Спосіб біологічної індикації дії низьких рівнів іонізуючої радіації

Спосіб біологічної індикації дії низьких рівнів іонізуючої радіації, що включає інкубацію і мічення клітин крові біологічно активними речовинами, аналіз оптичних характеристик, реєстрацію флюоресценції клітин за біофізичними показниками і визначення дози за кривою "доза-ефект", який відрізняється тим, що біологічну індикацію проводять за презентацією SH2-вмісної протеїнтирозин кінази Т-лімфоцитів. (19) (21) u200603164 (22) 24.03.2006 (24) 15.09.2006 (46) 15.09.2006, Бюл. № 9, 2006 р. (72) Базика Димітрій Анатолійович, Бєляєва Надія Володимирівна, Бєляєв Олег Анатолійович, Голярник Наталія Анатоліївна, Ільєнко Ірина Миколаївна (73) НАУКОВИЙ ЦЕНТР РАДІАЦІЙНОЇ МЕДИЦИНИ АМН УКРАЇНИ 3 17209 4 Найбільш близьким технічним рішенням, обдатково вносять до пробірки пермеабілізуючораним у якості прототипу є спосіб визначення дози фіксуючий розчин (PermeaFix або аналогічний) та опромінення за допомогою дослідження мутацій у моноклональне антитіла до SН2-містячої протеїнлокусі Т-клітинного рецептору/TCR гену [5]. тирозин кінази (анти-7АР-70 або аналогічні) та Кров пацієнта змішують із сумішшю помічених інкубують при постійному перемішуванні на ворфлуоресцентними барвниками моноклональних текс-міксері. За допомогою методу проточної циантитіл до CD4 антигену лімфоцитів та Ттофлюориметрії визначають процентний вміст клітинного рецептору, інкубують 20 хвилин при показнику Т-лімфоцитів, що експресують протеїнпостійному перемішуванні. Після інкубації додають тирозин кіназу. Дозу визначають за формулою (2), розчин лізуючий еритроцити в кількості 10-кратно або за калібровочною кривою (Фіг.1). перевищуючій кількість внесеної крові, та провоDtk=Tr+0,14679*Ptk (2) дять аналіз методом проточної цитометрії. АналіДе: Dtk - доза опромінення (мЗв); зують 105-106 клітин, після чого визначають за Тr - нижній порог чутливості методу спеціальною процедурою процентний вміст мутан(2,389м3в); тних CD4 позитивних клітин, що не експресують ТPtk - процентний вміст Т-клітин, що експресуклітинного рецептору. Для одержання дозових ють SН2-містячу протеїн-тирозин кіназу. характеристик за кількістю мутацій в локусі TCR Приклад 1 користуються формулою: Працівник 30-кілометрової зони ЧАЕС. Сумарна доза опромінення за даними комплексного меTCR Mf=(1.74+ -1.3) 10-4+0,211 10-4 D(Sv) (1) тоду біофізичного контролю оцінки складу та конСпосіб є порівняно простим. центрації радіоактивних речовин в організмі та Дослідження персоналу 30-кілометрової зони органах людини та біопробах - 5,8м3в. ЧАЕС, що знаходився під дією хронічного опроміПроцентний вміст показнику Т-лімфоцитів, що нення показало, що частота мутантних клітин TCRекспресують протеїн-тирозин кіназу ZAP-70, за 4+ складає від 1,9 10-4 до 6,8 10-4 при дослідженні пропонованим способом: 60,27%. Обчислена доза 20 осіб від 3-х до 4-х разів (у середньому відзнаопромінення за пропонованим способом 6,5м3в. чене підвищення частоти до 4,52+1,01 10 4 Приклад 2 (р