Спосіб моделювання функціональної недостатності плаценти

Спосіб моделювання функціональної недостатності плаценти шляхом підвищення рівня стрес-гормонів в організмі вагітної, який відрізняється тим, що вагі тну самицю піддають дії соціально-емоційного стресу з другого по восьмий та з чотирнадцятого по дев'ятнадцятий дні вагітності. (19) (21) u200804823 (22) 14.04.2008 (24) 10.09.2008 (46) 10.09.2008, Бюл.№ 17, 2008 р. (72) СЕРГІЄНКО ЛОРІАН А ЮРІЇВН А, U A, КАРТАВЦЕВА ОКСАН А ВОЛОДИ МИРІВН А, U A, ПЕРЕЦЬ ОЛЕНА ВІКТОРІВНА, U A, ЧЕРЕВКО Г АННА МИКОЛАЇВНА, UA, БОНДАРЕНКО ТЕТЯНА ВІКТОРІВНА, U A 3 35303 требують наявності у розпорядженні експериментатора доволі рідкісного реактиву, застосування якого у найбільш поширених експериментальних тварин, якими є щури, досконально не відпрацьовано. Деякі дослідники для досягнення змін у системі «мати-плід» моделювали підвищення рівня стрес-гормонів в організмі вагітної шляхом уведення екзогенних аналогів. Так, кортикостерон уводили безпосередньо в кровоносну систему матки вівці шляхом оперативного втручання [16]. Відтворення такої моделі обмежується використанням овець як експериментальних тварин та потребує певних навичок у експериментаторів. Відомий спосіб моделювання при якому щурам перед заплідненням внутрішньочеревинно вводять адреналін; про зміну стрес-реактивності у нащадків свідчить гіперпроліферація адренокортикотропоцитів у гіпофізах останніх [17]. Але ці моделі відтворюють надлишкове попадання в жіночий організм під час або до вагітності екзогенного гормону, що само по собі є достатньо штучною ситуацією. При цьому лишається невизначеним, чи мають місце функціональні порушення з боку плаценти і чи формується таким чином стан так званої фетоплацентарної недостатності, наслідком якої, як було вказано вище, є цілий комплекс метаболічних порушень, що складають патогенетичну основу широкого переліку хвороб нащадків у дорослому віці. Задача корисної моделі полягає в створенні наближеної до реальних життєвих обставин патогенетичної моделі функціональної недостатності дезактивуючої функції плаценти по відношенню до високої концентрації стрес-гормонів, а саме глюкокортикоїдів, впродовж вагітності. Поставлена задача вирішується тим, що для моделювання функціональної недостатності пла 4 центи шляхом підвищення рівня стрес-гормонів, вагітну самицю піддають дії соціально-емоційного стресу з 2-го по 8-й та з 14-го по 19-й дні вагітності. Технічний результат - розширення арсеналу експериментальних моделей фетоплацентарної недостатності для відтворення та оцінки «чистих» ефектів впливу надлишку глюкокортикоїдів на фетоплацентарний комплекс, функціональні системи плода та наслідки для функціональних систем дитини на етапах її післянатального життя. Відібрані для експерименту молоді репродуктивнозрілі самиці спаровуються зі статеве активними самцями за відомою методикою [18]. При цьому першим днем вагітності вважають той, коли у вагінальному мазку знаходять сперматозоїди. Вагітну самицю піддають дії соціально-емоційного стресу, для чого її поміщають кожного дня на 12 годин світлової частини доби до клітки, де знаходяться 20-25 статевозрілих невагітних самиць. Решту часу вагітна самиця перебуває в окремій клітці для відпочинку. Таке «занурення» у незнайомий соціум проводять двічі - з 2-го по 8-й день вагітності, а потім з 14-го по 19-й день вагітності. Склад оточення при цьому кожного разу змінюють. Щурята народжуються природним шляхом та в подальшому утримуються в рекомендованих для цих тварин умовах і можуть бути використані для вивчення особливостей функціонування їх нейроенокринної та інших систем на різних етапах післянатального онтогенезу. Підтвердженням наявності фетоплацентарної недостатності у вагітних самиць є результати, отримані нами на великій кількості тварин - 275 вагітних самиць щурів популяції Вістар та 2230 їх новонароджених (3-5 день життя) нащадків обох статей. Отримані дані наведені у таблиці. Таблиця Рівень кортикостерону в плазмі крові та показники розвитку плацент і плодів у інтактних та стресованих самиць Показник Кортикостерон в плазмі крові самиць, нмоль/л Кортикостерон в плазмі крові новонароджених щурів (3-5 доба), нмоль/л Маса плодів, г Краніо-каудальний розмір плодів, см Маса плацент, мг Плацентарно-плодовий коефіцієнт Саме зниження маси та зменшення розміру плодів, збільшення маси плацент і, таким чином, виразне зростання плацентарно-плодного