Ізолят r-1 як продуцент антигену реовірусу птахів

Ізолят R-1 як продуцент антигену реовірусу птахів, що зберігається в лабораторії вірусології науково-виробничого центру ветеринарної медицини птахівництва ЛНАУ, м.Луганськ. (19) (21) u200600695 (22) 26.01.2006 (24) 15.08.2006 (46) 15.08.2006, Бюл. № 8, 2006 р. (72) Пархоменко Людмила Іванівна, Пашенко Ольга Олексіївна 3 16439 4 Біологічні властивості ізоляту наведено нижче. (відповідно пасажу), у другому пасажі - 60 та 40%. Прикладі. Культивування ізоляту R-1 у курячих Репродукція ізоляту у гусячих зародках не сузародках супроводжувалося набряком ХАО (100%, проводжувалася застійними явищами у внутрішніх 80% - відповідно пасажу), затримкою в рості та органах зародків. розвитку (20%, 40%), застійними явищами у внутЗагибель гусячих зародків спостерігалася при рішніх органах (100%, 100%), збільшенням нирок культивуванні ізоляту R-1 у другому пасажі (20% (60-80%). У першому пасажі спостерігалися вогвипадків). нища некрозу на ХАО (20%), а некрози у печінці Приклад 2. Визначення інфекційної активності зародку реєстрували на 2 пасажі (20%). Загибель реовірусу, ізольованого у вищевказаному випадку, зародків склала 20 та 40%, відповідно пасажу. проводили при інфікуванні 5-добових курчат. Культивування ізоляту у гусячих зародках виБіопроба на курчатах показала слідуючи реявило схожі зміни, що і при ізоляції R-1 у курячих зультати (таблиця 1). Клінічні ознаки реєстрували зародках. Так, набряк ХАО спостерігали впродовж вже на 2 добу після інфікування, які характеризудвох пасажів .Порівняно із курячими зародками, валися появою проносу білуватого кольору та призатримку в рості та розвитку гусячих зародків спогніченим станом заражених курчат, порівняно з стерігали частіше. Ізолят R-1 - у першому пасажі контрольними. викликав вищевказані зміни у 40% та 60% випадків Таблиця 1. Результати біопроби на курчатах ізоляту реовірусу R-1. Дослідні курчата Серологічні дослідження в ΡΗΓΑ, титр антитіл щодо реовірусу На 10 добу п/з Через 2 тижні Через 3 тижні п/з п/з ** ** Інфіковані 1 1:8 1:8 2 1:4 1:4 3 1:32 1:16 4 1:16 -*** 5 1:16 1:8 6 1:32 1:64 К* 1:2 К* - контрольні курчата(n=5) ** - діагностичний забій, *** - загинув на 12 добу після зараження Надалі ці ознаки посилювалися, а також відмічали відставання в рості, опущення крилів, нерівномірне оперення, збільшення гомілкових суглобів, слабкість кінцівок, деякі особини не утримувалися на кінцівках. Необхідно відзначити швидке погіршення клінічного стану дослідної птиці. Через тиждень після інфікування, захворюваність склала 67%, через два тижні - 80%. Серологічні дослідження сироваток крові виявили наявність антитіл щодо реовірусу птахів у діагностичних титрах. Через тиждень після інфікування було відмічено значну різницю в масі інфікованих та інтактних курчат. Приклад 3. При культивуванні у перещеплюваній культурі клітин VERO, ізолят R-1, викликав цитопатичну дію (ЦПД) вже у першому пасажі. Зі збільшення кількості пасажів термін проявлення ЦПД скорочувався. Так, у 2 пасажі округлення клі Маса тіла курчат на 7 добу п/з, г Прояв клінічних ознак 80±5,12 + + + + + 100±5,12 тин, утворення синцитію та ділянок дегенерації клітин спостерігалося через 72 години, у 3 пасажі через 38,4 години, а у 4 - через 21,6 год. Інфекційна активність ізоляту склала 6,5 log2 ТЦД50/см3 (після 4го пасажу). Вірусний ізолят R-1 реовірусу птахів має високі репродуктивні властивості і може бути використаний для накопичення вірусної біомаси, її концентрування та очистки для виробництва діагностичних антигенів, отримання гіперімуних сироваток до авіреовірусу та виготовлення вакцини. Приклад 4. При проведенні електрофорезу вірусних білків ізоляту R-1 у поліакріламідному гелі, виявлено основний білок серцевини реовірусу -λ1, на основі цього R-1 можна віднести до родини Reoviridae, роду Reovirus. 5 Комп’ютерна верстка Г. Паяльніков 16439 6 Підписне Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601