Спосіб прогнозування виникнення катаракти

Спосіб прогнозування виникнення катаракти, який полягає в біохімічному аналізі крові пацієнта, який відрізняється тим, що можливість прогнозування ймовірності виникнення катаракти визначається станом активності ферменту глутатюн-Sтрансферази, рівень активності якого менш 19нкат/мг білка визначається як фактор ризику розвитку катаракти Винахід відноситься до галузі медицини, зокрема до офтальмології і може бути використаний для прогнозування виникнення катаракти Щодо даних ВООЗ серед причин сліпоти катаракта становить 43% (19,3 млн) від усієї офтальмопатологм У НИНІШНІЙ час спостерігається зростання числа хворих на вікову катаракту серед осіб все більш молодого віку (Increased mortality in women with cataract a population based follow up of the North London Eye Study A Reidy, D С Mmassian, P Desai, G Vafidis, J Joseph, S Farrow, A Connolly Br J Ophthalm - 2002, 86 P 424-428) Залежність між частотою вікової катаракти та віком пацієнтів що обстежувалися дає основу розглядати це захворювання як проявлення старіння організму Проте розбіжності, що спостерігаються у розповсюдженості катаракти серед населення різних регіонів, у термінах появи первинної локалізації та форми порушення прозорості, динаміки прогресування, а також наявність катаракти з одного боку у осіб відносно молодого віку та з іншого боку збереження прозорості кришталика у осіб нерідко навіть похилого віку не дозволяють погоджуватися з судженням, що вікова катаракта є результат лише вікових змін Враховуючи викладене вище, актуальним є прогнозування можливої ймовірності виникнення катаракти з метою профілактики її розвитку Існують засоби КЛІНІЧНОГО дослідження стану кришталика - бюмікротиндалеметрія, що дозволяє КІЛЬКІСНО досліджувати тиндальфеномен (розсіювання світла білковими молекулами, що утворюють колоїдні розчини у клітках), в результаті чого дозволяє КІЛЬКІСНО оцінювати ступінь порушення прозорості кришталика (Биомикротиндалеметрические исследования хрусталика и роговицы в норме Ю И Вязовский - ОЖ - 1982 - №2 - С 106-108) Проте цей засіб дає можливість оцінювати лише ступінь вже наявних порушень прозорості кришталика Відомий засіб біохімічного прогнозування швидкості розвитку катаракти з використанням регресюнного аналізу У крові хворих на початкову вікову катаракту визначали біохімічні показники глутатюнредуктазу, глюкозо-6-фосфатдепдрогеназу, ПАЛФ-ефект, аспартатамшотрансферазу, концентрацію SB-груп, аскорбінову кислоту, глутатюн та амінонітроген Порушення активності цих ферментів свідчать про швидке прогресування катаракти Цей спосіб дає можливість прогнозування швидкості прогресування вже наявної катаракти та використовується для планування проведення своєчасного оперативного лікування з метою реабілітації хворого Спосіб прогнозування виникнення катаракти до нинішнього часу немає Найбільш близьким до запропонованого нами є засіб біохімічного прогнозування швидкості прогресування катаракти Спосіб полягає в тому, що у крові хворих на початкову вікову катаракту визначали біохімічні показники (по загальноприйнятій методиці) глутатюнредуктазу, глюкозо-6-фосфатдепдрогеназу, ПАЛФ-ефект, аспартатамшотрансферазу, концентрацію SHгруп, аскорбінову кислоту, глутатюн та амінонітроген Порушення активності цих ферментів свідчать про швидке прогресування катаракти (О (О 61621 (A A Putienko, N E Leus, E I Baydan, L I Kravchenko The Use of Regression Analyses for forecasting of Speed Development of Age-Related Cataract - Ophthalmic Res -1999,31,2 p 159) Недоліками цього методу є цей спосіб дає можливість прогнозування швидкості прогресування вже наявної катаракти та не дає можливість прогнозувати ймовірність виникнення катаракти у пацієнтів з прозорими кришталиками для проведення своєчасної и профілактики В основу нашого винаходу поставлене завдання прогнозування можливості появи катаракти шляхом дослідження рівня активності у крові ключового ферменту детоксикації глутатюн-8трансферази (GST), як показника дезштоксикаційноі функції печінки, що дозволить визначити контингент осіб із підвищеним ризиком й прогнозувати можливу ймовірність виникнення катаракти з метою профілактики и розвитку Поставлене завдання вирішується шляхом дослідження рівня активності у крові ключового ферменту детоксикації GST для прогнозування можливої ймовірності виникнення катаракти з метою профілактики м розвитку Основою для розробки запропонованого Дослідження активності ферменту глутатюн8-трансферази у крові пацієнтів із прозорими кришталиками Опис пропонованого нами способу У пацієнтів роблять забір крові з ліктьової вени натще в сухі пробірки, куди попередньо добавляють 1,0 мл гепарину (5000 од в 1 мл розчину), розведеного 1 9 фізіологічним розчином Активність GST визначають у плазмі крові, що одержується шляхом центрифугування при 4500 об/хв на протязі 10 хв В мікрокювету вносять 0,2 мл плазми та 0,2 мл реакційного суміші (субстрат-глутатіон відновлюваний), перемішують та поміщають у кюветний ВІДСІК