Спосіб підготовки трепанобіоптату кісткового мозку для гістологічного дослідження

Спосіб підготовки трепанобіоптату кісткового мозку для гістологічного дослідження, що включає 3 3907 4 Найбільш близьким за технічною суттю є спопротягом 5-7 діб з кожноденною зміною розчину. сіб [7], у відповідності з яким трепанобіоптат фікМінімальне співвідношення між об'ємами біоптата сується в ценкер-формолі, промивається водопрота розчину 1:50. відною водою, декальцинується у рідині, що 3. Зневоднюють у розчинах ізопропанолу зроскладається з рівних частин 85% розчину мурашистаючих концентрацій (70%, 80%, 90%, 99%, ної кислоти і 20% розчину натрію цитрату, протя100%, 100%) по 12 годин у кожному. гом 18-20 годин, обробляється 5% розчином алю4. Обробляють зразки протягом 10 діб у суміші мокалієвого галуну 3-4 години, зневоднюється, целоїдин-рицинова олія, яка готують наступним обробляється у суміші целоїдин-гвоздична олія чином: 2г целоїдину розчиняють у 20мл ацетону; протягом 2-3 діб, відмивається у хлороформі і задо отриманого розчину додають 100% ізопропанол ливається у парафін. З оброблених таким чином до досягнення загального обсягу 50мл; до отрибіоптатів досить легко виготовляються гістологічні маного розчину додають 50мл рицинової олії. зрізи. Здатність до забарвлення кісткового мозку, 5. Проводять трепанобіоптати через три порції особливо при використанні гематологічних спосохлороформу, по годині у кожній. Занурюють зразки бів фарбування, змінюється і не повністю відповіу насичену суміш хлороформ-парафін при 37°С на дає картині, яка спостерігається при забарвленні одну годину. Проводять зразки через дві порції мазків. Крім того спостерігається суттєво більша чистого парафіну при 56°С по 30 хвилин, заливаретракція гемопоетичної тканини, ніж кісткової, що ють у парафін. призводить до виникнення артефактів у вигляді Результат: при виготовленні гістологічних превеликих щілин між ними. паратів забезпечується високий ступінь зберігання Задача, що вирішується, полягає в забезпеприродних просторових співвідношень між тканинченні зменшення виразності артефактів, що вининими компонентами кісткового мозку. Це принцикають за рахунок різного ступеня ретракції різних пово важливо при проведенні морфометричних тканинних компонентів кісткового мозку при підгодосліджень у зв'язку зі зменшенням рівня об'єктитовці біоптатів до гістологічного дослідження та вної помилки, а також збереженням їх тинкторіазбереження їх здатності до забарвлення. льних властивостей як при використанні загальноТехнічний результат, що досягається полягає гістологічних та гематологічних, так і спеціальних в підвищенні зберігання природних просторових методів забарвлення гістологічних зрізів, що підспіввідношень між тканинними компонентами кіствищує діагностичн у цінність препаратів. кового мозку, що важливо при візуальному виПрикладами конкретного виконання способу, вченні і принципово важливо при проведенні морщо пропонується, є виготовлення гістологічних фометричних досліджень, у поєднанні зі препаратів з трепанобіоптатів людей, що стражзбереженням їх здатності до забарвлення. дають на різні форми лейкозів, фрагменти губчасПоставлена мета досягається за рахунок того, тої кістки з грудини собаки. Зрізи товщиною 7мкм що у відомому способі підготовки трепанобіоптатів забарвлювалися гематоксиліном та еозином, азукісткового мозку для гістологічного дослідження, рІІ-еозином, фосфорновольфрамовим гематоксищо включає його фіксацію, декальцинацію, зневоліном за Маллорі, за ван Гізон, за Новеллі; ставиднення, обробку целоїдином та ущільнення у пали реакції ШІК та Хейла. Проведене вивчення рафіні, згідно з корисною моделлю трепанобіоптат препаратів показало, що всі тканинні елементи на фіксують у ізоосмолярній рідині, що складається з гістологічних зрізах адекватно забарвлюються. 10 часток формаліну та 90 часток 0,9% розчину Практично відсутні щілини між кістковими балками натрію хлориду протягом 24 годин при 4°С; деката гемопоетичною тканиною, відсутні в складі осльцинують у 5% розчині етилендіамінтетрооцтової танньої мікротріщини. кислоти динатрієвої солі впродовж 5-7 діб, зневоДжерела інформації днюють у розчинах ізопропаполу зростаючих кон1. Абдулкадыров К. М., Бессмельцев С. С., Руцентрацій, обробляють у суміші целоїдинкавицин О. П. Хронический миелолейкоз. - СПб: рицинова олія та заливають у парафін. Специальная литература, 1998.- 464с. Відмінною особливістю способу, що викорис2. Третяк Н. М., Настаенко О. П., Коваль А. I., товується, є застосування ізоосмолярного фіксаМнишенко В. М. Методики проведення трепанобітора який попереджає набряк тканин, що обробопсії кісткового мозку і підготовки біоптату до ляються, зі "м'яким" зневодненням ізопропанолом, морфологічного аналізу.- К.: ТОВ "Міжнар. фін. що забезпечує високу ступінь зберігання природагенція", 1996.- 13с. них просторових співвідношень між тканинними 3. Hopwood D. Fixatives and fixation: a review компонентами кісткового мозку, у поєднанні з збе//Histochem. J.- 1969.- V.1, №4.-P.323-360. реженням їх здатності до забарвлення. 4. Грабовий О. М., Проша М. В. ІзопропанолЗапропонований спосіб підготовки трепанобіоцелоідин-парафіновий метод заливки матеріалу птатів кісткового мозку для гістологічного дослідля гістологічних досліджень //Український журдження здійснюють слідуючим чином: нал медичної техніки і технології, 1994.- №1-2.1. Трепанобіоптати відразу після отримання С.44-47. занурюють в рідину, що складається з 1 частки 5. Ташке К. Введение в количественную цитоформаліну та 9 часток 0,9% розчину натрію хлогистологическую морфологию. Бухарест: Акадериду, протягом 24 годин при 4°С. Промивають мия, 1980. - 191с. зразки у двох порціях 0,9% розчину натрію хлори6. Thiele Ju., Kvasnicka Н. М., Beelen D. W., et ду по 5 хвилин. al. Megakaryopoiesis and ' Myelofibrosis in Chronic 2. Декальцинують зразки в 5% розчині динатMyeloid Leukemia after Allogeneic Bone Marrow рієвої солі, етилендіамінтетраоцтової кислоти Transplantation: An Immunohistochemical Study of 5 3907 6 127 Patients //Modern Pathology.-2000.-V.14.-P.129панобиопсия костного мозга при некоторых гема138. тологических заболеваниях //Л.: Медицина, 1977.7. Теодорович В. П., Абдулкадыров К. М. Тре94с. Комп’ютерна в ерстка Д. Шев ерун Підписне Тираж 37 прим. Міністерство осв іт и і науки України Держав ний департамент інтелектуальної в ласності, вул. Урицького, 45, м. Київ , МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислов ої в ласності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601