Спосіб діагностики антитоксичного антистафілококового імунітету у дітей, що часто хворіють, в гострому періоді стенозуючого ларинготрахеїту та грипу

Спосіб діагностики антитоксичного антистафілококового імунітету у дітей, що часто хворіють, в гострому періоді стенозуючого ларинготрахеїту та грипу шляхом імунологічного дослідження сироватки крові, який відрізняється тим, що розведену 1 10 сироватку крові шактивують при температурі 56°С протягом ЗО хвилин, вносять її по 0,01мл у лунки імунологічної Винахід відноситься до медицини, а саме до КЛІНІКИ внутрішніх хвороб і може бути використаний у діагностиці грипу, гострого стенозуючого ларинготрахеїту Найбільш близьким до запропонованого способу є робота [1], в якій розглядається метод діагностики ступеня тяжкості інфекційного процесу з визначенням метаболітів оксиду азоту при гострих респіраторних вірусних інфекціях Однак, використання методу оцінки стану антитоксичного антистафілококкового імунітету, ступеня тяжкості інфекційного процесу, у часто та тривало хворіючих дітей з допомогою титру антистафілококкового антиальфатоксину в сироватці крові не відомо В основу запропонованого винаходу поставлена задача удосконалення способу діагностики антитоксичного антистафілококкового імунітету шляхом визначення титру стафілококкового антиальфатоксину, що дає можливість з високою достовірністю оцінити ступінь тяжкості захворювання та динаміку патологічного процесу Поставлена задача вирішується тим, що, згідно винаходу, розведену 1 10 сироватку крові шактивують при температурі 56°С на протязі ЗО хвилин, вносять її по 0,01мл у лунки імунологічної камери, добавляють у лунки по 0,01 мл стафілококового антиальфатоксину в зменшуваних розведеннях від 1 2 до 1 64 та по одній краплі 30% розчину еритроцитів кроля, розташовують імунологічну камеру з лунками в термостаті на 1 годину при температурі 37°С, після чого виявляють рівень титру стафілококового антиальфатоксину в сироватці крові шляхом контролю і при значеннях титру в лунках 0,86 - 0,90МЕ/мл визначають легкий перебіг захворювання, при значеннях 0,50 - 0,54МЕ/мл визначають середній ступінь тяжкості, а при показниках 0,15 - 0,25МЕ/мл констатують тяжкий ступінь захворювання в порівнянні з показниками контрольної групи - 1,09 -111МЕ/МЛ камери, добавляють в лунки по 0,01 мл стафілококкового антиальфатоксину в зменшуваних розведеннях від 1 2 до 1 64 та по одній краплі 30% розчину еритроцитів кроля, після чого розташовують імунологічну камеру з лунками в термостаті на 1 годину при температурі 37°С, потім виявляють рівень титру стафілококкового антиальфатоксину в сироватці крові шляхом контролю і при значеннях титру 0,86 - 0,90МЕ/мл визначають легкий перебіг захворювання, при значеннях 0,50 0,54МЕ/мл визначають середній ступінь важкості, а при показниках 0,15 - 0,25МЕ/мл констатують важкий ступінь захворювання, в порівнянні з показниками контрольної групи - 1,09 - 1,11 МЕ/мл Схема постановки реакції представлена в таблиці Оцінку реакції здійснювали по 50% гемолізу еритроцитів через 1 - 2 години після закінчення інкубації При правильній постановці реакції в контролі №1 гемоліза не спостерігається, в контролі №2 завжди спостерігається повний гемоліз еритроцитів Розведення стафілококкового альфатоксину 1 2 та 1 64 готували попередньо із робочого розведення альфатоксину-мікропіпеткою набирали стільки десятих мілілітрів токсину, скільки міститься його в одному мілілітрі та доводили до ЮОмл 0,9% розчином хлориду натрію О о о> ю 54900 Під спостереженням знаходилось 120 часто та тривало хворіючих дітей різними формами ГРВІ у ВІЦІ від 2 до 6 років У 65 дітей захворювання протікало у формі гострого стенозуючого ларинготрахеїту, у 55 дітей - у формі грипу Контрольну групу становили 40 здорових дітей того ж віку На основі запропонованого способу був визначений граничний рівень показників титру стафілококкового антиальфатоксину сироватки крові при різних ступенях важкості патологічного процесу в гострому періоді захворювання В порівнянні з прототипом, запропонований спосіб діагностики титру стафілококкового антиальфатоксину у часто та тривало хворіючих дітей, в гострому періоді стенозуючого ларинготрахеїту та грипу, дозволяє з більш достовірною точністю провести оцінку антитоксичного анти стафілококкового імунітету, оцінити ступінь тяжкості та динаміку патологічного процесу, що дозволить своєчасно призначити хворим дітям адекватну терапію Список літератури 1 Клиническая иммунология и аллергология под ред /Л Иегера -1990 - М Медицина -т 1 527 с 2 Колб В Г Камышников В С Клиническая биохимия 1976 -Минск изд-во Беларусь -312с 3 Железнякова Г Ф Иммунитет против респираторно-вирусных инфекцийу детей / Педиатрия 1995 - № 5 - С 89-93 4 Стефани Д В , Вельтищев Ю Е Иммунология и иммунопатология детского возраста Руководство для врачей - М Медицина -1996 -384 с 5 Иммунология инфекционного процесса Руководство для врачей Под редакцией В И Покровского, С П Гордиенко, В И Литвинова - Москва, 1994 -305 с Таблиця Схема постановки реакції визначення титру стафілококового антиальфатоксину в розробленій модифікації Лунки Інгредієнти Дослід Контроль 8-N1 9-N2 0,01 1 Сироватка крові 1 10 2 3 4 5 6 7 0,01 0,01 0,01 1 2 р-н 0,01 0,01 0,01 0,01 0,01 0,01 1 4 0,01 1 8 0,01 1 16 0,01 1 32 0,01 1 64 1 64 1 крап 1 крап 1 крап 1 крап 1 крап 1 крап 1 крап 1 крап 1крап 16 3 4 2 1 0,5 Стафілококовий токсин в 0,01 роборозведеннях чий 100% 30% розчин еритроцитів кроля Вміст антитоксину (МЕ/мл) Підписано до друку 03 04 2003 р Тираж 39 прим ТОВ "Міжнародний науковий комітет" вул Артема, 77, м Київ, 04050, Україна (044)236-47-24 0,25 гемоліз +