Дезінфікуючий засіб на основі полігуанідинів, способи його одержання та використання

1. Дезінфікуючий агент, що є водорозчинним похідним гуанідину загальної формули (1): C2 2 (19) 1 3 84593 4 нтриамінопентаоцтової кислоти, фосфонових кислот, переважно нітрилотриметиленфосфонової кислоти, гідрооксіетилідендифосфонової кислоти, етилендіамінтетраметиленфосфонової кислоти або їх сумішей в кількості, що складає 0-25,0 мас. %. 8. Дезінфікуючий засіб за п. 3, який відрізняється тим, що як сіль неорганічної кислоти містить водорозчинні солі цинку, міді, алюмінію, срібла, олова або їх суміші в кількості, що складає 0-5,0 мас. %. 9. Дезінфікуючий засіб за п. 3, який відрізняється тим, що містить ароматизатор в кількості, що складає 0-2,5 мас. %. 10. Дезінфікуючий засіб за п. 3, який відрізняється тим, що містить барвник в кількості, що складає 0-0,5 мас. %. 11. Дезінфікуючий засіб за будь-яким з пп. 3-10, який відрізняється тим, що має широкий спектр біоцидної активності та відсутність звикання. 12. Дезінфікуючий засіб за будь-яким з пп. 3-10, який відрізняється тим, що має пролонговану дезінфікуючу дію, яка складає від 3 до 365 діб після одноразової дезінфікуючої обробки в залежності від природи і характеру об’єкта дезінфекції та механічного та хімічного впливу на продезінфіковану поверхню. 13. Дезінфікуючий засіб за будь-яким з пп. 3-10, який відрізняється тим, що спектр мікроорганізмів, по відношенню до яких відсутнє звикання, принаймні включає грамнегативні та грампозитивні бактерії, бацили, кандиди, аспергіли та актиноміцети. 14. Дезінфікуючий засіб за п. 3, який відрізняється тим, що спектр мікроорганізмів, по відношенню до яких відсутнє звикання, принаймні включає мік роорганізми, вибрані з Echerichia coli, Salmonella typhimurium, Shigella sonne, Staphylococcus aureus 209, Staphylococcus albus, Streptococcus pyogenus - тип 1, Streptococcus pyogenus - тип 2, Streptococcus pyogenus - тип 3, Bacillus cereus, Bacillus micoides, Bacillus antracis, Bacillus subtilis, Bacillus mesentericus, Corinebacterium diphteriae PV-8, Corinebacterium diphteriae (токс), Actinomyces olivaceus, Aspergillus niger, Candida tropicalis, Candida krusei або Candida albicans. 15. Спосіб одержання дезінфікуючого засобу за п. 3, що включає розчинення компонентів засобу в розчиннику і отримання проміжних розчинів та їх змішування, при цьому полігуанідин заливають частиною необхідної кількості розчинника, забезпечують стадію його набрякання протягом 5-12год. при кімнатній температурі, потім додають решту розчинника і перемішують протягом 0,1-1,0год. до утворення гомогенного розчину, а допоміжні речовини розчиняють кожну окремо, а потім їх розчини по черзі вводять у розчин полігуанідину з одночасним перемішуванням до повного розчинення компонентів без розшарування. 16. Спосіб за п. 15, який відрізняється тим, що допоміжні речовини по черзі вводять безпосередньо в розчин полігуанідину і розчиняють при температурі 20-80°С з одночасним перемішуванням до повного розчинення компонентів без розшарування. 17. Застосування засобу за будь-яким з пп. 3-14 для періодичної дезінфікуючої обробки об’єктів, які цього потребують, шля хом протирання, занурення, зрошення або розпилення. Винахід відноситься до дезінфікуючих засобів і може бути використаний в різних сферах, переважно в медицині, ветеринарії, харчовій промисловості, при створенні асортименту вітчизняних конкурентноздатних дезінфікуючих та антисептичних засобів, в тому числі для боротьби з внутрішньо лікарняними інфекціями (далі по тексту - ВЛІ) в медицині, для антимікробного захисту продуктів харчування в харчовій промисловості та побуті, в різних областях промисловості для попередження утворення пліснявих грибів та інши х небажаних мікроорганізмів на стінах та інших елементах будівельних конструкцій, обладнанні, реманенті, спецодязі і т.д., як антимікробні добавки в фарби, лаки, водноемульсійні композиції та для інших подібних цілей. Оскільки інфекційні хвороби залишаються однією з найчастіших причин високої захворюваності та смертності населення, тому найважливішим застосуванням дезінфікуючих засобів є їх використання для забезпечення знищення збудників інфекційних захворювань, їх переносників та природних резервуарів інфекцій. Дезінфекцію використовують з метою розриву шляхів передачі інфекції від джерела інфекції до людей. Вона полягає в обробці дезінфікуючими засобами об'єктів оточуючого людину середовища: інвентарю, інструментів, обладнання, приміщень, повітря, водоймищ тощо, - для знищення збудників інфекційних хвороб. Відомі дезінфікуючі засоби, що вміщують як активно діючі речовини (далі по тексту -АДР) хлор, сполуки хлору, альдегіди та перекис водню - див., наприклад. Дезинфекционные средства. Под редакцией: Иванова С.И. и Шандалы М.Г. Часть 1. Справочник в двух томах. Выпуск 3-й. Том 1, М., 2001 [1]. Відомі дезінфікуючі засоби широко розповсюджені і до теперішнього часу продовжують залишатися найбільш вживаними. Проте, вони активні лише у високих концентраціях і при великих експозиціях. Це робить їх небезпечними як для медичного персоналу, так і для пацієнтів, тому що вони токсичні, екологічно небезпечні та нестійкі в часі. Крім того, традиційні хлорвмісні дезінфікуючі засоби викликають корозію обладнання, що контактує з ними, відрізняються обмеженим терміном дії, створюють значний ризик для здоров'я людей і навколишнього середовища. 5 84593 В останні роки на ринку з'явилися нові дезінфікуючі засоби різного призначення. Однак, вони також, в основному, є токсичними для людей та екологічно небезпечними. Ефект їх тривалої, пролонгованої дезінфікуючої дії недостатній, а їх доступність для широкого застосування в лікувальнопрофілактичних установах лімітований відносно високою ціною, -див., наприклад, М.Г. Шандала. Состояние и перспективы разработки новых дезинфектологических технологий. - В ж. "Эпидемиология и инфекционные болезни", 2000, №2, с. 4 -7 [2]. Це викликає необхідність створення нових, високоефективних, стійких у часі, екологічно безпечних, малотоксичних і в той же час порівняно недорогих засобів дезінфекції. На сучасному етапі розвитку дезинфектології до споживчих властивостей дезінфікуючих засобів пред'являють наступні основні вимоги: 1) активність по відношенню до широкого спектру мікроорганізмів; 2) збереження активності діючих речовин дезінфікуючого засобу протягом часу, необхідного для забезпечення повноти процесу дезінфекції (деконтамінації); 3) повільне формування резистентних варіантів мікроорганізмів, а, по можливості, взагалі їх відсутність; 4) безпека для медичного персоналу і хворих; 5) екологічна безпека; 6) збереження активності в широкому діапазоні температур; 7) розчинність у воді; 8) відсутність пошкоджуючого впливу на матеріал об'єктів, що підлягають дезінфікуючим (деконтамінаційним) обробкам; 9) стабільність при збереженні і транспортуванні; 10) відсутність негативних фізико-хімічних властивостей, таких як пожежо- і вибухонебезпечність, наявність різкого запаху; 11) оптимальне співвідношення таких ознак, як "ефективність - видаткова норма -ціна" - див., наприклад: Ґудзь О. В. Тенденції развитку дезінфектології в Україні. - В ж. "Провізор", 1998, №12 - [3]; - В.П.Никольская, 0.Б.Пудова, В.В.Буянов, К.В.Титова, И.П.С упрун. Проблемы дезинфекции и деконтаминации в системе биологической защиты и профилактики инфекционных заболеваний. - В ж. "Вестник Российской академии медицинских наук", 2000, №1, С. 3-6 - [4]. Крім того, однією з вимог до сучасних дезінфікуючих засобів є пролонгованість його дезінфікуючої дії після обробки ним об'єктів дезінфекції. На сьогодні відомі дезінфікуючі засоби з широким спектром антимікробної активності, у яких активно діючими речовинами є хлорвмісні сполуки, альдегіди, четвертинні амонієві сполуки (ЧАС) див., наприклад, Дезинфекционные средства. Справочник, ч. 1. Под редакцией А. А. Монисова, М.