Штам протеіногенний скотохромогенний mycobacterium scrofulaceum №31/82 для виготовлення моноалергену

Штам протеіногенний скотохромогенний Mycobacterium Scrofulaceum №31/82 для виготовлення моноалергену, колекція мікроорганізмів лабораторії вивчення туберкульозу ІЕКВМ УААН. Зоя (13) 40848 (11) UA теринарної медицини Української академії аграрних наук (ІЕКВМ УААН). Штам протеіногенний скотохромогенний Mycobacterium Scrofulaceum №31/82 має слідуючі властивості: Культурально-морфологічні властивості- у препаратах, пофарбованих за методом Ціля-Нільсена, в полі зору мікроскопа спостерігають короткі та довгі прямі червоного кольору палички. Колонії мікобактерій цього штаму ростуть при температурі 37-38 оС на яєчному живильному середовищі для культивування мікобактерій протягом 10-20 днів, а на середовищі Павловського протягом 15-30 днів після посіву у вигляді гладеньких блискучих маслянистої консистенції, жовто-оранжевого кольору. Повільно ростуть ці мікобактерії при температурі 25° С, а при температурі 45° С не виростають. Біохімічні властивості: штам не росте на яєчному живильному середовищі для культивування мікобактерій з 5% водним розчином хлористого натрію, має позитивну каталазну активність, реакцію з твін-80 і негативну реакцію з нікотинамідом та піразінамідом. Біологічні властивості: культура мікобактерій штаму є непатогенною для великої рогатої худоби, морських свинок та кролів. При підшкірному або внутрішньом'язевому введені цим тваринам зависі 1 мг мікобактерій в 1 см3 фізіологічного розчину мікобактерій цього штаму зумовлює сенсибілізацію їх до туберкуліну для ссавців та до комплексного алергену з атипових мікобактерій. Протеіногенність: при вирощуванні на синтетичному живильному середовищі володіє репро (19) Винахід відноситься до ветеринарної мікробіології та біотехнології, зокрема для одержання протеіногенного скотохромогенного штаму атипових мікобактерій, який може використовуватись для виготовлення моноалергену з атипових мікобактерій (ААМ). Існує штам атипових мікобактерій виду Scrofulaceum-12-C, з якого виготовляють комплексний алерген з атипових мікобактерій (КАМ) (Зб.наук.робіт ВГНКІ.- М.,1994, т.55.- С.61-67). Цей штам володіє добрими протеіногенними властивостями, а одержаний з нього моноалерген, є активним та специфічним. Проте, довготривале використання цього штаму неможливе через нестабільність росту на синтетичному живильному середовищі, а використання його в біологічній промисловості неможливе за відсутністю його в Україні. В основу винаходу, що передбачається, поставлено завдання виділення штаму мікобактерій Mycobacterium Scrofulaceum з епізоотичної культури атипових мікобактерій. Штам протеіногенний скотохромогенний Mycobacterium Scrofulaceum №31/82 походить від скотохромогенної епізоотичної культури атипових мікобактерій, яка одержана шляхом селекції на яєчному живильному середовищі для культивування мікобактерій. На синтетичному живильному середовищі штам придбав хороші репродуктивні та протеіногенні властивості. Штам протеіногенний скотохромогенний Mycobacterium Scrofulaceum №31/82 зберігають на живильному середовищі Павловського в колекції культур мікобактерій лабораторії вивчення туберкульозу Інституту експериментальної і клінічної ве А ____________________ 40848 дуктивними та протеіногенними властивостями не більше, як на протязі 4-5 пасажів. Стабільність основних властивостей штаму при довготривалому збереженні - штам зберігає свої властивості при вирощуванні на середовищі Павловського та при щорічному її пасажуванні на морських свинках. Штам вільний від іншої бактеріальної мікрофлори та грибків. Основні умови зберігання - штам зберігають на живильному середовищі Павловського, або на сухому живильному середовищі для культивування мікобактерій при температурі 4-12° С. Підтримання штаму проводять шляхом пересіву на живильне середовище Павловського з інтервалом 1,5-2 місяці. Приклад: запропонований штам використовують для виготовлення моноалергену, що входить до складу алергену із атипових мікобактерій (ААМ). Для цього бактеріальну масу, вирощену на живильному середовищі Павловського, висівають бактеріологічною петлею в бутлі з синтетичним живильним середовищем і культивують при температурі 37° С протягом 1,5-2 місяців. Потім бутлі з культурою витримують в автоклаві при температурі 120° С на протязі 60 хвилин. Бактерійну масу відділяють, а з культурального фільтрату готують моноалерген з цього виду мікобактерій. Виготовлений моноалерген з штаму випробовують на активність, реактогенність та на відсутність сенсибілізуючих властивостей в дослідах на здорових та сенсибілізованих цією культурою морских свинках. Випробування свідчать про те, що моноалерген з штаму протеіногенного скотохромогенного Mycobacterium Scrofulaceum №31/82 є активним, нереактогенним та специфічним препаратом. Використання штаму для виготовлення моноалергену, який входить до складу алергена з атипових мікобактерій (ААМ), забезпечує диференціацію специфічних та параалергічних реакцій на туберкулін у великої рогатої худоби. Тираж 50 екз. Відкрите акціонерне товариство «Патент» Україна, 88000, м. Ужгород, вул. Гагаріна, 101 (03122) 3 – 72 – 89 (03122) 2 – 57 – 03 2 40848 3