Розчин інтерферону

Розчин інтерферону, який містить інтерферон, стабілізатор, буфер та воду, який відрізняється тим, що як стабілізатор розчин містить гідроксипропілметилцелюлозу та лізину гідрохлорид, як буфер - трис (трис-(гідроксиметил)амінометан, гідрохлориду (трис-(гідроксиметил)амінометан, калію хлорид, додатково містить етилендіамінтет 3 24508 перерахунку на дестран) - 40000-100000, вода для ін'єкцій до 1мл. Такий розчин є достатньо стабільним та має менше побічних ефектів, проте наявність в ньому декстрину також може призводити до появи різних алергічних і псевдоалергічних реакцій. В основу корисної моделі поставлене завдання розробити стабільний розчин інтерферону з мінімальними побічними ефектами. Поставлене завдання досягається запропонованим розчином інтерферону, який містить інтерферон, стабілізатор, буфер, та воду, згідно з корисною моделлю в якості стабілізатора розчин містить гідроксіпропілметилцелюлозу та лізину гідрохлорид, як буфер трис (трис(гідроксіметил)амінометан, гідрохлориду (трис(гідроксіметил)амінометан, лізин гідрохлорид та калію хлорид, додатково містить, етилендіамінтетраоцтової кислоти динатрієву сіль, полісорбат 80 при такому співвідношенні компонентів, мас. %: 1-15х108 МО Інтерферон /100мл Трис (трис(гідроксіметил)амінометан 0,55-0,75 Гідрохлориду (трис(гідроксіметил)амінометан 0,045-0,065 Гідроксіпропілметилцелюлоза 0,1-0,5 Етилендіамінтетраоцтової кислоти динатрієва сіль 0,01-0,04 Лізину гідрохлорид 0,45-0,75 Калію хлорид 0,3-0,5 Полісорбат 80 0,1-0,15 Вода високо очищена решта, а для назальних та очних лікарських форм в якості консерванту додатково містить ніпагін в кількості 0,033%. Як інтерферон використовують альфа-, бетаабо гамма-інтерферон людини або альфа-, бетаабо гама-рекомбінантний інтерферон. Одними з компонентів буферної системи є трис (трис-(гідроксіметил)-амінометан) та гідрохлориду (трис-(гідроксіметил)амінометан, які здатні регулювати кислотно-лужну рівновагу, практично нетоксичні, входять до складу парентеральних препаратів, які використовуються в якості трометомолових солей та не впливають на активність інтерферону в процесі зберігання. Лізин гідрохлорид - амінокислота, яка входить до складу молекули інтерферону в різних ділянках білкової молеку 4 ли та за рахунок надлишку попереджує гідроліз білкової молекули. Полісорбат 80 - неіоногенна поверхнево-активна речовина захищає білки від фізичної і хімічної дестабілізації, не взаємодіє з упаковкою, а також захищає саму молекулу інтерферону від денатурації і агрегації на її поверхні. Етилендіамінтетраоцтова кислота динатрієва сіль - хелотируючий засіб, який утворює комплекси з іонами металів у розчині, що запобігає реакції розщеплення білка за рахунок взаємодії з іонами металів. В якості консерванта використаний ніпагін, який не впливає на стабільність молекули інтерферону в розчині та традиційно використовується в якості консерванта в назальних і очних краплях. Експериментально встановлено, що концентрація ніпагіну 0,033% при зберіганні 2-8° забезпечує антимікробну дію консерванту протягом 7-10 днів (термін використання первинної упаковки лікарського засобу). Калію хлорид є ізотонізуючим агентом і гарантує отримання ізотонічного складу. Речовини гідроксіпропіл-метилцелюлоза, лізин гідрохлорид та полісорбат 80 використані також і для захисту антивірусної активності. Комбінація всіх допоміжних речовин забезпечує біологічну, хімічну і фізичну стабільність розчину інтерферону протягом 2,5-х років зберігання. Інтерферон зберігається в первинній формі - коливання діючої речовини в процесі зберігання може знаходитися у границях від 85 до 100% (інтактна форма). Приклад виготовлення розчину. В реактор, обладнаний мішалкою і охолоджувальною сорочкою, завантажують 46л води для ін'єкцій з температурою 20-25°С і додають 15,5г ніпагіну. Перемішують до повного розчинення. Потім послідовно добавляють 32г трис-(трис(гідроксиметил)амінометану, 352,5г гідрохлориду трис-(трис-(гідроксиметил)амінометану, 365г лізину гідрохлориду, 25г етилендіамінтетраоцтової кислоти динатрієвої солі, 235г калію хлориду. Перемішують розчин протягом 10-15 хвилин. Добавляють 250г гідроксіпропілметилцелюлози, 5г полісорбату 80 і перемішують до повного розчинення. Охолоджують розчин до температури 6-8°С. Додають розрахункову кількість концентрату інтерферону - 106МО/мл, доводять об'єм розчину до 50л, перемішують протягом 40-50 хвилин при температурі 6-8°С та стерильно фільтрують. Таблиця Основні показники якості запропонованого розчину інтерферону Назва показника Специфічна активність рН Стерильність Допустимі межі Фактичне значення Препарат повинен містити від 9,0х1066 11х106МО/мл (визначення рівня інтер- 10,6х10 МО/мл ферону проводять на чутливи х культурах клітин L41, МДВК, А-549) 7,0-7,6 7,2 Повинен бути стерильним (за п. 8, Відповідає ДФУ2001, п. 2.6.1) Термін зберігання (роки) 1 2 2,3 10,46х106 МО/мл 10,1х106 МО/мл 9,98х106 МО/мл 7,18 7,21 7,15 Відповідає Відповідає Відповідає 5 24508 Антивір усну активність інтерферону визначали на культурі клітин L41 - лімфобластні клітини людини (перещеплювані), МДВК - перещеплювані клітини нирки теляти, А-549 - епителіоїдні клітини раку легень людини (перещеплювані). Віруси вірус везикулярного стоматиту - штам Індіана, одержаний з музею вірусів інституту вірусології ім. Д.І. Івановського РАМН (Москва). Інфекційний титр Комп’ютерна в ерстка А. Крулевський 6 в культурі тканин L41 складав 4,0-5,0 lg ТЦД50. Стандартний зразок - як препарат порівняння використовували відомий препарат інтерферону з відомою активністю в міжнародних одиницях (МО) - інтерферон 3 млн ME [Intron A, 3 million I.U., lyophilized Powder for Injection, Interferon ALFA - 2b, cepiz IIFC A703 (Шеринг Плау)]. Підписне Тираж 26 прим. Міністерство осв іт и і науки України Держав ний департамент інтелектуальної в ласності, вул. Урицького, 45, м. Київ , МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислов ої в ласності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601