Застосування препарату “мертизол-nа” як засобу для стабілізації еритроцитних мембран

Запропонована нами хімічна сполука "Мертизол-Na" для застосування як засобу стабілізації еритроцитних мембран є дитіопохідною карбамінової кислоти (ДТПКК), 2-меркапто-бензтіазол (2-МБТ). На сьогодні у медичній практиці в якості стабілізатора еритроцитних мембран хімічна сполука 2-МБТ та інші хімічні сполуки не використовуються. Хімічна сполука 2-МБТ, під назвою "Мебетизол", використовується в практичній медицині у вигляді мазі, пасти та ректальних свічок для лікування інфекційних дерматомікозів [Головкін В.А., Гладишев В.В., Федотов В.П., Литвинчук М.Д., Петренко В.В., 1996р.]. Препарат пройшов клінічне дослідження і рекомендований Фармакологічним Комітетом МОЗ СРСР для медичного застосування та промислового випуску наказом від 13.02.1993 року, протокол №3. З енциклопедії "The Merck Index", 1996р., 1001, №5916. Винахід, як засіб стабілізації еритроцитних мембран за допомогою хімічної сполуки 2-МБТ, препарат "Мертизол-Na", відноситься до галузі медицини, зокрема до розділу фармакотерапії, і може бути використаним для попередження гемолізу еритроцитів за умов трансфузії донорської крові хворим за допомогою АШК. В основу винаходу поставлене завдання впровадити в практичну медицину препарат "Мертизол-Na", як засіб, що попереджує гемоліз еритроцитів в процесі їх трансфузії у кров'яне русло хворого. Накреслене завдання вирішує тим, що препарат "Мертизол-Na", в основу якого входить хімічна сполука 2МБТ, може використовуватися в якості стабілізатора еритроцитних мембран. У зв'язку з тим, що 2-МБТ погано розчиняється у воді, нами, в умовах експериментів на лабораторних тваринах, використовувалась натрієва сіль даної сполуки, у ви гляді 2-MBT-Na, яка добре розчинна у воді. Пропонована нами хімічна сполука 2-МБТ відноситься до низькотоксичних речовин. В процесі досліджень нами виявлено, що ЛД-50 2-MBT-Na, при її доочеревинному введенні для білих мишей дорівнює 350мг/кг, для мурчаків (морських свинок) - 430мг/кг і для білих щурів - 850мг/кг маси тіла, а при дошлунковому введенні цим тваринам даної хімічної сполуки ЛД-50 дорівнювало, відповідно, 3100мг/кг, 4050мг/кг та 5850му/кг маси тіла. Таким чином, наведені результати проведених досліджень стверджують, що ДТПКК 2-меркаптобензтізол відноситься до групи низькотоксичних хімічних сполук . Підтвердженням стабілізуючої дії еритроцитних мембран ДТПКК 2-MBT-Na (препарат "Мертизол-Na") є результати проведених нами експериментальних досліджень на еритроцитах крові білих щурів in vivo, a також на еритроцитах здорових донорів чоловіків віком 35-40 років in vitro. Експерименти проводилися на еритроцитах білих щурів масою 150-200г, яким за 2 години до забору у них крові, одній групі тварин дошлунково вводили хімічну сполуку 2-МБТ 600мг/кг маси, а контрольній групі щурів, при цих же умовах досліду, вводили у шлунок водно-крохмальну завісину. Після забору крові у щурів шляхом їх декапітації, за методикою Стародуб Н.Ф. і Назаренко В.І. (1967р.), отримували еритроцитну масу. Вивчення кислотного гемолізу отриманих еритроцитів та їх еритрограм проводили за методикою Терскова І.А. та Гітельзона І.