коефіцієнту є переконливим доказом розвитку фетоплацентарної недостатності у вагітних самиць внаслідок пренатального стресу. В той же час, виразне підвищення рівня кортикостерону в плазмі крові новонароджених нащадків стресованих матерів вказує на надлишкову внутрішньоутробну обробку глюкокортикоїдами тканин плодів, що, як показано Група тварин Інтактні Стресовані самиці, n=127 самиці, n=148 396,82±27,01 582,18±18,80 200,26±29,90 513,10±21,73 2,47±0,05 2,17±0,02 3,00±0,02 2,92±0,01 476,3±12,4 538,6±24,6 0,152±0,005 0,247±0,010 багатьма дослідниками [4-6], є причиною розвитку в таких нащадків цілої низки патологій у післянатальному житті. Відтворення соціально-емоційного стресу у вагітних самиць щурів за запропонованою методикою призводить до появи вказаних ознак фетоплацентарної недостатності в 93 % вагітних самиць та в 87 % новонароджених нащадків. Спосіб достатньо простий, може бути відтворений у будь-якій науково-дослідній установі, де 5 35303 проводиться вивчення всіляких аспектів наслідків фетоплацентарної недостатності, їх профілактики та лікування. Джерела інформації: 1. Фетоплацентараная недостаточность: Метод, рекомендации / Луганский государственный медицинский институт; Сост.: С.С.Лубяная, И.В.Чибисова. -Луганск, 2001.-31с. 2. Степановская Г.К. Неотложные состояния в акушерстве и гинекологии / Г.К.Степановская, Б.М.Венцковская, Г.Д.Гордеева. - К.: Здоров'я, 2000. - 669с. 3. Паращук Ю.С. Ведение беременности и родов при фетоплацентарной недостаточности / Ю. С.Паращук, О.В.Грищенко. - Харьков: Торнадо, 2002.-116с. 4. Barker D.J.P. In utero programming of chronic disease // Clin. Science. -1998.-Vol.95.-P.115-128. 5. Seckl J.R. Glucocorticoid programming of the fetus: adult phenotypes and molecular mechanisms // Molec. Cell. Endocrinol. - 2001. - Vol. 185, №1-2. P.61-71. 6. Fetal and placental size and risk of hypertension in adult life / D J.P.Barker, A.R.Bull, C.Osmond, S.J.Simmonds // Br.Med.J. - 1990. - Vol. 301. - P.259-262. 7. dark P.M. Programming of the hypothalamopitustary-adrenal axis origins of adult disease hypothesis //European Journal of Pediatrics. -1998. Vol. 157. - P. 7-10. 8. Bertram С. Е. Prenatal programming of postnatal endocrine responses by glucocorticoids / C. Е. Bertram, М. A. Hanson // Reproduction. - 2002. P.459-467. 9. Dysfunction of the placental glucocorticoid barrier: a link bectween the fetal environmental and adult hypertension / C.R.W. Edwards, Комп’ютерна в ерстка Н. Лисенко 6 R.Benedicktsson, R.Lindsay, J.R.Seckl//Lancet. 1993. -Vol.341. -P.355-357. 10. Programming effects of short prenatal exposure to dexamethasone in sheep / М.Dodic, T.Abonantoun, A. O'Connor et al. // Hypertension. 2002. - Vol. 40. -P.729-734. 11. Welberg L.G.М. Prenatal stress glucocorticoids and programming of the brain / L.G.М.Welberg, J.R.Seckl // J.Neuroendocrinol. 2001. - Vol. 13. - P.113-128. 12. Prenatal treatment and diagnosis of congenital adrenal dysplasia owing to steroid 21hydroxylase deficiency / A.Mercado, R.Wilson, K.Cheng et al. // Journal of Clinical Endocrinology and Metabolism. -1995. - Vol. 80. - P.2014-2020. 13. Inhibition of llp-hydroxysteroid dehydrogenase in pregnant rats and the programming of blood pressure in the offspring / R.S.Lindsay, R.M.Lindsay, C.R.Edward, J.R.Seckl // H ypertension. - 1996. - Vol. 27. - P.1200-1204. 14. Vehaskari V.M. Prenatal Programming of hypertension: Lessons from experimental Models / V. M. Vehaskari, L. Woods // J. Am. Soc. Nephrol. 2005. -Vol. 16.-P. 2545-2556. 15. Bertram С.E.Animal models and programming of the metabolic syndrome / C.E.Bertram, M.A.Honson//British Medical. Bulletin. 2001. -Vol. 60. -P.103-121. 16. Glucocorticoid exposure in utero: new model for adult hypertension / R.Benedicktsson, R.Lindsay, J. Noble et al. //Lancet. -1993. -Vol. 341. -P.339-341. 17. Мозговая Т.П. Гистологический анализ эпифиза и гипофиза мозга родителей и потомков при моделировании стресса / Т.П.Мозговая, Г.И.Губина-Вакулик, Г.В.Горбач // Врачебная практика. - 2007. - №4. -С.95-98. 18. Киршенблат Я.Д. Практикум по эндокринологии. - M.: Высшая школа, 1969. - 256с. Підписне Тираж 28 прим. Міністерство осв іт и і науки України Держав ний департамент інтелектуальної в ласності, вул. Урицького, 45, м. Київ , МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислов ої в ласності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601