Спосіб одержання резиноїду “дубовий мох” методом культивування “in vitro”

Спосіб одержання резиноіду «дубовий мох» методом культивування «in vitro», що включає експлантацію фрагментів рослин на модифікованих живильних середовищах, який відрізняється тим, що як сировину використовують фрагменти лишайника Евернія сливова (Evernia prunastri), вирощування проводять при температурі 13-15 ° С протягом 18 діб, виділяють з вирощеної культури культуру гриба - мікобюнт, культивують його в ізольованому стані за тих самих умов протягом ЗО діб та екстрагують резиноїд Винахід відноситься до біотехнологм Отриманий продукт - біомаса резиноіда «дубовий мох» призначений для одержання фіксатора запахів, для створення оригінальних композицій у парфумери, а також для лікувальної косметики Відомий спосіб одержання таких, що культивуються «in vitro», клітин елеутерококу колючого «Eleutherococcus senticosus» /Ж Бютехнолопя, 1992, №3, стор 28 - 31/, що включає експлантацію фрагментів активно вегетуючих рослин елеутерококу на модифікованих живильних середовищах Мурасиге і Скуга в темряві при t = 20° і вологості 70 - 80% протягом 28 - ЗО діб Зазначений спосіб заснований на використанні фізіологічних і біохімічних показників конкретного виду рослини і не може бути використаний для вологості 70 - 80%, ВІДПОВІДНО ДО винаходу як си ІНШИХ ВИДІВ В основу винаходу поставлено задачу створення способу одержання резиноіду «дубовий мох» методом культивування «in vitro» компонентів лишайника Евернія сливова (Evernia prunastri), у якому за рахунок зміни технологічних характеристик процесу забезпечується розширення кола речовин з утилітарними властивостями, одержуваних способом «in vitro», що дозволяє зберегти природну популяцію рослин, забезпечити парфумерну промисловість сировиною на протязі всього року і забезпечити зайнятість робочих місць Поставлену задачу досягають тим, що в способі одержання резиноіду «дубовий мох» , заснованому на культивуванні «in vitro», який містить експлантацію фрагментів рослин на модифікованих живильних середовищах Мурасиге і Скуга при ровину використовують фрагменти природного лишайника Евернія сливова (Evernia prunastri) з розмірами фрагментів від 1 до Змм2, вирощування роблять при температурі 13 - 15° протягом 18 діб при освітленості 6 - 9 часів на добу, після чого з вирощеної культури виділяють культуру гриба мікобюнт і культивують його в ізольованому стані за тих самих умов протягом ЗО діб, отриману біомасу просушують і екстрагують резиноїд Причинно - наслідковий зв'язок між істотними ознаками винаходу і технічним результатом полягає в тім, що знайдені оптимальні умови культивування ізольованих тканин лишайника культури гриба мікобюнт - фотобюнт дозволяють зберегти симбіотичні відносини гриб - водорість, що забезпечує одержання необхідних речовин з потрібними властивостями Спосіб здійснюють таким чином Інтенсивне зростання біомаси відбувається протягом 18 діб з фрагментів рослини розміром від 1 до Змм2 природного лишайника Евернія сливова на модифікованих живильних середовищах Мурасиге і Скуга при вологості 70 - 80% і температурі 13 - 15°, слабкої освітленості, що відповідає зимово-весняному періоду з коротким світловим днем 6 - 9 годин З вирощеної культури, що містить мікобюнт і фотобюнт, виділяють мікобюнт і культивують його вже в ізольованому стані за тих самих умов На 30-тій добі біомаса досягає максимальної ваги і и приріст складає 100% Отримана біомаса переноситися в кювети і протягом 7 днів висушується в провітрюваному СО 1^ 00 Ю ю 55873 приміщенні Повітряно-суха біомаса екстрагується етиловим спиртом на водяній бані в колбі зі зворотним холодильником протягом 8 годин при t = 72°, з розрахунку на 1г біомаси 7,5мол етилового спирту Після охолодження віджатий лишайник промивали нагрітим спиртом 3 рази по 8 годин Спирт віддалявся з екстракту Отриманий екстракт піддавали ГРХ (газо-рідинна хроматографія) - аналізу Найважливішими складовими частинами лишайника Евернія сливова, а також резиноіду «дубовий мох» є еверншова кислота і її ефіри, що розглядаються як носи запаху, а також пігменти, смоли, воски, вуглеводи У процесі екстракції етиловим спиртом велика частина еверншової кислоти переходити в еверинову кислоту та ореш Був проведен ГРХ - аналіз екстракту з біомаси і визначений якісний склад речовин, що відносяться до групи резиноідів До складу речовин екстракту 4 входять евернінова кислота, етиловий ефір еверншової кислоти та мономепловий ефір орешу Усі найважливіші компоненти природного лишайника, що є носіями запаху, накопичуються й у біомасі лишайника, який вирощено в культурі in vitro Вихід резиноіду «дубовий мох» у біомасі складає 10% Галузевий стандарт на резиноїд «дубовий мох» передбачає технічні вимоги 1 ЗОВНІШНІЙ ВИГЛЯД - мазеподібна речовина зеленувато-коричневого кольору 2 Запах - дубового моху 3 Зміст нерозчинного в 80% спирті залишку не більш 8% 4 Зміст суміші води й етилового спирту - не більш 20% 5 Бромне число - не менш 50% Резиноїд, отриманий з біомаси лишайника, відповідає технічним вимогам до продукту Підписано до друку 05 05 2003 р Тираж 39 прим ТОВ "Міжнародний науковий комітет" вул Артема, 77, м Київ, 04050, Україна (044)236-47-24