І. (1967р.), використовуючи при цьому 0,004 н НСl, що забезпечувало 100% гемоліз еритроцитів протягом 7-8хв. Отримані результати засвідчують (табл.1), що хімічна сполука ДТПКК, після її дошлункового введення білим щурам, в значній мірі продовжує час гемолізу та час максимуму гемолізу еритроцитів піддослідних тварин. Так, наприклад, якщо без застосування сполуки 2-МБТ час гемолізу та час максимуму гемолізу клітин становили 5,58 та 3,83хв, то після застосування досліджуваного препарату ці показники збільшилися в часі відповідно до 11,06 та 8,37хв. Таблиця 1 Параметри еритрограм Час гемолізу, хв Час максимуму, хв Максимум гемолізу, хв Сферуляція, % Низькостійкі, % Середньостійкі, % Підвищеної стійкості, % Високостійкі, % Надвисокостійкі, % Параметри кислотних еритрограм білих щурів in vi vo: 1 - без введення 2-МБТ; 2 - після введення 2-МБТ. 1 - без 2-МБТ 5,58±0,300 3,83±0,200 35,96±1,200 12,01±1,100 23,27±2,100 68,8±2,900 4,31±0,300 0,00 0,00 2 - із 2-МБТ 11,06±1,200 8,37±0,700 38,44±1,400 13,90±1.600 16,38±0,700 34,92±1,400 41,90±1,900 6,63±0,250 0,00 Результати досліджень стверджують також, що після профілактичного дошлункового введення тваринам досліджуваної сполуки ДТПКК значно зменшується процентний вміст низькостійких та середньостійких еритроцитів і виражено збільшується кількість клітин підвищеної стійкості, а також наявні високостійкі еритроцити, які були відсутніми без застосування сполуки 2-МБТ. З наведених параметрів кислотних еритрограм еритроцитів чоловіків-донорів (табл.2) в процесі досліджень in vitro також виявлено, що при наявності в інкубаційному розчині хімічної сполуки 2-MBT-Na значно підвищується стійкість еритроцитів, інкубованих у цьому ж розчині, до дії кислотного гемолітика. При цьому досліджувана сполука викликала виражене зменшення низькостійких та середньостійких еритроцитів, і значно збільшувала кількість клітин підвищеної стійкості, а також були наявні високостійкі еритроцити, які без застосування досліджуваної сполуки були відсутніми. Таблиця 2 Параметри кислотних еритрограм людини-донора in vitro: 1 - після інкубації еритироцитів у фізіологічному розчині без 2-МБТ; 2 - після інкубації еритироцитів у фізіологічному розчині з 2-МБТ. Параметри еритрограм 1 - без 2-МБТ 2 - із 2-МБТ Час гемолізу, хв 7,330±0,200 9,500±0,180 Час максимуму, хв 3,333±0,060 7,000±0,100 Максимум гемолізу, хв 23,433±2,300 24,440±1,800 Сферуляція, % 10,732±1,000 10,750±1.500 Низькостійкі, % 39,155±1,500 3,320±0,500 Середньостійкі, % 40,473±1,800 5,290±0,400 Підвищеної стійкості, % 9,637±0,750 64,890±2,800 Високостійкі, % 0,00 17,050±0,800 Надвисокостійкі, % 0,00 0,00 Наглядними ствердженнями стабілізуючої дії ДТПКК 2-МБТ /НМ-І/ еритроцитних мембран є параметри кислотних еритрограм людини (Фіг.1, Фіг.2). Із наведених даних кислотних еритрограм видно, що препарат "Мертизол-Na" проявляє як in vivo, так in vitro, мембранопротекторну, мембраностабілізуючу дії еритроцитів. Володіючи низькою токсичністю та вираженими мембраностабілізуючими властивостями еритроцитних клітин, досліджувана хімічна сполука, похідна дитіокарбамінової кислоти (ДТПКК, 2-MBT-Na), препарат "Мертизол-Na" може бути рекомендована для впровадження у медичну практику, як засіб для профілактики гемолізу еритроцитів в умовах трансфузії хворим еритроцитної маси.