Г. Шандалы. - М.: ТОО «Paporz», 1996, 176 с. [5]. Вказані відомі дезінфікуючі засоби мають широкий спектр антимікробної активності, практично 6 всі вони розчинні у воді, деякі з них стабільні при зберіганні і транспортуванні, зберігають активність у широкому діапазоні температур. Проте, відомі дезінфікуючі засоби не забезпечують можливості адекватної неспецифічної профілактики ВЛІ. Це зв'язано з формуванням варіантів мікроорганізмів, стійких, тобто резистентних, до відомих дезінфікуючих засобів. Здатність виробляти стійкість до відомих дезінфікуючих засобів призвела до відмови від використання в лікувальнопрофілактичних установах хлорвмісних препаратів і переходу на інші групи дезінфікуючих засобів див., наприклад, В.В. Шкарин. Эволюция эпидемиологии. Что впереди? - В ж. "Эпидемиология и инфекционные болезни", 2001, №4, с. 7-10 [6]. Однак використання дезінфікуючих засобів різних хімічних груп, у свою чергу, викликало появу мультирезистентних мікроорганізмів, тобто мікроорганізмів, що мають резистентність до дезінфікуючих засобів різних хімічних гр уп. При цьому у зв'язку з наявністю горизонтального переносу генів з'являється мультирезистентність в інших видах і групах мікроорганізмів. Набуття стійкості патогенних мікрорганізмів до дезінфікуючих засобів має суттєве значення тому, що при його появі дезінфікуючі засоби стають неефективними. Це призводить до неможливості взагалі використовувати відомі дезинфіційні засоби або ж до можливості їх використання, але в таких концентраціях, що суттєво (в десятки разів) перевищують мінімальну бактерицидну концентрацію (далі по тексту - МБК). Зрозуміло, що це не є ефективним з економічної точки зору і в той же час є значною загрозою для людей, тому що вказані відомі дезінфікуючі засоби є небезпечними для здоров'я населення речовинами. Поява, розвиток і розповсюдження в установах охорони здоров'я варіантів мікроорганізмів, резистентних до відомих дезінфікуючих засобів, є одним з основних факторів, що породжують глобальну проблему сучасної медицини - проблему ВЛІ, що є однією з найбільш актуальних і важко розв'язуваних проблем не тільки для України, але й для усього світу. Її значимість, з одного боку, визначена широким поширенням ВЛІ в медичних установах різного профілю, а з іншого боку - дуже значними збитками від цих захворювань здоров'ю населення. Так, нашаровуючись на основне захворювання, ВЛІ ведуть до подовження термінів лікування, хромізації процесу лікування, а в найбільш тяжких випадках - до смерті хворого. Наприклад, від ВЛІ в Україні гине приблизно 3% хворих див. Н.С.Морозова. Дезинфектологические аспекты в проблеме внутрибольничных инфекций - В ж. "Вестник ассоциации дезинфекционистов Украины", №6, 2002, с. 4 [7]. Коли ВЛІ приєднуються до основного захворювання, вони збільшують тривалість перебування пацієнта в стаціонарі в середньому на 5 -10 днів. При цьому ВЛІ різко знижують ефективність лікування основної хвороби, підвищують летальність. У цілому ВЛІ наносять істотний соціальний і економічний збиток, що у перерахуванні на рік, складає, наприклад, в Росії 3млрд. руб., а в США 7 84593 4,5млрд. долл. - див. Е.П. Ковалева, Н.А. Семина. Внутрибольничные инфекции как отражение уровня и структуры инфекционной заболеваемости населения России. П Всероссийская научнопрактическая конференция с международным участием: Тез. докл. - М., 1999, с. 115-116 [8]. Отже, для того, щоб з упинити загрозливий розвиток резистентності необхідні високоефективні дезінфікуючі засоби широкого спектру дії, стосовно до яких не буде розвиватися звикання мікроорганізмів і які здатні розірвати ланцюг передачі інфекції і тим самим це буде сприяти запобіганню подальшого загрозливого розвитку резистентності. Крім того, ефект від обробки поверхонь відомими засобами має короткочасну дію. В результаті цього після дезінфікуючої обробки поверхня через короткий проміжок часу (від декількох хвилин до декількох годин) знову виявляється засіяною, тобто контамінованою, мікроорганізмами, тому що відомі дезінфікуючі засоби не мають тривалої, тобто пролонгованої, дезінфікуючої дії. В зв'язку з цим обробка відомими дезінфікуючими засобами повинна проводитися щодня, а то й два рази на день, а в пологових блоках лікарень і в операційних блоках - після кожного пацієнта. До того ж, зазначені відомі дезінфікуючі засоби мають неприємний запах, пошкоджують матеріали об'єктів, що піддають дезінфікуючим, тобто деконтамінаційним, обробкам, і активні лише у високих концентраціях та при значних експозиціях. Останнє робить їх небезпечними як для медичного персоналу, так і для пацієнтів, тому що вони токсичні, екологічно небезпечні. Це створює значний ризик для здоров'я людей і навколишнього середовища. До того ж, дезінфікуючі засоби, що як АДР містять окислювачі (хлорвмісні речовини, тощо), викликають корозію контактуючого з ними устаткування і внаслідок цього мають обмежений термін дії. Таким чином, виникло діалектичне протиріччя: з одного боку, є великий арсенал відомих дезінфікуючих засобів з широким спектром антимікробної активності, з іншого - реального прогресу в забезпеченні адекватної неспецифічної профілактики ВЛІ на практиці нема. Вирішення цього протиріччя не може бути забезпечено використанням відомих людству те хнічних засобів, тому що їх використання призводить до формування стійких варіантів мікроорганізмів, тобто до розвитку резистентності мікроорганізмів до відомих дезінфікуючих засобів. На вирішення саме цього протиріччя скерована група винаходів, що ми заявляємо. Крім того, відомі дезінфікуючі засоби не мають тривалої, тобто пролонгованої, дезінфікуючої дії, що дозволило б проводити дезінфікуючу обробку об'єктів один раз на декілька днів чи тижнів. Так, відомий дезінфікуючий засіб на основі полігуанідину або ж суміші полігуанідинів, що має біоцидну активність. Див., наприклад, П.А.Гембицкий и др. Сополимер солей алкиленгуанидина в качестве биоцидного флокулянта. - В авт. св. № RU-1728256 Ai, 27.12.1988 - [9] Відомий дезінфікуючий засіб у вигляді сополімера солей алкиленгуанідину може бути викорис 8 таний в медицині та ветеринарії, для обробки стічних вод, а також всюди, де потрібні дезінфікуючі засоби. Проте, він не має широкого спектру біоцидної активності, подовженої, тобто пролонгованої, дезінфікуючої дії після одноразової дезінфікуючої обробки об'єкта дезінфекції та не забезпечує відсутності привикання - резистентності щодо широкого спектру мікроорганізмів різних родів та видів. Тому він не є дезінфікуючим засобом широкого спектру мікробіологічної дії та універсального призначення, не може бути використаним для забезпечення біобезпеки як у повсякденному житті, так і в епідемічних ситуаціях, а також не забезпечує надійного переривання ланцюга передавання інфекцій і ефективної боротьби з ВЛІ. Відомий також дезінфікуючий засіб на основі полігуанідину, що має біоцидну активність. - Див., наприклад, П.А.Гембицкий и др. Антисептическое средство для желатинных систем при изготовлении галогенсеребрянных фотографических материалов. - В патенті РФ №RU-2006053 від 09.01.92 [10]. Відомий дезінфікуючий засіб забезпечує порівняно більш ефективний антисептичний захист желатинних систем та поліпшує екологічні умови виробництва. Проте, він також не має широкого спектру біоцидної активності, подовженої, тобто пролонгованої, дезінфікуючої дії після одноразової дезінфікуючої обробки об'єкта дезінфекції та не забезпечує відсутності привикання - резистентності щодо широкого спектру мікроорганізмів різних родів та видів. Тому він не є дезінфікуючим засобом широкого спектру мікробіологічної дії та універсального призначення, не може бути використаний для забезпечення біобезпеки як у повсякденному житті, так і в епідемічних ситуаціях, а також не забезпечує надійного переривання ланцюга передачі інфекцій і ефективної боротьби з ВЛІ. За своєю технічною суттю та досягнутими результатами найбільш близьким до заявленого є дезінфікуючий засіб на основі полігуанідину або ж суміші полігуанідинів, що має біоцидну активність. - Див., наприклад, В.