Штам mycobacterium avium для виготовлення туберкуліну очищеного для птиці

Туберкуліногенний штам із мікобактерій пташиного виду М avium-IEKBM УААН для виготовлення туберкуліну очищеного PURIFIED PROTEIN DE-RIVATIVE (ППД) для птиці, колекція мікроорганізмів лабораторії вивчення туберкульозу ІЕКВМ УААН Винахід відноситься до ветеринарної мікробіологи та біотехнологм, зокрема для одержання туберкуліногенного штаму мікобактерій пташинного виду, який може використовуватись для виготовлення туберкуліну очищеного (Purified Protein Derivative) Існує штам пташинного виду який використовується для виготовлення туберкуліну очищеного для птахів (Сб наук робіт ВГНКІ - М ,1994, т55,С 61-67) Цей штам володіє добрими туберкуліногенними властивостями, а одержаний з нього туберкулін є активним та специфічним Проте, використання цього штаму в біологічній промисловості неможливе через відсутність його в Україні Штам мікобактерій (М avium-IEKBM УААН) пташинного виду походить від референтного штаму (М avium-166), який одержаними шляхом селекції на яєчному живильному середовищі для культивування мікобактерій При культивуванні на синтетичному живильному середовищі штам придбав хороші репродуктивні та туберкуліногенні властивості В основу винаходу, що передбачається, поставлено завдання виділити туберкуліногенний штам із мікобактерій пташин ного виду М aviumIEKBM УААН для виготовлення туберкуліну очищеного (ППД) для птиці Туберкуліногенний штам М avium-IEKBM УААН зберігають на живильному середовищі Павловського в колекції культур мікобактерій лабораторії вивчення туберкульозу Інституту експериментальної і клінічної ветеринарної медицини Української академії аграрних наук (ІЕКВМ УААН) Штам М avium-IEKBM УААН є збудник туберкульозу пташиного виду має слідуючі властивості У препаратах, пофарбованих за методом Циля-Нільсена, в полі зору мікроскопа спостерігають такі короткі та довгі, прямі червоного кольору паличкі Культурально-морфолопчні властивості - мікобактерії цього штаму виростають при температурі 37-45°С на яєчному живильному середовищі для культивування мікобактерій через 15-20 діб, а на середовищі Павловського -через 15-30 днів після висіву у вигляді гладеньких, овальних, блискучих маслянистої консистенції, кратероподібних у вигляді „тюрбанів" колоній світло-сірого кольору Культура цього штаму повільно виростає на яєчному середовищі і при 25°С у вигляді поодиноких, гладеньких, блискучих колоній з кратероподібними краями БІОХІМІЧНІ властивості штам має негативні каталазну, формамидазну активність та реакцію з Твін-80 і позитивну реакцію зтелурітом калію БІОЛОГІЧНІ властивості культура мікобактерій цього штаму є патогенною для свиней, кролів, курей При підшкірному або внутрішньом'язовому введенні цього штаму великій рогатій худобі, морським свинкам в дозі 1мг мікобактерій в 1 см 3 стерильного фізіологічного розчину зумовлює сенсибілізацію їх до туберкуліну та до комплексного алергену із атипових мікобактерій Туберкуліногенність при культивуванні на синтетичному живильному середовищі володіє репродуктивними та туберкуліногенними властивостями не більше, як на протязі 6-8 пасажів (О со Ю 51326 вильному середовищі Павловського, висівають бактеріологічною петлею в бугелі з синтетичним живильним середовищем і культивують при температурі +37°С протягом 60-75 діб Після ЦЬОГО бугелі з вирощеною бактерійною масою автоклавують при t 120°C на протязі 60 хвилин Бактеріальну масу ВІДДІЛЯЮТЬ, а з культурального фільтрату готують туберкулін (ППД) для птиці Виготовлений таким чином туберкулін (ППД) для птиці із штаму М avium-IEKBM УААН випробовують на концентрацію вуглеводневих ІОНІВ (рН), вміст білку (не менше 60%), однорідність розчину, стерильність, реактогенність, активність, специфічність та відсутність сенсибілізуючих властивостей в дослідах на морських свинках Випробовування свідчать про те, що туберкулін, виготовлений із штаму М avium-IEKBM УААН є високоактивним, специфічним і нереактогенним препаратом інтервалом 1,5-2 МІСЯЦІ Використання штаму М avium-LUKBM УААН із збудника туберкульозу пташиного виду для вигоПриклад товлення туберкуліну очищеного (ППД) для птиці Запропонованим штамом М avium-IEKBM УАзабезпечує більш ефективне виявлення хворих на АН, користуються для виготовлення туберкуліну туберкульоз свиней та птиці (ППД) для птиці Для цього бактерійну масу, вирощену на жи Стабільність основних властивостей штаму при довготривалому збереженні - штам зберігає свої властивості при вирощуванні на середовищі Павловського Патогенність штаму- підтримують шляхом пасажування на кролях, курях, індичках Стабільність генетичних властивостей - штам не володіє реверсивними властивостями на синтетичному живильному середовищі при 6-8 пасажах Штам вільний від іншої бактерійної мікрофлори та грибків Основні умови зберігання - штам зберігають на живильному середовищі Павловського („Туберкулез животных и меры борьбы с ним" Ред Ю А Кассича, 1990г), або на яєчному живильному середовищі для культивування мікобактерій при температурі +4-12°С Підтримання та освіження штаму - шляхом пересіву на живильне середовище Павловського з ДП «Український інститут промислової власності» (Укрпатент) вул Сім'ї Хохлових, 15, м Київ, 04119, Україна ( 0 4 4 ) 4 5 6 - 2 0 - 90 ТОВ "Міжнародний науковий комітет" вул Артема, 77, м Київ, 04050, Україна (044)216-32-71