Спосіб визначення критеріїв морфофункціонального стану тимуса поросят

Спосіб визначення критеріїв морфофункціонального стану тимуса поросят, що включає встановлення його структури, який відрізняється тим, 3 пин, Л.Е. Этинген. - М.: Медицина, 1996. - 304с.; Маслянко Р. Основи імунобіології. - Львів: Вертикаль, 1999. - 472с; Миллер Дж., Дукор П. Біологія тимуса / Дж. Миллер, П. Дукор. - М.: Мир, 1967. 112с.; Кимилева З. Вилочковая железа / З. Кимилева. - М.: Медицина, 1984. - 256с.; Торбэк В.Э. Морфогенез тимуса: монография / В.Э. Торбек. М.: Из-во РУДН, 1995. - 116с.]. Недоліком прототипу [Миллер Дж., Дукор П. Біологія тимуса /Дж. Миллер, П. Дукор. - М.: Мир, 1967. - 112с.] є відсутність критеріїв морфофункціонального стану тимуса поросят з використанням комплексу макро- і мікроскопічних методів досліджень, у взаємозв'язку із їх життєздатністю. Корисною моделлю ставиться завдання визначити критерії морфофункціонального стану тимуса поросят з метою з'ясування його впливу на життєздатність тварин та розробити заходи щодо підвищення їх збереження. Для з'ясування морфофункціональних критеріїв тимуса досліджували одно- (з живою масою вищою за порідні показники - І група; відповідно такої - II та нижчою за неї - III група), а 5-, 10-, 15- і 20добових (І та II групи) поросят Полтавського м'ясного типу (ПМ-1). Поросят вирощували в навчально-науково-виробничому комплексі Південного філіалу "Кримський агротехнологічний університет" Національного університету біоресурсів і природокористування України. Протягом перших 20 діб життя поросят вирощували в клітках разом із свиноматкою у типовому свинарнику. Після визначення топографії тимуса за допомогою штангенциркуля з'ясували довжину його частин, а також його абсолютну і відносну масу. Тимус фіксували спочатку у 5- а через 5 діб - у 10% розчину формаліну, де і зберігали протягом гістологічних досліджень. Гістологічні зрізи виготовляли на заморожуючому мікротомі (МК-25м), фарбували гематоксиліном і еозином та імпрегнували азотнокислим сріблом за загальноприйнятими методиками. Дослідження гістозрізів проводили за допомогою світлового мікроскопу Olympus CX 21. На мікроскопічному рівні визначали відносну площу (ВП) сполучнотканинної строми, кіркової і мозкової зон, їх співвідношення та кількість тимічних тілець. Проведені анатомічні дослідження свідчать, що парні шийні частини тимуса починаються позаду відростків потиличної кістки, розміщуються з боків трахеї, а перед входом у грудну порожнину зміщуються вентрально і зростаються, утворюючи при цьому непарну шийну (проміжну) частину. Остання переходить без чіткої межі у грудну частину тимуса, яка лежить зліва від перикардіальної середостінної плеври. Грудна частина міститься над ручкою груднини на рівні основи серця, не доходячи до його верхівки на 12-27мм. У добових поросят з живою масою відповідною порідним показникам тимус блідо-рожевого кольору і еластичний з чітко вираженими частинами. Це характерно і для тварин із живою масою більшою за порідні показники. У пренатально недорозвинутих добових поросят тимус жовтуватого кольору. Парні шийні частини не доходять до відростків потиличної кістки на 2-3см, а проміжна частина має незна 49212 4 чне потовщення. У недорозвинутих 20-добових поросят парні шийні частини значно потоншуються, місцями заміщуються пухкою волокнистою сполучною тканиною, а грудна частина стрічкоподібної форми не доходить до верхівки серця на 3134мм. Іноді вона взагалі відсутня. Морфометричні параметри тимуса залежать як від пренатального розвитку поросят, так і від індивідуальних особливостей реалізації гено- і фенотипу в перші 20 діб життя (табл. 1). У добових поросят з живою масою відповідною порідним показникам абсолютна маса тимуса (II група) сягає 3,01±0,21г, а відносна - 0,31±0,01%. У тварин І групи абсолютна і відносна маса менша відповідно на 203,9% і 0,09%. У поросят III групи абсолютна маса тимуса менша на 9,6%, а відносна, навпаки, більша на 0,07%. З віком поросят реєструється збільшення абсолютної і зменшення відносної маси тимуса. Довжина частин тимуса збільшується з віком поросят. Виключенням є 20-добові поросята з живою масою нижчою за порідні показники. Абсолютна маса тимуса у них лише