А.Лопырев и др. Применение солей полигекса-метиленгуанидина в качестве препаратов, обладающих антимикробной активностью по отношению к анаэробной и смешанной инфекции. - В патенті РФ №RU-2143905 Сі, від 27.12.1988.-Прототип-1- [11]. Згідно до винаходу, вказаний відомий дезінфікуючий засіб, який був прийнятий за прототип, має антимікробну активність відносно широкого круга анаеробних та змішаних інфекцій. Але його дезінфікуюча дія порівняно недостатня. Крім того, він не має подовженої, тобто пролонгованої, дезінфікуючої дії після одноразової дезінфікуючої обробки об'єкта дезінфекції та не забезпечує відсутності привикання - резистентності щодо широкого спектру мікроорганізмів різних родів та видів. Тому він не є дезінфікуючим засобом широкого спектру мікробіологічної дії та універсального призначення, не може бути використаним для забезпечення біобезпеки як у повсякденному житті, так і в епідемічних ситуаціях, а також не забезпечує надійного 9 84593 переривання ланцюга передачі інфекцій і ефективної боротьби з ВЛІ. Відомий також дезінфікуючий засіб у вигляді композиції, який вміщує активно діючу речовину (АДР) та розчинник, що відрізняється тим, що як діючу речовину він містить гідрофобний полігуанідин, а як розчинник - воду, при наступному співвідношенні компонентів, мас. %: - Гідрофобний полігуанідин - 0,5-1,0; - Вода або фізіологічнийрозчин - решта до 100, див., наприклад, И.Ж.Лулле и др.- Медицинскии препарат противоопухолевого действия. - В міжнародній заявці PCT/SU82/00020 від 21 червня 1982 р. (міжнародна публікація WO 84/00105 від 19.01.84) - [12]. Відомий засіб призначений для лікування онкозахворювань кишково-шлункового тракту, молочної залози і також для обробки ран після радикальної операції. Проте, він не має широкого спектру біоцидної активності, подовженої, тобто пролонгованої, дезінфікуючої дії після одноразової дезінфікуючої обробки об'єкта дезінфекції та не забезпечує відсутності привикання - резистентності щодо широкого спектру мікроорганізмів різних родів та видів. Тому він не є дезінфікуючим засобом широкого спектру мікробіологічної дії та універсального застосування, не може бути використаний для забезпечення біобезпеки як у повсякденному житті, так і в епідемічних ситуаціях, а також не забезпечує надійного переривання ланцюга передачі інфекцій і ефективної боротьби з ВЛІ. За своєю технічною суттю та досягнутими результатами найбільш близьким до заявленого є дезінфікуючий засіб у вигляді композиції, який вміщує активно діючу речовину (АДР) та розчинник, що відрізняється тим, що як діючу речовину він містить гідрофобний полігуанідин, а як розчинник - воду або фізіологічний розчин при наступному співвідношенні компонентів, мас. %: - Гідрофобний полігуанідин - 0,5- 1,0; - Вода або фізіологічний розчин - решта до 100, - Див., наприклад, П.А.Гембицкий и др. Дезинфицирующее средство при туберкулезе. - В патенті РФ № RU-2176523 С1, 10.09.1999.- Прототип-2 [13]. Цей засіб має порівняно вищі дезінфікуючі властивості і, згідно до винаходу, забезпечує надійність і швидкість дезінфекції при туберкульозі. Проте, він не має широкого спектру біоцидної активності, подовженої, тобто пролонгованої, дезінфікуючої дії після одноразової дезінфікуючої обробки об'єкта дезінфекції та не забезпечує відсутності привикання - резистентності щодо широкого спектру мікроорганізмів різних родів та видів. Тому він не є дезінфікуючим засобом широкого спектру мікробіологічної ДІЇ та універсального призначення, не може бути використаним для забезпечення біобезпеки як у повсякденному житті, так і в епідемічних ситуаціях, а також не забезпечує надійного переривання ланцюга передавання інфекцій і ефективної боротьби з ВЛІ. Відомим є спосіб одержання дезінфікуючого засобу у вигляді композиції, що включає розчи 10 нення компонентів та їх змішування. - Див., наприклад, П.А.Гембицкий и др. Дезинфицирующее средство при туберкулезе. - В патенті РФ № RU2176523 С1, 10.09.1999 [13]. Відомий спосіб достатньо простий у застосуванні, однак його використання призводить до утворення гетерогенного розчину полімерної частини компонентів (ПГМГ). В такому розчині макромолекули біоцидного полімеру знаходяться в нерівноважному конформаційному стані. Як результат, при використанні такого дезінфікуючого засобу, який одержаний відомим способом, не завжди забезпечується вільний доступ гуанідинових груп макромолекул до мікроорганізмів, тобто біодоступність гуанідинових гр уп розчиненого гуанідинового полімеру є низькою. Це обумовлює понижену мікробіологічну активність засобу, який одержано відомим способом. Відомий спосіб також не завжди забезпечує достатню гомогенність концентрату дезінфікуючого засобу, що призводить до його розшарування. Таким чином, відомий спосіб не забезпечує отримання дезінфікуючого засобу, що має: широкий спектр біоцидної активності, подовжену, тобто пролонговану, дезінфікуючу дію на протязі 6-365 діб після одноразової дезінфікуючої обробки об'єкта дезінфекції та відсутність привикання - резистентності щодо широкого спектру мікроорганізмів різних родів та видів, і може бути використаний як дезінфікуючий засіб широкого спектру мікробіологічної дії та універсального застосування для забезпечення біобезпеки як у повсякденному житті, так і в епідемічних ситуаціях, в тому числі, зокрема, для боротьби з проявами біотероризму чи військового застосування біологічної зброї, а також для надійного переривання ланцюга передавання інфекцій і ефективної боротьби з внутрішньолікарняними інфекціями. Найбільш близьким до заявленого способу одержання дезінфікуючого засобу у вигляді композиції на основі полігуанідину або ж суміші полігуанідинів за своєю технічною суттю та досягнутими результатами є відомий спосіб, що включає розчинення компонентів у розчиннику і їх змішування. - Див. наприклад, Светлов Д.А. и др. Композиция, обладающая биоцидным действием, и способ ее получения. - В патенті РФ № RU 2118175 С1, від 27.08.98. - Прототип - 3 [14]. Відомий спосіб також відносно простий, але він зберігає усі вище вказані недоліки і не забезпечує отримання композиції з необхідними якостями. Відомим є спосіб періодичної дезінфікуючої обробки предметів, в тому числі медичного призначення, що включає контактування дезінфікуючого засобу з предметом, його витримку на протязі часу і при температурі, що забезпечують дезінфекцію предмету, і наступний змив дезінфікуючого засобу з предмета. - Див., наприклад, Балалыкин Д.