Спосіб визначення токсичності полімерів, що використовуються для виготовлення базисів знімних протезів

Спосіб визначення токсичності полімерів для виготовлення базисів знімних протезів, що включає використання живої біокультури, який відрізняється тим, що як біокультуру використовують ліофілізовані фотобактерії, які заздалегідь вводять у водні витяжки з акрилових пластмас, а потім поміщають в біолюмінометр і реєструють показники інгібування люмінесценції фотобактерійної системи. Корисна модель відноситься до медицини, а саме до ортопедичної стоматології, і може бути використана для визначення загальної токсичності полімерів, що використовуються в ортопедичній стоматології для виготовлення базисів знімних протезів. Як прототип вибраний спосіб визначення токсичності полімерів, що використовуються для виготовлення базисів знімних протезів [Данілов П. І. Підвищення біологічної ідефрентності знімних зубних протезів (Експериментальне-клінічне дослідження): автореф.дис... канд. мед. наук. – Полтава, 1993. - 17с.], який полягає у визначенні токсичності оброблених ефіром, Н-бутиловим ефіром оцетової кислоти, пластмас на еритроцитах крові людини і курячих ембріонах. Ознаками прототипу, які співпадають з істотними ознаками корисної моделі, є: використання живої біокультури. Причинами, що перешкоджають досягненню очікуваного технічного результату (попередження появи токсичних і алергічних реакцій з боку слизистої оболонки порожнини рота і організму в цілому), є: використання даних біокультур займає тривалий час, необхідний для вирощування курячих ембріонів і забору крові людини, невисока точність отриманих результатів, що надалі призводить до надмірного вмісту залишкового мономера в базисах знімних пластинкових протезів, який несприятливо впливає в цілому на весь організм людини. У основу корисної моделі поставлена задача удосконалення способу визначення токсичності полімерів для виготовлення базисів знімних протезів шляхом використання як живої біокультури фотобактерій, що вводяться у водні витяжки з акрилових пластмас, за рахунок чого підвищується точність діагностики нестерпності акрилових пластмас, тобто досягається очікуваний технічний результат, а саме попередження прояву токсичних і алергічних реакцій з боку слизистої оболонки порожнини рота і організму в цілому. Поставлена задача вирішується тим, що в способі визначення токсичності полімерів для виготовлення базисів знімних протезів шляхом використання живої біокультури, згідно корисної моделі, як біокультуру використовують ліофілізовані фотобактерії, які заздалегідь вводять у водні витяжки з акрилових пластмас, а потім поміщають в біолюмінометр і реєструють показники інгібування люмінесценції фотобактерійної системи. Між сукупністю істотних ознак запропонованого способу і очікуваним технічним результатом, (19) UA (11) 15099 (13) U (21) u200511870 (22) 12.12.2005 (24) 15.06.2006 (46) 15.06.2006, Бюл. № 6, 2006 р. (72) Шишова Олена Вікторівна, Жадько Сергій Ігоревич, Міронова Ірина Володимирівна (73) КРИМСЬКИЙ ДЕРЖАВНИЙ МЕДИЧНИЙ УНІВЕРСИТЕТ ІМ. С.І.ГЕОРГІЄВСЬКОГО 3 який може бути досягнутий, виявляється наступний причинно-наслідковий зв'язок: визначення токсичності акрилових пластмас з використанням фотобактерій, які заздалегідь вводять у водні витяжки з акрилових пластмас, а потім поміщають в біолюмінометр для подальшої реєстрації відповідних показників, дозволяє в короткі терміни і з високою точністю визначати токсичність полімерів для виготовлення базисів знімних протезів, що сприяє зменшенню вмісту залишкового мономера в базисах протезів, який несприятливо впливає в цілому на весь організм людини. Спосіб здійснюють таким чином. Використовують два полімерні матеріали: етакрил і фторакс. Для експерименту зразки полімерів готують у вигляді пластин площею 1см, використовуючи методи компресійного пресування і мікрохвильової полімеризації. Кожен зразок полімерів поміщають в 10мл стерильного фізіологічного розчину на 7 і 30 днів відповідно. Через 7, 30 днів водну витяжку фізіологічного розчину в кількості 2мл, в якому знаходилися полімери, піддають біолюмінесцентному методу дослідження для визначення загальної токсичності. Основою індикатора бактерійного біолюмінесцентного тесту-системи є бактерії Photobacterium phosphoreum (Cohn) Ford, що світяться, які в процесі метаболізму накопичують фермент люциферазу, що каталізує реакцію свічення у видимій області спектру. Це свічення реєструють приладом біолюмінометром. Фотобактерії володіють підвищеною чутливістю до ряду токсикантів, їх біолюмінесценція під впливом токсичних речовин