на 0,08г більша від такої добових III групи, а відносна майже у 2 рази менша. Це свідчить про його інтенсивну трансформацію, яка зумовлює зниження росту і розвитку поросят. Гістологічні дослідження показують, що морфометричні параметри тимуса поросят безпосередньо корелюють з розвитком його стромальних і паренхіматозних компонентів (табл.2). У поросят із живою масою відповідно порідним показникам (II група) ВП лімфоїдної тканини у часточках тимуса становить 88,02±1,14%, сполучнотканинної строми - 11,36±1,17%. У тварин І групи ВП лімфоїдної тканини більше на 0,58%, а сполучнотканинної строми менше на 0,62%. У поросят III групи, навпаки, менша ВП лімфоїдної тканини на 4,72%, а сполучнотканинної строми - більша на 5,34%, порівняно такими показниками поросят II групи. У пренатально недорозвинутих тварин більша ВП кіркової зони, а мозкової - менша. Співвідношення зон сягає 1:3,9. У мозковій зоні кількість тимічних тілець коливається від 1 до 5. Вони невеликих розмірів, з нечітким шаруванням. У поросят І і II груп кількість тимічних тілець сягає 9. З віком поросят ВП лімфоїдної тканини у часточках тимуса зменшується, а сполучнотканинної строми збільшується. У часточках зменшується ВП кіркової зони, а мозкової - збільшується. Співвідношення зон зменшується до 1:2,2. У 5-добових поросят ВП лімфоїдної тканини відповідає такій добових поросят І групи. Проте, ВП кіркової зони збільшується на 0,29%. Протягом наступних 5 діб життя зменшується ВП сполучнотканинної строми і збільшується ВП лімфоїдної тканини. У 15-добових поросят ВП лімфоїдної тканини зменшується. У 20добових недорозвинутих поросят ВП кіркової зони більша на 0,55%, а мозкової - менша на 0,70%, що відображається як на мозково-кірковому співвідношенні (1:2,3), так і на кількості тимічних тілець (2-7). Отже, морфометричні параметри, кількісні співвідношення і якісні характеристики тканинних структур тимуса впливають на організменний ста 5 49212 тус поросят. Зменшення відносної площі лімфоїдної і збільшення площі пухкої волокнистої сполучної тканини тимуса та розширення мозковокіркового співвідношення сприяють пренатальному недорозвиненню організму добових поросят. З віком тварин структурні перетворення тканинних 6 компонентів тимуса проявляються зростанням площі лімфоїдної тканини мозкової зони часточок і, як наслідок, її збільшення, особливо у 10добових та деяке зменшення у 20-добових поросят. Таблиця 1 Динаміка морфометричних показників тимуса поросят Жива маса, г Абсолютна маса, г 1506,67±120,28 968,00±64,27 735,00±67,58 1025,00±100,15 1412,00±218,01 1855,00±185,71 2300,00±37,42 3453,33±74,27 2171,67±47,08 2815,00±314,69 6,16±1,34 3,01±0,21 2,81±0,35 3,73±0,52 3,83±0,89 4,47±0,78 4,49±0,13 6,36±0,79 2,89±0,53 4,63±0,93 0,40±0,05 0,31±0,01 0,38±0,02 0,36±0,02 0,26±0,03 0,24±0,04 0,19±0,01 0,18±0,02 0,14±0,02 0,16±0,02 Вік, (діб) група І II III Середнє 5 10 15 І II Середнє 1 20 Довжина праДовжина лівої Довжина непавої парної парної шийної рної і грудної шийної частичастини, мм частини, мм ни, мм 61,33±5,67 56,67±5,21 30,33±7,26 49,80±1,34 50,60±1,25 23,60±2,02 45,25±2,18 43,00±1,23 26,25±3,31 51,17±2,33 49,58±2,03 26,17±1,95 54,40±3,05 49,20±3,15 29,40±2,39 57,75±6,29 55,75±0,99 29,00±1,70 59,67±4,55 57,00±5,10 25,33±2,16 80,33±12,85 78,67±12,80 41,33±8,73 58,00±0,71 55,33±0,82 17,33±12,03 69,17±7,44 67,00±7,70 29,33±8,36 Відносна маса, % Таблиця 2 Динаміка відносної площі тканинних компонентів грудної частини тимуса поросят, % Сполучнотканинна Лімфоїдна ткастрома нина І 11,98±1,14 88,60±1,56 II 11,36±1,17 88,02±1,14 III 16,70±1,10 83,30±1,10 Середнє 13,30±0,72 86,70±0,72 5 11,40±1,56 88,60±1,56 10 10,83±0,68 89,17±0,68 15 14,28±1,02 85,72±1,02 І 15,48±1,45 84,42±1,45 II 15,63±1,33 84,34±1,33 Середнє 15,61±0,99 84,39±0,94 Вік, (діб) групи 1 20 Комп’ютерна верстка А. Рябко Кіркова зона 66,27±1,15 68,52±0,90 66,54±0,85 67,29±0,55 66,56±1,48 61,51±1,01 68,93±0,56 58,06±1,25 58,61±1,22 58,33±0,83 Підписне Мозкова зона Мозкова/Кіркова 21,75±0,55 20,12±0,65 16,76±0,69 19,41±0,45 22,05±1,01 16,79±0,55 26,06±0,74 26,36±0,99 25,76±1,22 26,06±0,74 1:3,0 1:3,4 1:3,9 1:3,5 1:3,0 1:2,9 1:4,1 1:2,2 1:2,3 1:2,2 Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601