А. Дезинфицирующее средство и способ обработки предметов, в том числе медицинского назначения. - В патенті РФ № RU-2251435 С1, 10.05.2005. - [15]. Відомий спосіб достатньо простий і, згідно до винаходу, він забезпечує не порушення герметичності елементів та з'єднань гнучких і жорстких ен 11 84593 доскопів, спаяних та склеєних місць при дезінфекції. Але він потребує використання дезінфікуючого засобу, до складу якого входить глутаровий альдегід, який є високотоксичною сполукою. Тому відомий спосіб вимагає обов'язкового застосування засобів захисту шкіри та органів дихання і є небезпечним для людей. Найбільш близьким до заявленого є відомий спосіб використання дезінфікуючого засобу, що включає періодичну дезінфікуючу обробку об'єктів, в тому числі об'єктів медичного призначення, робочим розчином дезінфікуючого засобу переважно шляхом протирання, занурення, зрошення або розпилення, з наступною витримкою (експозицією) та змиванням засобу - див., наприклад, Зарицкий A.M. Дезінфектологія. - Житомир, ПП "РУТА", 2001, с. 47-48 -Прототип-4 [16]. Відомий спосіб забезпечує основні умови дезінфекції, однак потребує високої частоти використання дезінфікуючих засобів - обробку проводять щодня, а то й два рази на добу, а в пологових блоках лікарень і в операційних блоках - після кожного пацієнта. Відомий спосіб включає також операцію змивання з обробленої поверхні дезінфікуючого засобу, що робить його трудомістким. Зберігаються й усі інші вищевказані недоліки відомого способу використання дезінфікуючого засобу. В зв'язку з вищенаведеним виникла технічна задача, яка не може бути розв'язана відомими засобами і яка може бути вирішена тільки заявленою нами групою винаходів, а саме - задача створення і використання економічного, ефективного і в той же час екологічно безпечного дезінфікуючого засобу з тривалою, пролонгованою дезінфікуючою дією, по відношенню до якого не розвивається звикання - резистентність мікроорганізмів різних типів і видів і який має широкий спектр мікробіологічної дії та є дезінфікуючим засобом універсального призначення і може бути використаний для забезпечення біобезпеки як у повсякденному житті, так і в епідемічних ситуаціях, в тому числі, зокрема, для боротьби з проявами біотероризму чи військового застосування біологічної зброї, а також для надійного переривання ланцюга передачі інфекцій і ефективної боротьби з внутрішньолікарняними інфекціями. Вирішення поставленої задачі дозволяє одержати такий дезінфікуючий засіб, використання якого забезпечує не тільки швидку загибель мікроорганізмів, не викликає їхнього звикання до дії дезінфікуючого засобу, але ще й гарантує тривалий надійний антимікробний захист оброблюваної поверхні, тривалий час перешкоджаючи розмноженню мікроорганізмів після одноразового застосування засобу. Заявлений дезінфікуючий засіб нелеткий, не має запаху, добре розчиняється у воді, нетоксичний, біологічно розкладається, екологічно безпечний. Його зберігання та транспортування не вимагає особливих умов, а при його використанні непотрібні особливі засоби захисту шкіри та слизових оболонок. Завдяки цьому вирішення поставленої задачі дозволяє виконувати дезінфекцію в присутності хворих та персоналу. Крім того, вирішення поставленої задачі дозволяє 12 вирішити проблему надійної та тривалої дезінфекції, що сприяє вирішенню глобальної проблеми ВЛІ. Високу економічну ефективність заявленого дезінфікуючого засобу забезпечено, по-перше, за рахунок того, що дезінфікуючий засіб можна використовувати в концентрації, що дорівнює МБК, в той же час як для відомих дезінфікуючих засобів, в зв'язку з розвитком резистентності мікроорганізмів, практична дезінфектологія змушена рекомендувати для практичного застування робочих розчинів, концентрація яких значно перевищує МБК. Подруге, наявність тривалої, тобто пролонгованої, дії у заявленого дезінфікуючого засобу дозволяє проводити дезінфікуючу обробку значно рідше, ніж у випадку використання відомих дезінфікуючих засобів, а саме один раз на 6 ¸ 365 діб. По-третє, антимікробна активність заявленого дезінфікуючого засобу не залежить від мікробного навантаження і не знижується в присутності крові та інших органічних субстанцій, що у випадку з відомими дезінфікуючими засобами призводить до підвищених витрат робочих розчинів при проведенні дезінфекції об'єктів з високим мікробіологічним навантаженням, забруднених кров'ю та іншими виділеннями. Вирішення поставленої задачі дозволяє одержати дезінфікуючий засіб з широким спектром біоцидної дії, високою стабільністю та низькою токсичністю. Крім того, отриманий нами дезінфікуючий засіб не має шкірно-подразнюючої, шкірнорезорбтивної, ембріотоксичної, мутагенної та канцерогенної дії, кумулятивний ефект відсутній. Низька токсичність полігуанідинів для людини пояснюється тим, що в організмі теплокровних є ферментні системи, здатні викликати деградацію полімеру. Тому організм людини не накопичує полігуанідинів. Поставлену у винаході задачу вирішують тим, що для цього, у відповідності до винаходу, отримали і використовують дезінфікуючий засіб на основі полігуанідину або ж суміші полігуанідинів, що має: - широкий спектр біоцидної активності, - подовжену, тобто пролонговану, дезінфікуючу дію на протязі 3 ¸ 365 діб після одноразової дезінфікуючої обробки об'єкта дезінфекції та - відсутність привикання - резистентності щодо широкого спектру мікроорганізмів різних родів та видів, - і який використовують як дезінфікуючий засіб широкого спектру мікробіологічної дії та універсального призначення для забезпечення біобезпеки як у повсякденному житті, так і в епідемічних ситуаціях, в тому числі, зокрема, для боротьби з проявами біотероризму чи військового застосування біологічної зброї, а також для надійного переривання ланцюга передавання інфекцій і ефективної боротьби з внутрішньо-лікарняними інфекціями. Поставлену у винаході задачу вирішують і тим, що як полігуанідин заявлений дезінфікуючий засіб містить поліалкіленгуанідин загальної формули: 13 84593 [(CH2)m - HN - C - NH-]n (1) . NH HX де: m = 6,10,12; n = 5 ¸ 50; X = СІ-, ОН-, аніон мінеральної або органічної кислоти. Поставлена у винаході задача вирішена і тим, що як полігуанідин заявлений дезінфікуючий засіб містить поліалкіленгуанідин загальної формули: [-R1 - O - R2 - -R3 -NH-C-NH -] y (2) . NH HX де: у = 5 ¸ 50; R1 = (CH2)2; (СН2)3; R2 = (СН2)2; (СН2)4; R3 = (СН2)2; (СН2)3; (СН2)2-O-(СН2)3 ; Х - CI, ОН, аніон мінеральної або органічної кислоти. Поставлена у винаході задача вирішена ще й тим, що як полігуанідин заявлений дезінфікуючий засіб містить сополімер алкіленгуанідину з оксиалкиленгуанідином загальної формули: {[- (CH2 )m - HN - C - NH -]n [-R 1 - O - R2 - O - R 3 - NH - C - NH - ]y}z NH . HX (3) NH . HX де: m= 6,10,12; n = 1 ¸ 9; y = 1 ¸ 9; z = 2 ¸ 50; R1 = (CH2)2; (СН2)3; R2 = (CH2)2; (CH2)4; R3 = (СН2)2; (СН2)3; -(СН2)2 - О - (СН2)3; Х - СІ, ОН, аніон мінеральної або органічної кислоти. Поставлену у винаході задачу вирішують також і тим, що заявлений дезінфікуючий засіб як полігуанідин містить гуанідиновий полімер або суміш полігуанідинів, які вибирають з ряду, що складається з солей поліалкіленгуанідинів, поліоксиалкіленгуанідинів, сополімерів оксиалкіленгуанідинів та алкіленгуанідинів: хлоридів, фосфатів, сульфатів, фторидів, нітратів, силікатів, сорбатів, ацетатів, стеаратів, олеатів, фумаратів, цитратів, глюконатів. Поставлену у винаході задачу вирішують, крім того, і тим, що у відомому дезінфікуючому засобі у вигляді композиції на основі полігуанідину або ж суміші полігуанідинів, яка містить активно діючу речовину (АДР) та розчинник, у відповідності до винаходу, як АДР він містить полігуанідин або ж суміш полігуанідинів, що вказані вище (в пп.1-5 формули винаходу), який має невідому раніше сукупність властивостей, а саме: широкий спектр біоцидної активності, подовжену, тобто пролонговану, дезінфікуючу дію на протязі 3-365 діб після одноразової дезінфікуючої обробки об'єкта дезінфекції та відсутність привикання - резистентності щодо широкого спектру мікроорганізмів різних роді в та видів, - і призначений для використання як дезінфікуючий засіб широкого спектру мікробіологічної ДІЇ та універсального призначення для за 14 безпечення біобезпеки як у повсякденному житті, так і в епідемічних ситуаціях, в тому числі, зокрема, для боротьби з проявами біотероризму чи військового застосування біологічної зброї, а також для надійного переривання ланцюга передачі інфекцій і ефективної боротьби з внутрішньолікарняними інфекціями, а як розчинник містить переважно воду або водні розчини органічних розчинників при наступному співвідношенні компонентів, мас. %: - полігуанідин або суміш полігуанідинів 0,001 ¸ 70,0 - розчинник - решта до 100. Поставлену у винаході задачу вирішують також і тим, що дезінфікуючий засіб у вигляді композиції додатково містить допоміжні речовини, які вибирають з ряду, що складається з неіоногенних або катіонних поверхнево-активних речовин, комплексоутворювача, солі неорганічної