Засіб для біологічної профілактики та лікування патозооспермії з екзогенних причин у дорослих ссавців

Передбачуваний винахід відноситься до галузі медицини, а саме до андрології. Відомо декілька засобів для корекції порушень сперматогенезу та патозооспермії у дорослих ссавців. Відомий засіб для покращання репродуктивної функції дорослих самців ссавців. В склад засобу входять токоферола-ацетат, аскорбінова кислота, метіонін, рутин, селеніт натрію при наступному співвідношенні вказаних компонентів (на 1кг сухого корму): токоферолу - 0,01-0,02г; аскорбінової кислоти - 0,05-0,1г; метіоніну - 0,01-0,02г; рутину - 0,01-0,02г; селениту натрію -0,000001-0,000002г (Почерняєва В.Ф., Бобирєв В.М., Дубинська Г.М., Воскресенский О.М. Засіб для покращання репродуктивної функції самців. Патент №5304 Україна // Пром. власність - 1994. - №7, кн.1, с.3.44). Недоліком засобу є тільки антиоксидантна його дія без впливу на процеси росту, диференціювання та інші постійні фізіологічні етапи сперматогенезу, які відбуваються в процесі визрівання сперматозоїдів в сім'яниках тварин. Це знижує його ефективність. Відомий спосіб корекції порушень сперматогенезу у чоловіків шляхом застосування біологічно активних речовин (БАР) тваринного походження в якості неспецифічних стимуляторів. В якості БАР використовують кріокон-сервовану тканину плаценти породіллі, фрагменти якої трансплантують в підшкірну клітковину або м'язи чоловіків. Тканини плаценти містять багато різноманітних БАР, зокрема гормонів, які деякий час стимулюють сперматогенез і фертильність чоловіків.(Грищенко B.I., Геродес Г.Г., Аліпова O.K., Проколюк О.С. Спосіб корекції порушень сперматогенезу у чоловіків. Патент №46493 А Україна // Пром. власність - 2002 №5, кн 1. - с.4.35). Недоліком способу є обмежений час дії стимуляторів, що пов'язано з розсмоктуванням підсадки та імунологічною реакцією відторгнення трансплантата. Недоліком є і те, що компоненти трансплантата не корегують порушення окислювально-відновлювальних процесів в сім'яниках, які мають місце при патозооспермії з екзогенних причин у ссавців. Найбільш близьким до заявлюваного засобу є засіб для профілактики і лікування вільнорадикального пошкодження органів і тканин. В якості засобу пропонований 10% екстракт Ехінацеї пурпурової переважно з надземної частини трави в дозі 10 крапель витягу 3 рази на день. Термін застосування засобу не обмежений. Засіб забезпечує певну позитивну дію майже на усі органи і тканини з порушенням окислювальновідновлювальних процесів (Гу-нько В.Г., Дубинська Г.М., Почерняєва В.Ф., Дехтярев B.I. Патент №9481 А. Засіб для профілактики і лікування вільнорадикального пошкодження органів і тканин // Промисл. власність 1996 - №3 - с.31.72). Що стосується тканин сім'яників ссавців то ефективність антиоксидантних компонентів його при дії екзотоксикантів є недостатньою. Вона може бути значно покращена в результаті корекції певних чинників. Одним з них є недостатність БАР в пропонованому об'ємі екстракту Ехінацеї на добу без урахування маси тіла ссавців. Цю кількість можна забезпечити тільки підвищенням концентрації екстракту, тому що загальний об'єм засобу для введення в шлунок, наприклад дрібних лабораторних тварин (щурів, мишей), часто збільшити неможливо, а також виготовленням екстракту переважно з коренів рослини, де флавоноїдів значно більше. Другим чинником недостатньої дії препарату є невизначеність терміну його вживання в залежності від тривалості дії пошкоджуючих екзотоксикантів, терміну можливої їх кумуляції в тканинах сім'яників та терміну циклу сперматогенезу у конкретних видів ссавців. Відомо, що сперматозоїди ссавців від початку до повного розвитку і дозрівання потребують тривалого часу, зокрема для щурів цей період становить 46, а для чоловіків 48 днів. Рання відміна засобу не запобігає порушень сперматогенезу. Ще одним чинником