Вакцинний штам salmonella typhi suis “чк/144″

Винахід відноситься до ветеринарної мікробіології та біотехнології, зокрема до виробництва полівалентних та асоційованих інактивованих вакцин "Сальмосан", "Вельшисальм", "Вельшиколісальм", "Сердосан", "Пневмомастисан", "Некросальм", "Поліавісан" проти сальмонельозів великої рогатої худоби, свиней та інших видів тварин і птиці. Вакцина може бути використана для імунопрофілактики та лікування захворювань тварин сальмонельозної етіології. Задачою даного винаходу є створення вакцинного штаму Salmonella typhi suis "ЧКУ144'''', який володіє добре вираженими імуногенними властивостями, що проявляються в синтезі специфічних антитіл в організмі щеплених тварин. Штам виділений від поросяти з клінічними ознаками сальмонельозу. Особливістю штаму є висока потенція росту, яка сприяє інтенсивному накопиченню великої бакмаси, що забезпечує отримання високоімуногенного антигену для виготовлення вакцин. Вакцинний штам Salmonella typhi suis "ЧК/144" селекційований в Інституті ветеринарної медицини УААН і задепонований в депозитарії Державного науково-контрольного інституту біотехнології і штамів мікроорганізмів. Реєстраційний номер наданий штаму Salmonella typhi suis "ЧК/144" депозитарієм - 144. Морфологічні властивості. У мазках з бульонних та агарових культур, штам Salmonella typhi suis "ЧК/144" має вигляд грамнегативних коротких паличок, що рухаються, спор і капсул не утворюють, фарбуються всіма аніліновими барвниками [1, 2]. Культуральні властивості. Факультативні аероби. Добре ростуть на простих живильних середовищах з рН7,27,4. На МПБ - слабке помутніння середовища. На МПА - ріст сір уватих дрібних кругли х колоній з блакитним відтінком. На твердому елективному середовищі Ендо - ріст безколірних колоній, колір середовища не змінюють. На середовищі Плоскірєва - ріст колоній кремового відтінку. На вісмутсуль фіт агарі - ріст дрібних колоній з зеленуватим відтінком. На середовищі Сімонса не відновлює цитратно-амонійні солі, колір середовища не змінюється [2, 3]. Ферментативні властивості. Штам Salmonella typhi suis "ЧК/144" ферментує глюкозу. Не зброджує маніт, дульцит, лактозу та са харозу. Не утворює індол і сірководень. [1, 2, 3]. Штам Salmonella typhi suis "ЧК/144" має токсичні властивості у зв'язку з утворенням внутрішньоклітинного ендотоксину. Антигенні властивості. Штам Salmonella typhi suis "ЧК/144" відноситься до серогрупи С 1, має типову реакцію аглютинації з сироваткою О-антигену рецептор 7(+++) , по Н-антигену фаза І - рецептор С(++); по Н-антигену фаза II - рецептор 1,5(++). Патогенні властивості. Штам Salmonella typhi suis "ЧК/144" патогенний для білих мишей вагою 16-18г. Добову бульонну культуру вводять підшкірно в дозі 0,3см 3 або внутрішньочеревно в дозі 0,2см 3 мишам масою 16-18 г при концентрації 50-100млн. мікробних клітин в 1мл. (4,7.107 LD100). Піддослідні тварини гинуть на 5-10-ту добу після введення вірулентної культури даного штаму. [3] Імуногенні властивості. Дворазове парантеральне щеплення білих мишей анакультурою штаму Salmonella typhi suis "ЧК/144" в об'ємі 0,2см 3 захищає від контрольного інфікування мишей масою 16,0-18,0г вірулентною культурою цього штаму в 90-100% випадків. Приклад 1: Білих мишей масою 16-18г імунізували анакультурою штаму Salmonella typhi suis "ЧК/144" у кількості 10 голів підшкірно та 10 голів внутрішньочеревно в об'ємі 0,2см 3. Щеплення проводили дворазово з інтервалом в 10 днів. На 12 добу для контролю брали 10 білих мишей, яких не імунізували. Тваринам трьох груп вводили по 0,2см 3 вірулентного штаму Salmonella typhi suis "ЧК/144". Встановлено, що коефіцієнт імуногенності щеплених тварин складає 90-100%, при 100% загибелі тварин контрольної групи. Результати щеплення білих мишей анакультурою штаму Salmonella typhi suis "ЧК/144" викладені у таблиці №1 Таблиця 1 Група 1 група 2 група 3 група (контроль) К-сть голів Метод введення 10 10 10 Об'єм см 3 підшкір. в/очерев. 5 п/ш. 5 в/ч. 0,2 0,2 0,2 Загинули Голів % 0 0 1 10 10 100 Залишились живими Голів % 10 100 9 90 0 0 Приклад 2. 20 голів поросят віком 3міс. імунізували анакультурою штаму Salmonella typhi suis "ЧК/144" в об'ємі 2см 3 двічі з інтервалом 10 діб підшкірне в ділянці шиї. Для контролю використали 10 нещеплених поросят - аналогів. На 14 добу після П щеплення відібрали проби сироватки крові від поросят обох гр уп і дослідили титри антитіл в реакції аглютинації. Титри антитіл в сироватках крові поросят, щеплених анакультурою штаму Salmonella typhi suis "ЧК/144" викладені у таблиці №2 Таблиця 2 Група тварин Поросята віком 3міс. К-ть голів Об'єм в см 3 Титр антитіл імунізовані неімунізовані 20 10 2,0 2,0 1:80-1:160 Як видно з таблиці №2, при імунізації поросят анакультурою штаму Salmonella typhi suis "ЧК/144" титр антитіл становить 1:80-1:160. Отже, отримані результати, що наведені в таблицях №1 та №2 свідчать про те, що імунізація анакультурою захищає білих мишей від контрольного зараження вірулентною культурою цього штаму та сприяє синтезу специфічних антитіл і формуванню імунітету у поросят. Проведені дослідження показали, що штам Salmonella typhi suis "ЧК/144" володіє добре вираженою імуногенною активністю, що дозволяє рекомендувати його для виготовлення вакцинних препаратів щодо боротьби з сальмонельозами тварин. Джерела інформації 1. Определитель бактерий Берджи (под ред. Дж. Хо ута, Н. Крита, П. Снита и др.). Перевод с английского акад. РАН Г.А. Заварзина. 9-е изд в 2-х томах-1997-800с. 2. Ветеринарная микробиология под редакцией Я.Е.Колякова, засл. деятеля науки РСФСР проф. Московской ветеринарной академии. 3-е издание. Москва 1965г. 3. Настанова з бактеріологічної діагностики сальмонельозів тварин затв. 08.05.2003 р. Під редакцією Ушкалова В.А., трушкової Г.Ю., Фукс П.П., Конаржевської К.Е., Мілько Л.С., Павленко М,С., Головко А.М. та інші.