кислоти, зокрема ZnCl2, ароматизатора, барвника, їх комбінації при наступному співвідношенні компонентів, мас. %: як активно-діюча речовина: полігуанідин або суміш полігуанідинів0,001 ¸ 70,00; як допоміжні речовини: неіоногенна або катіонактивна ПАР або суміш П АР до 25,0; комплексоутворювач до 25,0; сіль неорганічної кислоти зокрема ZnCI2 до 5,0 ароматизатор до 2,5. барвник до 0,5 розчинник, переважно вода або водні розчини органічних розчинників решта до 100 Задачу вирішують і тим, що як неіоногенні або катіоноактивні дезінфікуючий засіб додатково містить поверхнево-активні речовини, що вибирають з ряду, який складається з поліалкіленів, поліоксиалкіленгліколів, поліоксиетиленблоксополімерівполоксамерів, полімерних похідних поліоксипропілена та поліоксиетилена загальниих формул: R12 - (-O-CH-CH2-)y (-O-CH2 -CH2-)w (4) CH3 де: R12 - змішаний аліфатичний вуглеводень C8C20 жирних кислот або їх гідрогенізованих аналогів; у = 0 ¸ 50, переважно у = 6 ¸ 11; w = 0 ¸ 10, переважно w = 0 ¸ 4, та/або загальної формули: R1 3 - (-O-CH-CH 2-) x (-O-CH2 -CH 2 -)v( -O- CH-CH 2-)z - OH (5) CH 3 CH 3 де: R13 - змішаний аліфатичний вуглеводень С8-С20 жирних кислот або їх гідрогенізованих аналогів; х, v, z - цілі числа; х = 0 ¸ 30, z = 0 ¸ 30; переважно х = 3 ¸ 20, z = 3 ¸ 20; найбільш переважно х = 3 ¸ 18, z = 3 ¸ 18; v = 0 ¸ 40, переважно v = 11 ¸ 34, при цьому R-групи є змішаними аліфатичними вуглеводневими радикалами і включають алкільні групи, насичені або ненасичені, лінійні або розга 15 84593 лужені, циклічні або ациклічні, в тому числі суміші сполук природного походження, які включають змішані аліфатичні вуглеводневі радикали, похідні жирних кислот або їх гідрогенізованих повністю або частково аналогів або отримані з тваринних, рослинних і морських джерел, переважно, сала, соєвого, кокосового, пальмового, пальмового кісточкового, рапсового масла, риб'ячого жиру, аліфатичні жирні кислоти, похідні нефтенів, переважно C14-C18. Задачу вирішують і тим, що як неіоногенні або катіоноактивні ПАР дезінфікуючий засіб містить речовини, які вибирають з ряду, що складається з акілдидецил-поліоксиетиламонійпропіонату, дидецилметилоксиетиламонійпропіонату, мецетронійметилсульфату, лаурилсульфату натрію, алкіламіноалкілгліцину, N,N-біс(3-амінопропіл)додециламіну, кокоспропілендіамінгуанідиндіацетату, додецил-біс-пропілентриаміну, октенідиндигідро хлориду, поліетиленгликолю, поліоксиетилену, поліоксипропіленгликолю, поліоксипропіленполіоксиетиленсополімеру, поліалкіленоксидів, алкілбензосульфоната натрію, переважно неонолів 9-10, АФБ-10, альфа-14, сульфанола, полівінілового спирту, полідиметилсилоксану, модифікованого полісилоксану, їх сумішей. Поставлену у винаході задачу вирішують також тим, що дезінфікуючий засіб як комплексоутворювач містить сполуку, яку вибирають з ряду, що складається з поліфосфатів, переважно гексаметафосфатів або їх похідних, гідроксикарбоксильних кислот, переважно глюконової кислоти, аміноспиртів, переважно триетаноламіну, полімерних халатних агентів, переважно поліетиленаміну, амінокарбоксильних кислот, динатрієвої солі етилендиамінтетраоцтової кислоти, 1,2діаміноциклогексантетраоцтової кислоти, диетилентриамінопентаоцтової кислоти, фосфонових кислот, переважно нітрилотриметиленфосфонової кислоти, гідрооксиетилідендіфосфонової кислоти, етилендиамінтетраметиленфосфонової кислоти, їх сумішей. Поставлену у винаході задачу вирішують також тим, що час - пролонгованість дезінфікуючої активності заявленого дезінфікуючого засобу після одноразового його використання залежить від мікробного навантаження, природи та характеру поверхні, що дезінфікують, механічного або хімічного впливу на продезінфіковану поверхню і складає від 3 до 365 днів. Задачу вирішують також і тим, що дезінфікуючий засіб має тривалу, пролонговану дезінфікуючу дію, яка, після одноразового його застосування, залежить від вмісту полігуанідину або суміші полігуанідинів в робочому розчині і складає: - 6 ¸ 20 діб - при вмісті полігуанідину в кількості 0,05 ¸ 0,1 мас. %; - 10 ¸ 30 діб - при вмісті полігуанідину в кількості 0,5 ¸ 1,0 мас. % та - 20 ¸ 365 діб - при вмісті полігуанідину в кількості щонайменше 2,0 мас. %. Задачу . вирішують також і тим, що термін збереження біоцидної активності дезінфікуючого 16 засобу в його робочому розчині залежить від вмісту полігуанідину в цьому розчині і складає: - 2 ¸ 6 місяців - при вмісті полігуанідину в кількості 0,05 ¸ 0,1 мас. %; -12 ¸ 24 місяці - при вмісті полігуанідину в кількості 0,5 ¸ 1,0 мас. %; - 2 ¸ 3 роки - при вмісті полігуанідину в кількості 2,0 ¸ 5,0 мас. %; -5 ¸ 7 років (час спостережень) - при вмісті полігуанідину 10,0 ¸ 90,0 мас. %. Нарешті, задачу вирішують тим, що дезінфікуючий засіб має таку властивість, як відсутність привикання - резистентності щодо широкого спектру мікроорганізмів різних родів та видів, щонайменше по відношеннню до мікроорганізмів, які вибирають з ряду, що складається з Echerichia coli. Salmonella typhimurium, Shigella sonne, Staphylococcus aureus 209, Staphylococcus albus. Streptococcus pyogenus - тип 1, Streptococcus pyogenus - тип 2, Streptococcus pyogenus - тип З, Bacillus cereus, Bacillus micoides, Bacillus antracis. Bacillus subtilis, Bacillus mesentericus, Corinebacterium diphteriae PV-8 , Corinebacterium diphteriae (токе), Actinomyces olivaceus, Aspergillus niger, Candida tropicalis, Candida krusei, Candida albicans. Крім того, поставлену у винаході задачу вирішують тим, що у відомому способі одержання дезінфікуючого засобу на основі полігуанідинового полімеру або суміші полігуанідинів, що включає розчинення компонентів та їх змішування, згідно з винаходом, спочатку полігуанідин або суміш полігуанідинів заливають частиною необхідної кількості розчинника і витримують протягом 5 ¸ 12 год. при кімнатній температурі для забезпечення процесу набрякання полімеру, потім додають решту розчинника і перемішують протягом 0,1 ¸ 1,0 год. до утворення гомогенно-го розчину. Поставлену у винаході задачу вирішують і тим, що у способі одержання дезінфікуючого засобу на основі полігуанідинового полімеру або суміші полігуанідинів, що включає розчинення компонентів та їх змішування, допоміжні компоненти розчиняють кожний окремо, потім їх розчини по черзі додають до розчину полігуанідину чи суміші полігуанідинів з одночасним перемішуванням до повного розчинення компонентів і утворення суміші без розшарування. Задачу вирішують також тим, що допоміжні компоненти розчиняють по черзі безпосередньо в розчині полігуанідину або в розчині суміші полігуанідинів при температурі 20 ¸ 80°С з одночасним перемішуванням до повного їх розчинення і утворення суміші без розшарування. Такий спосіб одержання забезпечує можливість отримання дезінфікуючого засобу на основі полігуанідинового полімеру або суміші полігуанідинів з сукупністю заявлених властивостей завдяки саме сукупності ознак заявленого способу одержання, в тому числі насамперед завдяки виконанню операції набрякання полімеру та послідовному виконанню операцій набрякання та введення допоміжних речовин. Це гарантовано забезпечує утворення гомогенної структури концентратів засобу і їх стабільність при зберіганні тривалий час без розшарування (7 років - час спо 17 84593 стережень), а структура розчинів заявленого дезінфікуючого засобу наближена до рівноважного стану за термодинамічними характеристиками та конформаційним станом макромолекул біоцидного полімеру - полігуанідину. Це сприяє забезпеченню високої біодоступності гуанідинових груп біоцидного полімеру і високій (максимальній) мікробіологічній активності заявленого дезінфікуючого засобу. Нарешті, поставлену у винаході задачу вирішують тим, що у відомому способі використання дезінфікуючого засобу, що включає періодичну дезінфікуючу обробку об'єктів, в тому числі об'єктів медичного призначення, рабочим розчином