спектрофотометру Spekol-ZV для спектрофотометри Вимірювання екстинцм роблять, використовуючи кювету з товщиною шару до 1 см при довжині хвилі 360 нм кожні 60 с протягом 1015хв Значення активності ферменту обчислювали по формулі А=Е / к т с , де Е - зміна екстинцм за одиницю часу, к - молярний коефіцієнт екстинцм, т - час інкубації, с - вміст білка в пробі Перевага розробленого засобу полягає в дослідженні активності ферменту GST у крові пацієнтів із прозорими кришталиками, що дозволяє визначити контингент осіб із підвищеним ризиком виникнення катаракти з метою профілактики м розвитку і прогнозувати можливу ймовірність м виникнення КЛІНІЧНІ ІСПИТИ були проведені в Інституті очних хвороб і тканинної терапії їм В П Філатова АМН України Групу (110 пацієнтів 220 очей, що обстежувалися) склали особи, які знаходилися на диспансерному обліку з приводу хронічних захворювань шлунково-кишкового шляху та гепатобіліар засобу з'явилися дані літератури (Экспериментальная катаракта при нарушенной дезинтоксикационной функции печени Л И Кравченко, ТА Красновид, НФ Леус Тезисы докладов VI конференции офтальмологов республики Молдова, Кишинев - 2002 - с 22) про динаміку активності ключового ферменту детоксикації GST у крові та кришталику експериментальних тварин при моделюванні катаракти в умовах збереженої та порушеної дезштоксикаційної функції печінки Результати досліджень показали динаміку катарактоутворення й зміни активності ключового ферменту детоксикації GST при поєднаному впливі двох прямих катарактогенних факторів 0,2% розчину 3амінотриазолу та світла високої інтенсивності на фоні токсичної гепатотропної дії 10% розчину чотирьох хлористого вуглецю (CCL4), викликаючого порушення білковосинтезуючої та дезштоксикаційної функції печінки, починаючи з першого тижня експерименту Це стало науковим обґрунтуванням для можливості прогнозування щодо появи катаракти у пацієнтів із прозорими кришталиками Причинно-наслідкові зв'язки являється ключовим ферментом детоксикації, рівень активності, якого у крові має важливе значення в процесі катара кто ге незу Значення активності ферменту менш 19нкат/мг білка визначається, як фактор ризику розвитку катаракти ноі системи у гастроентеролога у районній ПОЛІКЛІНІЦІ, активно запрошених до інституту Вірогідність діагнозу була підтверджена медичними документами Тривалість захворювання складала 510 років Крім того, під нашим спостереженням знаходилася група здорових в соматичному відношенні осіб (56 осіб 112 очей) того ж віку, мешканців Одеси, які знаходилися на відпочинку у профілакторіях і стан здоров'я, яких був оцінений терапевтом-геронтологом Абияких скарг з боку очей у осіб обох груп не відмічено В Інституті очних хвороб і тканинної терапії їм В П Філатова АМН України їм було проведене повне офтальмологічне обстеження в одних і тих же умовах по одній і тій же методиці обмеженим числом офтальмологів На час обстеження у всіх осіб кришталики були прозорими Тоді Ж їм було проведене біохімічне дослідження крові з визначенням активності GST за методом Awashi D С [Awashi Y С , Saneto P , Snvastava К // Exp Eye Res - 1980 - V 30 - P 2939] Відзначали дані про наявність катаракти у сімейному анамнезі Час початку спостереження 1982-1992 рік, кінець спостереження 1985-2002 рік Середня тривалість спостереження 87±53SD МІСЯЦІВ Середній вік пацієнтів на початок спостереження складав 55,7±9,2SD року Для аналізу ВІДМІННОСТІ розбіжності в активності ферменту пацієнти були поділені на 2 групи 1 група - особи, у яких катаракта не розвилася до нинішнього часу (щодо дати останнього огляду (п=98) 2 група - особи, у яких визначена початкова катаракта на час останнього огляду (п=139) Значення активності ферменту менш 19 нкат/мг білка було визначене як порогове для бінарного позначення фактору ризику 61621 код 1 - фактор ризику присутній (активність GST менш 19нкат/мг білка), 0 - буде відсутній (активність GST більша або дорівнює 19нкат/мг білка) Таким чином, вперше отримана можливість прогнозування появи катаракту у осіб із прозорими кришталиками в залежності від рівня активності у крові ключового ферменту детоксикації GST, як показника дезінтоксікаціиної функції спроможності печінки Зниження активності GST менш 19 нкат/мг білка є факторомризику появи катаракти У випадку прогнозування високої ймовірності Комп'ютерна верстка Л Ціхановська появи катаракти необхідні як загально терапевтичні заходи, направлені на активне лікування основного захворювання, так і обов'язковими, на наш погляд, повинні бути рекомендації офтальмологічного обстеження з метою проведення заходів для профілактики появи катаракти Даний спосіб був апробований на базі Інституту очних хвороб та тканинної терапії їм В П Филатова АМН України і може бути рекомендований для впровадження в практику охорони здоров'я Підписне Тираж39 прим Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, Львівська площа, 8, м Київ, МСП, 04655, Україна ДП "Український інститут промислової власності", вул Сім'ї Хохлових, 15, м Київ, 04119