недостатньої ефективності дії засобу на сім'яники є дефіцит гонадотропних вітамінів у їжі ссавців під час дії екзотоксикантів. Відомо, що для нормального сперматогенезу потрібні досить високі дози вітамінів групи А (ретинолів), групи Д (кальциферолів), групи Е (токоферолів), які є жиророзчинними і не містяться в водноетаноловий витягах ехінацеї пурпурової, а також вітаміну С у формі аскорбату натрію. В основу винаходу поставлено завдання створити засіб для біологічної профілактики та лікування патозооспермії з екзогенних причин у дорослих ссавців, який дозволить покращити результати, а саме запобігти виникненню патозооспермії або вилікувати її. Поставлене завдання досягається створенням засобу для біологічної профілактики та лікування патозооспермії з екзогенної причини удорослих ссавців, що включає водно-етаноловий екстракт Ехінацеї пурпурової, який, згідно винаходу відрізняється тим, що екстракт готується переважно з коренів рослини, має не 10%, а 20% концентрацію і додатково містить гонадотропні вітаміни - токофероли, ретиноли, кальцифероли і аскорбінову кислоту при наступних співвідношеннях компонентів, в мас. %: Екстракт Ехінацеї пурпурової 85,0-8 7,0мл 20% Масляний розчин ретинол 2,0мл ацетату 8,6% (500000МО) Масляний розчин 2,0мл ерго(холе)кальциферолу 0,5% (400000МО) Масляний розчин токоферолу 10,0мл (0,9ацетату 10% 1,0г) Аскорбінова кислота 1,0г Засіб виготовляють наступним чином. Він містить дві складові частини. Для виготовлення першої складової частини беруть водно-метаноловий 20% екстракт Ехінацеї пурпурової густий 85,0мл. В ньому послідовно розчиняють 0,477г гідрокарбонату натрію та 1,0г аскорбінової кислоти, таким чином переводять останню в аскорбат натрію. Для виготовлення другої частини беруть офіцинальний масляний розчин токоферолу ацетату 10%-10,0мл. В нього послідовно додають і розмішують масляний розчин ретинолу ацетату 8,6%-2,0мл (500000МО), та масляний розчин ергокальциферолу 0,5%-2,0мл (400000МО). Засіб вживають слідуючим чином. У дорослих ссавців, наприклад щурів з середньою масою 250,0г, з дня початку дії екзотоксикантів (солей важких металів, хлорорганічних, карбаматних та інших сполук) в раціон тварин добавляють заявлений засіб - суміш першого і др угого компонентів. Кількість засобу (суміші) на добу визначають таким чином, щоб забезпечити двохразову профілактичну дозу його компонентів із розрахунку на 1кг маси тіла, а саме екстракту Ехінацеї пурпурової густого 20% з аскорбатом - 3 краплі та розчину гонадотропних вітамінів - 1 краплю. Обоє складові засобу змішують і тваринам вводять внутрішньошлунково по 1 краплі суміші шприцом із спеціальною голкою, людині дають випити. Засіб призначають щоденно протягом дії екзотоксикантів, тобто терміну надходження та кумуляції його в м'яких тканинах ссавців, та ще 46-48 днів після закінчення їх дії, на період росту і дозрівання сперматозоїдів у конкретного вида ссавців. Приклади конкретного використання засобу. 1. Першій групі дорослих щурів-самців (10) проводили затравку ацетатом свинцю (РbСО3) на протязі 6 днів із розрахунку 250мг/кг маси тіла тварин. З дня затравки щоденно призначали заявлений засіб із розрахунку 3 та 1 краплі обох його компонентів, відповідно 4 краплі суміші на 1кг маси тварин. Для щурів масою 250г, це склало 1 краплю суміші. Засіб вводили щурам безпосередньо в шлунок шприцом із спеціальним зондом, протягом введення екзотоксиканту (6 днів), дії його в результаті кумуляції (30 днів) та періоду визрівання сперматозоїдів 46 днів, всього 82 дні. Після запліднення кожним самцем двох самок, щурів-самців виводили із експерименту і досліджували морфологічні, функціональні та інші показники стану сперматозоїдів. Самок виводили із експерименту через 14 днів після запліднення. У них в матці підраховували кількість запліднень, питому вагу живих і мертвих ембріонів, в гонадах кількість жовтих тіл та інші показники. Щурам-самцям контрольної групи проводили аналогічну затравку ацетатом-свинцю, призначали водноетаноловий 10% екстракт Єхінацеї пурпурової із розрахунку 4 краплі засобу на 1кг маси. Подальші дії із щурами аналогічні експериментальної групі. Отримані дані наведені в таблицях 1,2. Із аналізу показників можна зробити висновок, що доза 4 краплі (200мг) на 1кг маси не досить повно забезпечує протективну дію засобу. 