дезінфікуючого засобу переважно шляхом протирання, занурення, зрошення і/або розпилення, з наступною витримкою (експозицією), згідно з винаходом, як дезінфікуючий засіб використовують засіб, вказаний в пп. 1-13 даного винаходу, робочі розчини якого готують щонайменше за 0,5 год., оптимально - не менше, ніж за 1,0 - 2,0 год., до їх використання, періодичність (кратність) використання робочого розчину дезінфікуючого засобу складає 1 раз щонайменше на 3 доби, час витримки (експозиція) при температурі 20°С складає 3 - 180 хв., поверхня після обробки не потребує змивання засобу, а в проміжках між його використаннями проводять вологе прибирання чиcтою водою без застосування інших дезінфікуючих та/або миючих засобів. Робочі розчини дезінфікуючого засобу в залежності від концентрації готують в термін не раніше, ніж за 0,5 год. (оптимально - не менше 1,0 - 2,0 год.) і не пізніше ніж за 2-3 роки до їх використання. Термін не менше 0,5 год. необхідний для встановлення конформаційної рівноваги макромолекул біоцидного гуанідинового полімеру і забезпечення високого ступеню біодоступності гуанідинових груп при використанні робочого розчину дезінфікуючого засобу. Це забезпечує оптимальні умови для прояву високої мікробіологічної активності, властивої гуанідиновим полімерам, або їх сумішам. Періодичність використання дезінфікуючого засобу залежить від концентрації діючої речовини в робочому розчині засобу, природи та характеру поверхні, що дезінфікують, механічного абохімічного впливу на продезінфіковану поверхню і складає 1 раз за 3-365 діб. Сукупність ознак заявленого способу використання дезінфікуючого засобу забезпечує таку структуру робочих розчинів, в яких макромолекули знаходяться в наближеному до рівноважного конформаційному стані, а розчини є близькими до істинних з фізико-хімічної точки зору. При нанесенні такого робочого розчину на об’єкт дезінфекції завжди забезпечують швидкий доступ гуанідинових груп макромолекул до мікроорганізмів, а на обробленій поверхні виникає якісний адсорбційний моношар із макромолекул гуанідинового полімеру, що у подальшому і забезпечує тривалий (пролонгований) дезінфікуючий ефект та можливість ефективно дезактивувати мікроорганізми, що попадають на оброблену поверхню. Таке рішення поставленої задачі забезпечує одержання екологічно безпечного дезінфікуючого 18 засобу з широким спектром антимікробної активності, тривалою, тобто пролонгованою, дією, по відношенню до нього не виникає звикання - резистентності мікроорганізмів. Його використання забезпечує не тільки швидку загибель мікроорганізмів і не викликає їхнього звикання до дії дезінфікуючого засобу, але й гарантує тривалий надійний антимікробний захист обробленої поверхні, що перешкоджає розмноженню мікроорганізмів на протязі 3 - 365 діб після одноразового використання засобу. Заявлений дезінфікуючий засіб не має запаху, нелеткий, добре розчиняється у воді, нетоксичний, біологічно розкладається. Його зберігання та транспортування не вимагає особливих умов, а при його використанні не потрібні особливі засоби захисту шкіри та слизових оболонок. Завдяки цьому дезінфекцію можна проводити в присутності хворих та персоналу. Технічний результат, якого досягають при використанні заявленої групи винаходів, полягає у вирішенні проблеми надійної дезінфекції, що, в свою чергу, сприяє вирішенню глобальної проблеми внутрішньо-лікарняних інфекцій. Надійність дезінфекції заявленим дезінфікуючим засобом обумовлена наявністю заявленої сукупності його властивостей, а саме: високої мікробіологічної активності та незалежністю її від мікробного навантаження і білкового забруднення (кров та інші виділення) поверхонь, що обробляються, відсутністю розвитку резистентності мікроорганізмів по відношенню до дезінфікуючого засобу, наявністю пролонгованої дії заявленого дезінфікуючого засобу, а також принципом дії заявленого дезінфікуючого засобу як дезинфектанта-"пастки", механізм дії якого розкритий нами нижче в прикладі 19. Крім того, технічний результат, якого досягають при використанні заявленої групи винаходів, заключається у високій економічній ефективності, по-перше, за рахунок того, що заявлений дезінфікуючий засіб можна застосовувати в порівняно невисоких концентраціях, що дорівнює МБК, в той час як для відомих дезінфікуючих засобів, в зв’язку з розвитком резистентності мікроорганізмів, практична дезинфектологія змушена рекомендувати для практичного застосування робочі розчини, концентрація яких значно (в десятки разів) перевищує МБК. По-друге, наявність тривалої, пролонгованої дії у заявленого дезінфікуючого засобу дозволяє проводити дезінфікуючу обробку значно рідше, ніж у випадку використання відомих дезінфектантів, а саме: один раз на 3 - 365 діб. Потретє, антимікробна активність заявленого дезінфікуючого засобу не знижується в присутності крові та інших органічних субстанцій, що у випадку відомих дезінфектантів призводить до підвищених витрат робочих розчинів при проведенні дезінфекції об’єктів, забруднених кров’ю та іншими виділеннями. Технічний результат, якого досягають, полягає ще й в тому, що заявлений дезінфікуючий засіб на основі полімерних гуанідинів є препаратом з широким спектром біоцидної дії, з високою стабільністю та низькою токсичністю. Дезінфікуючий засіб не має шкірно-подразнюючої, шкірнорезорбтивної, ембріотоксичної, мутагенної та кан 19 84593 церогенної дії, кумулятивний ефект відсутній. Низька токсичність полігуанідинів для людини пояснюється тим, що в організмі теплокровних є ферментні системи, здатні викликати деградацію полімеру, тому організм теплокровних не накопичує полігуанідинів. Мікробіологічні дослідження, результати яких наведені в прикладах конкретного використання заявленого дезінфікуючого засобу, були проведені в Інституті епідеміології та інфекційних хвороб ім. Л.В.Громашевського Академії медичних наук України, м. Київ, на базі лабораторії молекулярної епідеміології. Дослідні роботи проводили у цілковитій відповідності до загальноприйнятих у світовій мікробіології стандартних методів. При цьому були використані всі відомі можливості мікробіологічних досліджень, що забезпечують наведену в таблицях вірогідність одержаних результатів - див., наприклад, - Смайбер P., Криг Н. Методы общей бактериологии. Под ред. Герхард Ф.И. и др. - М., 1983, т. 3, С. 8-97 [17]; - Справочник по микробиологическим методам исследований. Под ред. М.М.Бергер.- М., 1982 [18]; - Руководство по микробиологии и эпидемиологии. Под редакцией И.М. Великанова -М., 1937 [19]. Кількість повторних досліджень (перевірок) була потрійною. Статистична обробка результатів мікробіологічних досліджень проводилась згідно загальноприйнятим методам. -див.: - Плохинский Н.В. Биометрия.