Спосіб одержання поверхнево-активних речовин

Спосіб одержання поверхнево-активних речовин, що включає культивування Rhodococcus erythropolis EK-1 (1MB Ac-5017) на рідкому мінеральному середовищі з гексадеканом, який відрізняється тим, що використовують посівний матеріал з середини експоненційної фази росту у кількокількості 9-11% від об’єму середовища. (19) (21) u200602568 (22) 09.03.2006 (24) 15.08.2006 (46) 15.08.2006, Бюл. №8, 2006р. (72) Пирог Тетяна Павлівна, Ігнатенко Сергій Вікторович (73) НАЦІОНАЛЬНИЙ УНІВЕРСИТЕТ ХАРЧОВИХ ТЕХНОЛОГІЙ 3 16721 сівний матеріал з середини експоненційної фази росту у кількості 9-11% від об’єму середовища. Причинно-наслідковий зв’язок між запропонованими в процесі ознаками і очікуваним технічним результатом полягає в наступному. Використання посівного матеріалу з середини експоненційної фази росту у кількості 9-11% від об’єму середовища, дає можливість інтенсифікувати синтез ПАР та скоротити тривалість культивування бактерій. Експериментально доведено, що зміна фізіологічного стану та кількості посівного матеріалу дозволяє майже в два рази скоротити тривалість процесу та активізувати синтез поверхневоактивних речовин. Так умовна концентрація ПАР становить 6,3 вже на 4 добу культивування (згідно прототипу - лише на 7 добу). Спосіб здійснюється наступним чином. R. erythropolis EK-1 вирощують на рідкому мінеральному середовищі такого складу (г/л): КNОз-1,0; NaCl-1,0; Na2HPO4-0,6; КН2РO4-0,14; MgSO4 7H2O0,1; pH6,8-7,0. Як джерело вуглецю та енергії використовували гексадекан в концентрації 2% (за об’ємом). Як посівний матеріал використовували культуру з середини експоненційної фази росту, вирощену на рідкому середовищі з 0,3% (за об’ємом) гексадекану, у кількості 9-11% від об’єму середовища. Культивування R. erythropolis EK-1 для отримання поверхнево-активних речовин здійснювали в колбах об’ємом 750мл з 200мл середовища на качалці (220об/хв.) при 25 С, упродовж 96год. 4 Супернатант культуральної рідини характеризувався наступними показниками: умовна концентрація ПАР-6,0-6,4; індекс емульгування розведеної у 50 раз культуральної рідини - 60-70%. Приклад 1 Культивування бактерій здійснювали в умовах, описаних вище. Як посівний матеріал використовували культуру з початку, середини експоненційної та початку стаціонарної фаз росту, вирощену на рідкому середовищі з 0,3% (за об’ємом) гексадекану. Кількість посівного матеріалу становила 5% від об’єму середовища. Показники, за якими визначали синтез ПАР. - Умовна концентрація ПАР, яку визначали для експрес-оцінки кількісного вмісту ПАР у культуральній рідині. Цей показник визначається як ступінь розведення вільної від клітин культуральної рідини у точці збільшення поверхневого натягу на кривій залежності поверхневого натягу від значення розведень. Абсциса точки перетину кривої відповідає значенню умовної концентрації ПАР та виражається в безрозмірних одиницях. - Емульгувальна активність, яку визначали через 24год, як величину відношення висоти шару емульсії до загальної висоти рідини у пробірці і виражали у процентах. Як субстрати для емульгування використовували соняшникову олію. Емульгувальну активність визначали для нативної культуральної рідини і культуральної рідини, розведеної дистильованою водою у 10 і 50 раз. Показники синтезу ПАР залежно від тривалості вирощування інокуляту наведено у Таблиці 1. Таблиця 1 Залежність синтезу поверхнево-активних речовин штамом Rhodococcus erythropolis EK-1 від фізіологічного стану посівного матеріалу Фаза росту посівного матеріалу початок експоненційної фази (прототип) середина експоненційної фази початок стаціонарної фази ПАР* Показники синтезу ПАР Індекс емульгування розведеної у 50 разів культуральної рідини, % 2,1 65 4,2 66 3,5 65 Таким чином, при використанні посівного матеріалу з середини експоненційної фази росту показники синтезу ПАР є вищими порівняно з найближчим аналогом. Приклад 2 Умови культивування та склад поживного середовища аналогічні описаним вище. Як посівний матеріал використовували культуру з середини експоненційної фази росту. Кількість посівного матеріалу становила 5, 10 і 15% від об’єму середовища. Тривалість культивування становила 96 та 168год. Рівень синтезу поверхнево-активних речовин R. erythropolis EK-1 наведено у Таблиці 2. 5 16721 6 Таблиця 2 Залежність синтезу поверхнево-активних речовин штамом Rhodococcus erythropolis EK-1 від концентрації посівного матеріалу Концентрація інокуляту, % 5 10 15 ПАР* при культивуванні Індекс емульгування розведеної у 50 разів культураупродовж, год льної рідини (%) при культивуванні упродовж, год 96 168 96 168 4,2 6,1 66 46 6,3 6,5 66 51,6 5,5 5,8 59 45 Використання запропонованого способу одержання ПАР у порівнянні з найближчим аналогом дозволяє активізувати синтез поверхневоактивних речовин і суттєво скоротити тривалість Комп’ютерна верстка М. Ломалова процесу біосинтезу. Так умовна концентрація ПАР становить 6,3 вже на 4 добу культивування (згідно з найближчим аналогом - лише на 7 добу). Підписне Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601