2. Другій групі щурів-самців (10) з токсичним впливом ацетату свинцю за тих же умов призначали заявлений засіб із розрахунку 8 крапель (6+2) суміші його компонентів (400мг) на 1кг маси тіла. Для кожного щура це складало 2 краплі. Тривалість введення засобу, виведення щурів-самців і самок із експерименту були аналогічними першій групі. Контрольна група була загальною для усіх груп с затравкою свинцем. Отримані дані вивчаємих показників наведені в таблицях 1, 2. Із аналізу показників видно, що доза засобу 8 крапель (400мг) на 1 кг маси досить повно забезпечує протективну дію засобу, попереджує патозооспермію. 3. Третій групі щурів-самців (10) з аналогічною дією ацетату свинцю призначали заявлений засіб із розрахунку 16 крапель суміші обох його компонентів (800мг) на 1кг маси тіла. Для кожного щура це складало 4 краплі. Тривалість введення засобу, виведення щурів-самців і самок із експерименту були аналогічними першій групі. Отримані дані наведені в таблицях 1,2. Із аналізу показників видно, що доза засобу 16 крапель (800мг) на 1кг маси тіла не має переваг перед дозою 8 крапель на 1 кг маси. Статично достовірної різниці цих показників другої та третьої груп щурів не виявлено. Тому оптимальною мінімальною дозою засобу є доза 8 крапель на 1кг маси. 4. Четвертій гр упі щурів-самців (10) проводили затравку новим гербіцидом діхлорпіредінкарболовою кислотою (клопиралідом, СбН3Сl2NO2) внутрішньоплевральним введенням протягом 6 днів із розрахунку 300 мг/кг маси. З дня затравки щоденно призначали заявлений засіб, із розрахунку по 4 (3+1) краплі обох його компонентів на 1кг маси тварин. Для щурів масою до 250г це склало 1 краплю суміші обох компонентів. Засіб вводили в шлунок шприцом і спеціальним зондом протягом введення екзотоксиканту (6 днів), періоду росту та визрівання сперматозоїдів, всього 52 дні. Кумуляції гербіциду не визначено. Інші умови експерименту були аналогічними 1-3 групам. Щурам-самцям контрольної групи проводили аналогічну затравку клопіралідом, призначали водно-етаноловий 10% екстракт Єхінацеї пурпурової із розрахунку 4 краплі/кг маси на добу. Подальші дії зі щурами контрольної групи були аналогічними експериментальним групам. Отримані дані наведені в таблицях 3,4. Із аналізу показників видно, що доза 4 краплі на 1кг маси (200мг) не досить повністю забезпечує протективну дію заявленого засобу. 5. П'ятій групі щурів-самців (10) з такою ж дією клопіраліду заявлений засіб призначали із розрахунку по 8 (6+2) крапель його компонентів на 1кг маси тіла. Для кожного щура це складало 2 краплі суміші заявленого засобу. Інші умови були аналогічними 1-3 групам. Показники стану сперматозоїдів та їх функціональної повноцінності наведені в таблицях 3,4. Із аналізу показників видно, що доза засобу 2 краплі на 1кг маси на тварину (400мг) досить повно забезпечує протективну дію заявленого засобу. 6. Шостій групі щурів-самців (10) з аналогічною дією клопіраліду заявлений засіб призначали із розрахунку по 16 (12+4) крапель обох його складових на 1кг маси тіла. Для кожного щура це склало 4 краплі суміші. Інші умови були аналогічними 1-3 групам. Показники стану сперматозоїдів та їх функціональної повноцінності наведені в таблицях 3,4. Із аналізу показників можна зробити висновок, що доза 16 крапель засобу на 1 кг маси не має переваг перед дозою 8 крапель. Статистичної достовірної різниці цих показників п'ятої та шостої груп не виявлено (р