-1964 [20]; - Компютерная программа "Statistica 5.5" [21]. Результати мікробіологічних досліджень, пов'язаних з заявленою групою винаходів, викладені в таблицях 1-20, в яких наведено: Таблиця 1 - перелік штамів мікроорганізмів, для яких вивчали процес привикання, та джерела їх отримання; Таблиця 2 - інтервали концентрацій, які використовували при вивченні адаптаційних змін (стійкості) різних штамів мікроорганізмів до дезінфікуючих засобів різної природи; Таблиця 3 - дані про розвиток стійкості, тобто резистентності, мікроорганізмів різних видів та родів до хлораміну; Таблиця 4 - дані про розвиток стійкості, тобто резистентності, мікроорганізмів різних видів та родів до хлорного вапна; Таблиця 5 - дані про розвиток стійкості, тобто резистентності, мікроорганізмів різних видів та родів до глутарового альдегіду; Таблиця 6 - дані про розвиток стійкості, тобто резистентності, мікроорганізмів різних видів та родів до бензалконіум хлориду; Таблиця 7 - результати мікробіологічного дослідження змивів з поверхонь тест-об'єктів на мікробне обсіменіння (контамінацію) після одноразової обробки цих поверхонь робочими розчинами відомих дезінфектантів; Таблиця 8 - дані про відсутність розвитку стійкості у різних видів та родів мікроорганізмів, що відбувається при послідовних пасажах на середо 20 вища х зі зростаючими концентраціями заявленого дезінфікуючого засобу; Таблиця 9 - порівняльні дані, які одержані при експериментальному дослідженні можливості виникнення стійкості мікроорганізмів до відомих дезінфектантів та заявленого дезінфікуючого засобу методом пересіву культур мікроорганізмів на середовищах зі зростаючими концентраціями дезінфектантів; Таблиця 10 - дані про індукцію мутантів, стійких до дезінфектантів при дії одного із сильних хімічних мутагенів - нітрозогуанідину; Таблиця 11 - дані щодо індукції мутантів, стійких до заявленого дезінфікуючого засобу, при дії мутагену та заявленого дезінфікуючого засобу (ПГМГ) на клітини із синхронним ростом через 20, 40 та 60 хвилин від початку реплікації ДНК; Таблиця 12 - результати мікробіологічного дослідження змивів з поверхонь тест-об'єктів на мікробне обсіменіння (контамінацію) на протязі ЗО днів, що складали час досліджень; Таблиця 13 - дані про відсутність розвитку стійкості у мікроорганізмів різних видів та родів, що відбувався при послідовних пасажах на середовища х зі зростаючими концентраціями дезінфікуючого засобу - полідіоксододекангуанідину фосфату (ПДОДДГ); Таблиця 14 - результати мікробіологічного дослідження змивів з поверхонь тест-об'єктів на мікробне обсіменіння (контамінацію) після одноразової обробки цих поверхонь робочим розчином заявленого дезінфікуючого засобу; Таблиця 15 - мікробіологічне дослідження змивів з поверхонь на мікробне обсіменіння - контамінацію об'єктів зовнішнього середовища гінекологічної операційної та перев'язувальної кімнат протягом 20 днів, що складало час досліджень, рахуючи з дня одноразової обробки поверхонь визначення ефективності дезінфекції поверхонь об'єктів зовнішнього середовища в гінекологічному відділенні лікарні заявленим дезінфікуючим засобом; Таблиці 16, - властивості заявленого дезінфікуючого засобу на основі 17 та 18 полігуанідинів в залежності від вмісту розчинника як допоміжної речовини, катіоноактивної ПАР як допоміжної речовини та, відповідно, комплексоутворювача або суміші комплексоутворювачів як допоміжної речовини; Таблиця 19 - наявність/відсутність біоцидної активності в робочих розчинах дезінфікуючого засобу з концентрацією АДР 0,05; 0,1; 0,5; 1,0 і 2,0 мас. % через 1 год., 5 днів, 1 місяць, 6 місяців, 1рік, 1,5, 2,0, 2,5 та через 3 роки після їх приготування; Таблиця 20 - різна періодичність використання робочих розчинів заявленого дезінфікуючого засобу з концентрацією діючої речовини 0,05; 0,1; 0,5; 1,0; 2,0 та 5,0 мас. % в залежності від фізичної та хімічної природи поверхні, що дезінфікують. Нижче наведені приклади конкретної реалізації заявленої групи винаходів, які пояснюють, але не обмежують використання винаходів, що ми заявляємо. 21 84593 Полігуанідини, на основі яких розроблено заявлений дезінфікуючий засіб, а також допоміжні речовини отримують за допомогою відомих способів. Приклад 1 Вивчали процес привикання великої групи мікроорганізмів різного рівня організації-прокаріотів (грамнегативні, грампозитивні, бацили), нижчих еукаріотів (кандіда, аспергіли, актиноміцети) до АДР основних хімічних груп дезінфектантів: хлорвмісних (хлорне вапно, хлорамін), четвертинних аммонієвих сполук (бензалконіум хлорид) та альдегідвмісних (глутаровий альдегід). В таблиці 1 наведений перелік штамів мікроорганізмів, для яких вивчали процес привикання, та джерела їх отримання. Видову та штамову належність штамів додатково перевіряли за допомогою тест-систем, а саме: API-20 Е - для ентаробактерій та API-20 Е для стафілококів. Для досліджень використовували такі поживні середовища: - м'ясо-пептонний агар - для сальмонел, кишкової палички та шигел; - м'ясо-пептонний агар з добавкою 1% глюкози - для стрептококів; - м'ясо-пептонний агар - для спороутворюючи х бактерій; - пивне сусло - для штамів кандіда; - пивне агаризоване сусло або середовище Сабуро - для актиноміцетів та аспергилів; - спеціальне середовище з додаванням спеціальних компонентів - для коринебактерій - див. Козлов Ю.А. Питательные среды в медицинской микробиологии. - М., 1950 [22]. В якості агар-агару для приготування поживних середовищ використовували агар Діфко фірми Sigma, США. Культури сальмонел, шигел, кишкової палички, стафілококів та стрептококів після пересівів вирощували в термостаті з водяною подушкою при 37°С. Пересіви робили через кожні 24 години. Культури актиноміцету, аспергіла та кандіда вирощували при температурі 28°С і пересівали через кожні 3 доби на середовища зі зростаючими концентраціями дезінфікуючих засобів, тому що стаціонарна фаза росту у ци х мікробів настає через три доби. Коринебактерії вирощували при температурі 37°С на протязі доби, а потім знову пересівали. Спороутворюючі мікроорганізми культивували на протязі доби при температурі 37°С, а потім пересівали на інше середовище, яке містило підвищену концентрацію дезінфікуючого засобу. Мікробне навантаження складало 10 клітин/мл. Мінімальну бактерицидну концентрацію визначали згідно стандартних загальноприйнятих методів, що використовують в мікробіологічних дослідженнях - див.: - Ждан-Пушкина В.Н. Основы роста культур микроорганизмов. - М., 1993, 87 с.[23]; - Елепов В.А. Химическая микробиология. - М., Изд-во "Мир", 1989, 220 с. [24]; 22 - Афиногенова Г.Е. Метод определения активности дезинфектантов и антисептиков. Методическое пособие. - Санкт-Петербург, 2000 [25]; - Пхакадзе Т.А. Антисептические и дезинфицирующие средства в профилактике эпидемий. - В ж. Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия. 2000, № 1, с. 42-47 [26]. Кількісний підрахунок та склад мікроорганізмів, що використовували для проведення аналізу чутливості до дезінфікуючих засобів, додатково перевіряли за методом Наепеї (1973) в модифікації Микальсард із співавторами - див., Сомов Г.П., Бузолева Л.С., Бурцева Т.И. Изучение механизмов адаптации патогенных микроорганизмов к факторам окружающей среды. - В ж. "Биол. эксп. биол. и медицины", 1999, т.128, № 9, С. 19-27 [27]. Експериментальне дослідження можливості виникнення стійкості мікроорганізмів до дезінфікуючих засобів вивчали шляхом пересіву культур мікроорганізмів на середовищах зі зростаючими концентраціями дезінфектантів - див., наприклад, - Оценка способности лекарственных средств вызывать зависимость. Доклады научной группы ВОЗ. - Женева, ВОЗ, 1977, 57 с. [28]; - Лабораторные методы исследования клеток. Справочник. Под редакцией Меньшикова В.В. - М., Медицина, 1987, 366 с. [29]; - Смирнов И.В. Возбудители бактериальных инфекций у человека. Клиническая микробиология и антимикробная терапия. 