Спосіб експериментального моделювання простатичної інтраепітеліальної неоплазії передміхурової залози

Спосіб експериментального моделювання простатичної інтраепітеліальної неоплазії передміхурової залози шляхом використання естрогенів та андрогенів, який відрізняється тим, що досліджуваній тварині у бокову ділянку спини підшкірно вводять нестероїдний естрогенний препарат синестрол у дозі 5мг разово на тиждень, протягом 3-3,5 місяців, після чого у протилежну ділянку спини щура вводять разово андроген тестостерону пропіонату у дозі 20мг на тиждень, курсом 2-2,5 місяці, потім повторюють введення синестролу за тією самою методикою курсом 1-1,5 місяці, після чого також повторюють введення тестостерону пропіонату за вказаним режимом протягом 2-2,5 місяців. (19) (21) a200600009 (22) 15.02.2006 (24) 27.10.2008 (46) 27.10.2008, Бюл.№ 20, 2008 р. (72) КРАСИЛЮК ЛЕОНІД ІВАНОВИЧ, UA, КОСТЄВ ФЕДІР ІВАНОВИЧ, UA (73) ОДЕСЬКИЙ ДЕРЖАВНИЙ МЕДИЧНИЙ УНІВЕРСИТЕТ, UA (56) Романенко A.M., Забарко Л.Б., Непомнящий В.М. Доброякісна гіперплазія передміхурової залози, передрак та рак передміхурової залози, сучасні гістологічні класифікації та імуногістохімічні характеристики // Урологія. - 2002. - №4. - С.5-10. Christov R.T., Moon P.C., Lantvit D.D. et al. 9-usRetinoic Acid but Not 4-(Hydroxyphenil) retinamide inhibits Prostate Intraepithelial Neoplasia in Noble Rats. // Cancer Res. - 2002. - V.62. - P.5178-5182. 3 84426 місячного віку лінії Вістар, яких тримали за звичайних умов: 12-годинна зміна світла та темряви, їх годування стандартною дієтою, забезпечення вільного доступу до їжі та води. Всі роботи з лабораторними тваринами проводили із дотриманням правил, що передбачені Європейською комісією з нагляду за проведенням лабораторних досліджень. Щурам щотижня на протязі перших трьох місяців уводили у бокову ділянку спіни підшкірно синестрол у дозі 5мг, після чого у протилежну ділянку спіни щурів уводили підшкірно один раз на тиждень тестостерон пропіонат у дозі 20мг на тиждень на протязі двох місяців, а потім знову - у дозі 5мг на тиждень уводили синестрол, а на восьмий-дев'ятий місяці моделювання - посторно уводили тестостерон пропіонат - 20мг на тиждень. Щомісячно частину щурів виводили з досвіду шляхом декапітації. В паравезикульній ділянці розтинали шкіру до 2-2,5см, м'язи розсовували. Гострим шляхом виділяли передміхурову залозу із сем'яника пухирцями єдиним блоком. Для морфологічних досліджень брали частки передміхурової залози і готували постійні гістологічні препарати. Гістологічні зміни передміхурової залози (Фіг.1) після трьох місяців, моделювання визначалися тим, що залоза була стр уктурована, дещо, потовщена за рахунок збільшення маси гладком'я зових клітин. Епітеліальна висилка залози має розтягнутий вигляд внаслідок великої кількості секрету. Епітелій розташованій на lamina propria, утвореній сполучною тканиною, яка пронизана великою кількістю перезаповнених кров'ю капілярів. Ядро епітеліальних клітин розташовано центрально з деяким зсувом в базальну сторону, має окружно-овальну форму і містить ядерця дрібні, базофільні і розташовані центрально. Гістологічно після 4-5 місяців моделювання (Фіг.2) спостерігалось збільшення розмірів простатичних залоз. Епітелій високий циліндричний, цитоплазма забарвлюється базофільно. Ядра овально-круглої форми, розташовані базально, визначається слабко виразний поліморфізм ядер, зі збільшенням деяких розмірів у два рази. Ядерця дрібні, одиночні, базофільні, розміщуються центрально, хроматин дрібнодисперсний. Стромальні елементи слабко інфільтровані лейкоцитами, з помірним набряком. Міоепілелій розташований в один шар з паличковидними ядрами, що розміщені паралельно базальній мембрані. Ці ознаки характерні для простатичної інтраепітеліальної