знижується. Інгібування свічення фотобактерій пропорційно кількості токсичних речовин в пробі. Порівнюючи кількість свічення в пробі і контролі судять про наявність або відсутність сумарної токсичності речовин. Отримані результати оцінюють по відсотку інгібування люмінесценції фотобактерійної системи у присутності токсикантів, екстрагованих у фізіологічний розчин. Для цього по 2мл екстрактів полімерів поміщають в кювети люмінометра, потім додають по 20мкл клітин фотобактерій. Контроль готують з чистого фізіологічного розчину. Проби і контроль вимірюють на біолюмінометрі для реєстрації свічення клітин фотобактерій. Для розрахунків беруть середнє значення свічення з 3-5 проб. Кількість і повторності проведених експериментів були статистичне достовірними. У таблиці 1 представлені значення відсотка інгібування люмінесценції фотобактерійної системи, по яких визначають токсичність полімерів, що застосовуються в ортопедичній стоматології – час інкубації 7 діб. З таблиці 1 видно, що відсоток інгібування люмінесценції фотобактерійної системи у присутності токсикантів пластмас "Етакрил" і "Фторакс", екстрагованих у фізіологічний розчин, склав при методі мікрохвильової полімеризації 1,5% і 7,5% 15099 4 відповідно, а при методі компресійного пресування - 3% і 15%. Пониження відсотка інгібування свідчить про меншу токсичність пластмас, виготовлених методом мікрохвильової полімеризації. У таблиці 2 представлені значення відсотка інгібування люмінесценції фотобактерійної системи, по яких визначають токсичність полімерів, що застосовуються в ортопедичній стоматології - час інкубації 30 діб. З таблиці 2 видно, що відсоток інгібування люмінесценції фотобактерійної системи у присутності токсикантів пластмас "Етакрил" і "Фторакс", екстрагованих у фізіологічний розчин, склав при методі мікрохвильової полімеризації 0,8% і 4,2% відповідно, а методом компресійного пресування 1,8% і 10,0%, що додатково підтверджує меншу токсичність пластмаси, виготовлену методом мікрохвильової полімеризації. Пропонований спсоб ілюструється наступними прикладами його використання. Приклад 1 Хворий 65 років. Повна відсутність зубів на верхній щелепі. Короткий анамнез: був виготовлений протез за звичайною технологією -компресійне пресування з базисної пластмаси "Фторакс". Пацієнт звернувся через два місяці зі скаргами на постійне відчуття печіння і сухості в порожнині рота. Об'єктивно: слизиста оболонка піднебіння, губ, щік, спинки язика глоткового кільця гіперемінована, набрякла. Згідно з одержаними даними за пропонованим способом, був виготовлений новий повний знімний протез на верхню щелепу з базисної пластмаси "Етакрил" методом мікрохвильової полімеризації. Експлуатація виготовленого протеза до сьогоднішнього часу проходить без ускладнень, скарги відсутні. Приклад 2 Хворий 67 років. Повна відсутність зубів на верхній щелепі. Короткий анамнез: був виготовлений протез за звичайною технологією - компресійне пресування з базисної пластмаси "Етакрил". Через 3 дні пацієтнка звернулася зі скаргами на виражене печіння слизистої оболонки під протезом. Негативні відчуття зменшуються після видалення протеза, але повністю не зникають. Об'єктивно: гіперемія і набряк слизистої оболонки у межах протезного ложа. Згідно з одержаними даними за пропонованим способом, був виготовлений новий повний знімний протез на верхню щелепу з базисної пластмаси "Етакрил" методом мікрохвильової полімеризації. Експлуатація виготовленого протеза до сьогоднішнього часу проходить без ускладнень, скарги відсутні. Пропонований спосіб може бути використаний в розробці комплексної експрес-діагностики непереносимості пластмас, що проводиться до ортопедичного лікування. 5 15099 6 Таблиця 1 Свічення зразків % Етакрил Фторакс Час(хвил) Контроль Компресійне преМікрохвильова Компресійне преМікрохвильова сування полімеризація сування полімеризація 0 100 100 100 100 100 5 97,9 95,2 97,3 87,9 93,9 10 97,0 94,2 95,9 86,7 92,1 15 97,0 94,1 95,7 85,6 91,9 20 95,0 92,3 93,5 82,9 88,2 25 94,5 91,6 93,1 81,9 86,8 30 92,0 89,0 90,5 77,0 84,5 5 3% 0,6 % 10% 4% 30 3% 1,5% 15% 7,5 Таблиця 2 Свічення зразків % Етакрил Фторакс Час(мін) Контроль Компресійне преМікрохвильова Компресійне преМікрохвильова сування полімеризація сування полімеризація 0 100 100 100 100 100 5 97,0 94,8 97,0 89,0 94,5 10 96,0 93,1 96,0 88,5 93,7 15 95,0 93,0 94,6 86,2 90,1 20 94,5 92,6 92,0 82,0 87,3 25 92,3 92,0 90,3 81,4 86,7 30 90,0 91,8 89,2 80,0 85,8 5 2,2 % 0 8% 2,5 % 30 1,8 % 0,8 % 10% 4,2 % Комп’ютерна верстка Д. Шеверун Підписне Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601