106) Недиф. лимф. кл. - % Недиф. лимф. кл. - (х106) CD34 - % СД34 - (х106) Общее содерж. клеток (х106) Недиф. лимф, кл. - % Недиф. лимф. кл. - (х106) CD34 - % CD34 - (х106) Процент сохранности CD34 Миним. Макс. Средн. 5 21,20 42,40 30,60 5 16,80 28,00 19,52 5 3,35 11,90 5,60 5 13,02 25,23 17,19 5 2,76 10,70 5,54 После оттаивания и центрифугирования 5 2,54 8,21 4,90 5 71,00 82,00 76,80 5 1,80 6,40 3,78 5 66,00 74,00 71,20 5 1,76 5,99 4,11 5 56,00 72,00 64,80 Ошибка средн. 4,11 2,13 1,59 2,19 1,43 Квадрат. отклон. 9,20 4,77 3,57 4,91 3,20 1,06 1,93 0,84 1,59 0,70 3,26 2,37 4,32 1,87 3,56 1,58 7,29 __________________________________________________________ ДП "Український інститут промислової власності" (Укрпатент) Україна, 01133, Київ-133, бульв. Лесі Українки, 26 (044) 295-81-42, 295-61-97 __________________________________________________________ Підписано до друку ________ 2002 р. Формат 60х84 1/8. Обсяг ______ обл.-вид. арк. Тираж 50 прим. Зам._______ ____________________________________________________________ УкрІНТЕІ, 03680, Київ-39 МСП, вул. Горького, 180. (044) 268-25-22 ___________________________________________________________ 2
ДивитисяДодаткова інформація
Назва патенту англійськоюMethod for isolation of stem hematopoietic cells from blood-forming organs of human's embryos
Автори англійськоюSmykodub Oleksandr Ivanovych, Novytska Alla Volodymyrivna, Markov Ihor Semenovych
Назва патенту російськоюСпособ выделения стволовых гемопоэтических клеток из кроветворных органов эмбрионов человека
Автори російськоюСмыкодуб Александр Иванович, Новицкая Алла Владимировна, Марков Игорь Семенович
МПК / Мітки
МПК: A61K 35/54, A61K 35/407, C12N 5/08
Мітки: спосіб, кровотворних, виділення, стовбурових, ембріонів, клітин, органів, гемопоезу, ембріональних, людини
Код посилання
<a href="https://ua.patents.su/2-41302-sposib-vidilennya-stovburovikh-klitin-gemopoezu-z-embrionalnikh-krovotvornikh-organiv-embrioniv-lyudini.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентів України">Спосіб виділення стовбурових клітин гемопоезу з ембріональних кровотворних органів ембріонів людини</a>
Наступний патент: Спосіб лікування апластичної анемії
Випадковий патент: Спосіб корекції хронічного колостазу у дітей при аномаліях розвитку і положення товстого кишечнику