Спосіб виявлення алергенних кліщів у побутовому пилу

Спосіб виявлення алергенних кліщів у побутовому пилу, який здійсняють шляхом відбору проб та дослідження під мікроскопом, який відрізняється тим, що попередньо зволожують пензлик дистильованою водою та здійснюють ним змив з поверхонь предметів довкілля, отриманий змив розміщують в баночці з дистильованою водою, переливають в пробірку, відстоюють, отримують осад, який досліджують. (19) (21) u201015172 (22) 16.12.2010 (24) 25.06.2011 (46) 25.06.2011, Бюл.№ 12, 2011 р. (72) БОДНЯ КАТЕРИНА ІГОРІВНА, ГАЗЗАВІ ЛЮДМИЛА ВІКТОРІВНА, ЧЕГОДАЙКІНА НАТАЛІЯ СЕМЕНІВНА, ТОКАР ІРИНА МИКОЛАЇВНА (73) ХАРКІВСЬКА МЕДИЧНА АКАДЕМІЯ ПІСЛЯДИПЛОМНОЇ ОСВІТИ 3 Найчастіше використовується метод безпосереднього дослідження свіжозібраного пилу під бінокулярною лупою. Зібрані зразки побутового пилу бажано дослідити протягом 1-2 тижнів, але, по можливості, як найскоріше. Зберігати зразки потрібно при кімнатній температурі та достатній вологості повітря в тарі, в якій вони були доставлені. Зразок, який підлягає дослідженню, спочатку зважують на терезах, потім висипають до чашки Петрі і залишають на 5 хв. За цей час кліщі, які були потривожені під час пересипання в чашку Петрі, заспокоюються і починають активно рухатись, що дозволяє добре їх роздивитись під бінокулярною лупою. Метод флотації більш складний, вимагає більше уваги і часу для дослідження, але дозволяє виявити дрібні та не рухомі об'єкти. Частину побутового пилу, звільнену від волокнистої субстанції просіюванням, заливають у високому хімічному циліндрі 20 частинами насиченого розчину хлористого натрію. Суміш енергійно перемішують без утворення піни, додають 5-10 крапель 10% розчину прального порошку (типу "лотос") і відстоюють протягом 10-15 хвилин. Верхній шар рідини, що відстоялася, зливають до чашки Петрі і досліджують під бінокулярною лупою. Кліщі і частинки пилу під впливом розчину натрію хлориду можуть злипатися і тому для виготовлення препаратів з кліщів їх варто відмити водою. Метод інкубації є засобом збагачення проби за рахунок культивації кліщів у пробі в умовах сприятливих для їх розвитку. Частину побутового пилу біля 0,5г вносять у скляний циліндр і витримують в термостаті за температури 25°С та 75% відносної вологості протягом 3-х тижнів. Живі кліщі, що відроджуються з яєць, легко виявляються при дослідженні пилу (перенесеного до чашки Петрі) за допомогою бінокулярної лупи. Експрес-метод розрахований на виявлення в пробі алергенних елементів, в тому числі кліщів. Метод відносно швидкої діагностики, вважається не досконалим і мало придатним. Він передбачає виявлення кліщів, в першу чергу, на внутрішній поверхні пошивки, що використовувалася для спання. Зіскрібок з внутрішньої поверхні пошивки вкладають до пробірки, заливають подвійним об'ємом 10% їдкого лугу (калійного або натрієвого) і кип'ятять на спиртівці протягом 2-3 хвилин. Мацерат центрифугують і з осаду готують мікроскопічний препарат. Хітинові частини кліщів, оболонки яєць чітко видні серед гомогенної мацерованої маси. Найбільш близький та обраний як найближчий аналог є спосіб визначення алергенних кліщів у побутовому пилу, який здійснюють шляхом відбору проби щіткою для одягу (Методичні рекомендацій "Методи виявлення та визначення кліщів, які зустрічаються в побутовому пилу". - Київ. – 2007р. - С.6). Використовувати можна щітки з різною довжиною щетини (натуральної чи синтетичної). Перед використанням щітку потрібно ретельно очистити. Щіткою ретельно обробляють поверхні постільних речей та білизни, особливу увагу потрібно приділяти швам. Порох збирають на аркуш 60763 4 паперу, а потім аркуш зі зразком пилу згортають як для порошків в аптеці. Кожний лист паперу обов'язково підписують і складають в банку з поліетиленовою кришкою для подальшого транспортування. Після використання щітку треба ретельно очистити, вимити та висушити. Зібрані проби побутового пилу досліджують одним із відомих способів. Цей метод є придатним лише у випадку забрудненості довкілля пилом на достатньо високому рівні. Недоліками способу є розповсюдження пилу під час забору проб. Перелічені