Спосіб діагностики гістопатологічних змін ендотелію судин головного мозку

Спосіб діагностики гістопатологічних змін ендотелію судин головного мозку шляхом фарбування гістологічних препаратів ядерними 3 Прототипом корисної моделі є спосіб діагностики гістопатологічних змін шляхом фарбування гістологічних препаратів ядерними барвниками та оцінки характеру розподілу хроматину [Общая патология человека: Руководство для врачей / под ред. А.И. Струкова, В.В. Серова, Д.С. Саркисова: в 2т., Т1. - М.: Медицина, 1990. - С.44-45.]. Спосіб-прототип полягає у тому, що після фарбування ядерними барвниками хроматину у гістологічних або цитологічних препаратах дослідник під великим збільшенням мікроскопа суб'єктивно оцінює характер розподілу хроматину у ядрах клітин, враховуючи дифузний або гетерогенний характер забарвлення ядер. Недоліком прототипу є суб'єктивна основа оцінки, яка може спричинити порушення відтворюваності результатів наукових та клінічних досліджень. Нами пропонується рішення, що усуває вказані недоліки. В основу корисної моделі поставлене завдання удосконалити спосіб діагностики гістопатологічних змін ендотелію судин головного мозку шляхом проведення оцінки розподілу ядерного хроматину засобами цифрової фотографії та комп'ютерного аналізу мікроскопічного зображення із застосуванням коефіцієнту варіації оптичної густини забарвлення для забезпечення об'єктивної та адекватної оцінки. Поставлене завдання вирішується тим, що в способі діагностики гістопатологічних змін ендотелію судин головного мозку шляхом фарбування гістологічних препаратів ядерними барвниками та оцінки характеру розподілу хроматину, згідно до корисної моделі, за допомогою цифрового фотоапарата та оптичного мікроскопа отримують цифрові зображення пофарбованих ядер клітин, в яких засобами комп'ютерної програми вимірюють середню арифметичну оптичної густини забарвлення (у відносних одиницях оптичної щільності у діапазоні «0-1») та вираховують показник середньоквадратичного відхилення оптичної густини забарвлення (у відносних одиницях оптичної густини). Спільними ознаками прототипу та рішення, що заявляється, є те, що проводять фарбування гістологічних препаратів ядерними барвниками. Корисна модель відрізняється від прототипу тим, що вимірювання проводять за середньою арифметичною оптичної густини забарвлення та показником середньоквадратичного відхилення оптичної густини забарвлення. Спосіб що заявляється, здійснюється наступним чином. Фарбують гістологічний або цитологічний препарат ядерним барвником. Далі за допомогою цифрового фотоапарата та оптичного мікроскопа при великому збільшенні отримують цифрове зображення ядра клітини. Потім в ділянці цифрового зображення ядра клітини засобами комп'ютерного аналізу зображення (комп'ютерної програми) вимірюють середню арифметичну оптичної густини 31190 4 забарвлення (у відносних одиницях оптичної щільності у діапазоні «0-1») та показник середньоквадратичного відхилення оптичної густини забарвлення (у відносних одиницях оптичної густини). Обраховування коефіцієнту варіації оптичної густини забарвлення (вираженого у відсотках) здійснюють шляхом ділення величини середньоквадратичного відхилення оптичної щільності забарвлення на середню арифметичну оптичної щільності забарвлення із множенням на 100. За величиною цього показника судять про ступінь організації ядерного хроматину, враховуючи що збільшення величини показника відповідає більш гетерогенному забарвленню і гетерохроматичній організації хроматину, і, отже, є морфологічним субстратом щодо трактування обмеження функціональної здатності клітини. Використання способу пояснюється конкретними прикладами. Приклад використання способу №1 Досліджено секційний матеріал (тканину стовбуру головного мозку) 22 хворих на діабетичну енцефалопатію, який отримували впродовж 10-12 год після смерті (дослідна група). Для порівняння використовували зразки мозкової тканини 20 загиблих від нещасних випадків, практично здорових за життя (контрольна група). Шматочки тканини фіксували у 5% водному розчині сульфосаліцилової кислоти впродовж 24 годин. Здійснювали проводку у висхідній батареї етанолу та парафінову заливку при 56°С (для збереження параметрів ядра). Виготовлені парафінові зрізи товщиною 5 мкм фарбували гематоксиліном Гарріса, який дає можливість отримання контрастного забарвлення ядерного хроматину. Цифрові копії оптичного зображення виготовляли із використанням об'єктиву мікроскопа 60х - при водній імерсії. Коефіцієнт оптичної густини забарвлення ядерного хроматину ендотеліоцитів капілярів судин стовбуру мозку за діабетичної енцефалопатії становив 19,2±0,52% і перевищував контрольний показник (15,1±0,24%) з високим ступенем вірогідності (Р