неоплазії низького ступеню. Інші гістологічні зміни визначилися після 6 місяців експерименту (Фіг.3). У і просвіті простатичних залоз виявлялась білкова рідина з домішкою поодиноких еритроцитів і білкових флокулятів. В усіх залозах містяться у різних кількостях істинні сосочки, а окремі з них мають підвищену їх кількість. Епітелій високий, циліндричний. Цитоплазма забарвлюється еозинофільно. Ядра округло-овальної форми з переважанням округлих, у деякій частині клітин ядра орієнтовані паралельно базальній мембрані. Визначається слабко виразний поліморфізм ядер зі збільшенням розмірів. 4 Ядерця дрібні, поодинокі, базофільні, хроматин дрібнодисперсний. Відзначається осередкова гіперплазія епітелію деяких залоз у вигляді бляшок з появою дво- і трьох рядності. Міоепітеліальні клітини розміщуються в один шар, містять паличкодрібні ядра, які розміщуються паралельно базальній мембрані. Ці зміни є ознакою наявності простатичної епітеліальної неоплазії низькогота високого ступеня. Гістологічно після 8 місяців моделювання (Фіг.4) у передміхурови х залозах щурів визначались зміни, які є характерними для простатичної інтраепітеліальної неоплазії високого ступеню: частина передміхурових залоз була кістозно розширена. Виявляються несправжні сосочки, які утворені циліндричним епітелієм з розташованими ядрами на різних рівнях у 5-6 рядів. Ядра помірно гіперхромні, овальні, розміщені перпендикулярно базальній мембрані, відзначається виразний поліморфізм їх форми. Поза сосочками епітелій залоз високий циліндричний з округлими овальними ядрами, співвідношенням цитоплазми до ядра 2:1. В окремих залозах з вакуолями поблизу апікального краю клітини міоепітелію розміщуються в один шар, містять паличковидні ядра, які розташовані паралельно базальній мембрані. Окрім цього, у зонах зливання несправжніх сосочків відзначалась гіперплазія, місцями з утворенням аркадоподібних структур. У порівнянні з прототипом, запропонований спосіб надає можливість відтворення моделі простатичної інтраепітеліальної неоплазії передракового стану передміхурової залози, яка відображає патогенетичні зміни передміхурової залози [5], індуцировані зміною гормонального баланса організму щурів, не передбачає оперативного втручання у щурів, що надає можливість участі таких тварин у тривалих лабораторних дослідженнях, значно зменшує їхню летальність внаслідок лише створення самої моделі. Методика не передбачає використання дефіцитних або дорого коштовних речовин, що також є позитивних ефектом. Література: 1. Возианов А.Ф., резников А.Г., Клименко И.А. Эндокринная терапия рака предстательной железы. - К.: Наукова думка, 1999. - 280с. 2. Романенко A.M., Забарко Л.Б., Непомнящий В.М. Доброякісна гіперплазія передміхурової залози, передрак та рак передміхурової залози, сучасні гістологічні класифікації та імуногістохімічні характеристики // Урологія. - 2002. - №4. - С.5-10. 3. Bostwick D.E., Montironi R, Sestorhenn LA. Diagnosis of prostate intraepithelial neoplasia: Prostate Working Group / consensus report // Scand. J. Urol. Nephrol. Suppl. - 2000. - P.3-10. 4. Littrup PJ. Imaging and prostatic cancer chemoprevention:^ Current diagnosis and future directions // Urology. - 2001. Apr; 57 (4 Suppl 1): 121123. 5. Christov R.T., Moon P.C., Lantvit D.D. et al. 9us-Retinoic Acid but Not 4-(Hydroxyphenil) retinamide inhibits Prostate Intraepithelial Neoplasia in Noble Rats. // CancerRes.-2002.- V.62. -P.5178-5182. 5 Комп’ютерна в ерстка В. Клюкін 84426 6 Підписне Тираж 28 прим. Міністерство осв іт и і науки України Держав ний департамент інтелектуальної в ласності, вул. Урицького, 45, м. Київ , МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислов ої в ласності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601