вище методи на практиці є не завжди зручними та легкими у виконанні. А необхідне обладнання (пилосос) мають далеко не всі санепідустанови. В основу корисної моделі поставлено задачу удосконалення способу виявлення алергенних кліщів у побутовому пилу, в якому за рахунок зміни характеру отримання проби, досягається запобігання розповсюдженню пилу під час забору та аналізу, та уникнення прояву алергічних реакцій. Поставлена задача вирішується в способі виявлення алергенних кліщів у побутовому пилу, який здійснюють шляхом відбору проб та дослідження під мікроскопом, згідно з корисною моделлю, попередньо зволожують пензлик дистильованою водою та здійснюють ним змив з поверхонь предметів довкілля, отриманий змив розміщують в баночці з дистильованою водою, переливають в пробірку, відстоюють, отримують осад, який досліджують. В порівнянні з відбором та дослідженням сухих проб пилу, вологий метод є більш ефективним та якісним ще й тому, що волога кисточка не дає можливості пилу, та присутнім в ньому кліщам, розлітатися при відборі, як це відбувається при проведенні дослідження за допомогою сухих щіток для одежі. Вологий метод відбору пилу є не лише простим та доступним в використанні, не потребуючий економічних витрат, а й дозволяє проводити якісний моніторинг за станом забрудненості різних предметів довкілля без розповсюдження пилу під час дослідження. Запропонований спосіб здійснюють таким чином. Обладнання, яке необхідне для забору матеріалу та дослідження запропонованим вологим способом: 1) кісточка з натурального або штучного волокна; 2) скляний (або одноразовий) посуд з кришками; 3) олівець для скла; 4) центрифужні пробірки; 5) штатив для пробірок; 6) стекла предметні; 7) мікроскоп біологічний (типу МБІ); 8) дистильована вода; 9) паперові кульки для відпрацьованих кісточок; 10) голки ентомологічні; 11) халати медичні; 12) журнал. 5 60763 Вологий спосіб відбору пилу здійснюють таким чином. Маркірують скляні, або одноразові, баночки. Після чого наливають в них по 25мл дистильованої води. Зволожують кісточку в дистильованій воді. За допомогою кісточки відбирають з поверхні предметів довкілля (меблі, інвентар, білизна та ін.) змив. Споліскують кісточку в баночці з дистильованою водою, Згідно номеру на баночці, дані про відібраний змив заносять у журнал Переливають 6 відібрані змиви у центріфужні пробірки. Відстоюють змив протягом декількох годин, або відцентрифуговують для скорішого осідання осаду. Надосадочну рідину зливають. Осад переливають на предметне скло. За допомогою мікроскопу проводять дослідження змиву. За допомогою цього методу Харківською обласною санепідстанцією були проведені дослідження пилу на наявність пилових кліщів. Отримані результати наведені у таблиці. Таблиця. Дослідження пилу на наявність пилових кліщів Харківською обласною санепідстанцією Дослідження № рядка А Санітарно-ентомологічні всього Побутового пороху всього в тому числі: в лікарнях санаторно-оздоровчих закладах дитячих дошкільних закладах дитячих закладах закритого типу всього в тому числі: в дитячих будинках школах - інтернатах закладах закритого типу для дорослих всього в тому числі в: домах інвалідів будинках для людей похилого віку перукарнях тощо Б 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 З вище приведених даних видно, що за допомогою вологого способу відбору побутового пилу, навіть у перукарнях, де мінімум м'якого інвентарю, а робочий інструментарій майстрів - перукарів (майстрів манікюру) регулярно миється та знезаражується, є позитивні знахідки. Комп’ютерна верстка Н. Лиcенко Всього до- 3 них позисліджено тивних аналізів аналізів* 1 19232 18497 2261 1114 7939 1098 239 859 320 125 195 3021 2744 % 3 числа позитивних: в тому числі виявлено Кліщів Комах 4 5 150 32 144 29 7 12 22 59 9 12 2 182 173 19 22 68 12 3 0.95 0.9 0.8 2 0.9 1.1 12 1 1 1.4 0.3 0.8 12 1 1 10 41 0.3 1.5 7 36 3 5 Таким чином, запропонований спосіб виявлення алергенних кліщів у побутовому пилу є простим у використанні і може бути запропонований для широкого використання. Підписне Тираж 24 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601