2000, № 2, т.2, с. 412 [30]; - Перт С. Основы культивирования микроорганизмов. - М., Мир, 1978 [ЗІ]. Вивчення процесу адаптації починали зі значно нижчих концентрацій дезінфікуючих засобів у порівнянні з МБК з огляду на те, що адаптація як фізіологічний процес має багатофакторну природу. В таблиці 2 наведені інтервали концентрацій, які використовували при вивченні адаптаційних змін (стійкості) різних штамів мікроорганізмів до дезінфікуючих засобів різної природи. Для їх визначення спочатку встановлювали мінімальну бактерицидну концентрацію, а потім зменшували її в середньому в 10-15 разів. Ця концентрація і була початковою при проведенні дослідження можливості виникнення стійкості мікроорганізмів до дезінфікуючих засобів. Концентрація, при якій вже не спостерігали росту мікроорганізмів, характеризувала стійкість мікроорганізмів до данного типу дезінфікуючого засобу після пересівів (пасажів) на середовищах зі зростаючими концентраціями цього дезінфікуючого засобу. Кінцевою концентрацією інтервалу, в якому проводили дослідження, була та, яка перевищувала на 2-3 пасажі концентрацію, при якій вже не спостерігали росту мікроорганізмів. Кількість пересівів, тобто кількість пасажів, визначали відсутністю росту того чи іншого мікроорганізму при подальших пересівах на середовищах зі зростаючими концентраціями дезінфікуючих засобів, яка обумовлювалась специфічністю генетики і біохімії як самих мікроорганізмів, такі специфічністю механізмів дії самих дезінфікуючих засобів. Якщо кінцева концентрація перевищувала мінімальну бактерицидну концентрацію для даного мікроорганізму в 1,2 - 1,5 разів, то це свідчило про розвиток резис 23 84593 тентності, тобто привикання, мікроорганізмів до дії даного дезінфікуючого засобу. - Див.: Методы молекулярной генетики. - М., Мир, 1994 [32]; Стент А. Биохимическая генетика, - М., Мир, Пер. с англ., 1980, 418 с. [33]. Дані про розвиток стійкості або про її відсутність у різних видів та родів мікроорганізмів, що відбувається при послідовних пасажах на середовищах зі зростаючими концентраціями дезінфікуючих засобів різних хімічних гр уп, наведені в таблицях 3-6, а саме: - в таблиці 3 - розвиток стійкості, тобто резистентності, мікроорганізмів різних видів та родів до хлораміну; - в таблиці 4 - розвиток стійкості, тобто резистентності, мікроорганізмів різних видів та родів до хлорного вапна; - в таблиці 5 - розвиток стійкості, тобто резистентності, мікроорганізмів різних видів та родів до глутарового альдегіду; -в таблиці 6 - розвиток стійкості, тобто резистентності, мікроорганізмів різних видів та родів до бензалконіуму хлориду. З таблиць 3-6 видно, що стійкість, тобто резистентність, всіх досліджених мікроорганізмів до впливу хлораміну зростає в 2,3 ¸ 38,1 рази; до впливу хлорного вапна - в 3,5 ¸ 23,8 рази; до впливу глутарового альдегіду - в 1,4 ¸ 16,6 рази, а до впливу четвертинної амонієвої сполуки бензалконіуму хлориду, крім штамів кандіда, аспергіла та актиноміцета, - в 2,2 ¸ 9,3 рази. Таким чином, у всіх досліджених мікроорганізмів розвивається резистентність до відомих дезінфікуючих засобів тих хімічних груп, які зараз найбільш часто використовують в практичній дезинфектології. Приклад 2 В лабораторних умовах проведені дослідження по визначенню тривалості дезінфікуючих властивостей відомих дезінфікуючих засобів після одноразової обробки поверхонь. Використовували як тест-об'єкти пластинки площею 100 см 2 із матеріалів різної природи: скляні, металеві (нержавіюча сталь) та гумові. Як тест-мікроби використовували стійкі до фенолу та хлораміну штами кишкової палички та золотистого стафілококу. Мікробне навантаження складало 10 клітин/мл. Заражені тест-об'єкти обробляли робочим розчином дезінфікуючого засобу шля хом занурення, зрошення чи протирання ганчіркою, змоченою робочим розчином дезінфікуючого засобу. Після цього тестоб'єкти зберігали в звичайних умовах лабораторії. Концентрацію робочих розчинів дезінфікуючого засобу вар'ювали від 0,1 до 2 мас. % по АДР і вона складала, відповідно, 0,1; 0,5; 1,0 та 2,0 мас. %. Після обробки тест-об'єктів проводили мікробіологічні дослідження змивів з поверхонь тестоб'єктів на мікробне обсіменіння (контамінацію). В таблиці 7 представлені результати мікробіологічного дослідження змивів з поверхонь тестоб'єктів на мікробне обсіменіння (контамінацію) після одноразової обробки цих поверхонь робочими розчинами відомих дезінфектантів. Як видно, з таблиці 7, вже через 6 год. після обробки поверхонь робочими розчинами відомих 24 дезінфектантів майже всі поверхні є контамінованими. Тільки при обробці поверхонь досить концентрованими (1,0 та 2,0 мас. %) розчинами дезінфікуючого засобу на основі ЧАС поверхні через 6 годин залишались продезінфікованими, але й вони наступної доби вже були контамінованими. Таким чином, ефект від обробки поверхонь відомими дезінфікуючими засобами різних хімічних груп носить короткочасний характер, внаслідок чого оброблена дезінфікуючим засобом поверхня через досить короткий проміжок часу знову виявляється засіяною (контамінованою) мікроорганізмами. Тому дезінфікуючу обробку відомими дезінфікуючими засобами потрібно проводити кожного дня, а то і по два рази в день, а в операційних, пологових блоках лікарень і т.п. приміщеннях - після кожного пацієнта. Основною причиною того є низька стійкість робочих розчинів відомих дезінфікуючих засобів і їх швидке розкладання на обробленій поверхні. Отже, експериментальне підтверджено, що відомі дезінфікуючі засоби не мають тривалої, тобто пролонгованої дезінфікуючої дії, що дозволяло б проводити обробку об'єктів один раз на декілька днів або тижнів. Приклад 3 Виконували умови прикладу 1. Вивчали можливість розвитку резистентності дезінфікуючого засобу, який як активно діючу речовину містив поліалкіленгуанідин, а саме - полігексаметиленгуанідин хлорид (ПГМГ). Дані про відсутність розвитку стійкості у різних видів та родів мікроорганізмів, що відбувається при послідовних пасажах на середовищах зі зростаючими концентраціями заявленого дезінфікуючого засобу, наведені в таблиці 8, з якої видно, що стійкість всіх штамів усі х досліджених мікроорганізмів під впливом активно діючої речовини заявленого дезінфікуючого засобу, який в як АДР містив ПГМГ, не зростала. Як тільки при пересівах досягали концентрацій ПГМГ, що дорівнювали мінімальній бактерицидній концентрації, клітини мікроорганізмів не росли. Під мікроскопом спостерігали повну загибель клітин. Результати цього експериментального дослідження свідчать про повну відсутність розвитку резистентності широкого спектру мікроорганізмів до дії заявленого дезінфікуючого засобу. Приклад 4 Виконували умови попереднього прикладу і експериментальне досліджували можливість виникнення стійкості мікроорганізмів до відомих дезінфектантів та заявленого дезінфікуючого засобу методом пересіву культур мікроорганізмів на середовищах зі зростаючими концентраціями дезінфектантів. Одержані порівняльні дані наведені в таблиці 9. Як видно з таблиці 9, стійкість, тобто резистентність, всіх досліджених мікроорганізмів до впливу хлораміну зростає в 2,3 ¸ 38,1 рази; - стійкість, тобто резистентність, всіх досліджених мікроорганізмів до впливу хлорного вапна зростає в 3,5 ¸ 23,8 рази; - стійкість всіх досліджених мікроорганізмів до впливу глутарового альдегіду зростає в 1,4 ¸ 16,6 рази; а 25 84593 - стійкість мікроорганізмів до впливу четвертинної амонієвої сполуки бензалконіуму хлориду, крім штамів кандіда, аспергіла та актиноміцета, зростає в 2,2 ¸ 9,3 рази. Разом з тим, результати дослідження свідчать також про повну відсутність розвитку резистентності у широкого спектру мікроорганізмів до дії заявленого дезінфікуючого засобу. Таким чином, у всі х досліджених мікроорганізмів виробляється резистентність до дезінфектантів всіх хімічних груп, які зараз найбільш часто використовують в практичній дезинфектології, крім заявленого дезінфікуючого засобу. Приклад 5 Для доповнення та підтвердження даних, одержаних при вивченні можливої адаптації мікроорганізмів до відомих дезінфікуючих засобів та заявленого дезінфікуючого засобу методом пересівів на середовищах зі зростаючими концентраціями провели експериментальне вивчення індукції мутантів мікроорганізмів, стійких до відомих дезінфікуючих засобів, та заявленого дезінфікуючого засобу, з використанням методу експериментального мутагенезу - див., наприклад: - Ауэрба х Ш. Проблемы мутагенеза. - Москва, Изд-во "Мир", 1978 [34]; - Hollaender A. et al. Chemical mutagenes. Principes and methods for their Detection. -New York London, Plenum pres, 1973 [35]. Суть методу визначена в послідовній дії на клітини мікроорганізмів хімічного мутагену та АДР дезінфектантів (хлору та хлорного вапна) і заявленого дезінфікуючого засобу, який містив як діючу речовину поліалкіленгуанідин, а саме ПГМГ. Як мутаген використали хімічний мутаген із групи нітрозосполук, а саме N-метил-N'-нітро-Nнітрозогуанідин, який має специфічну дію - пошкоджувати ДНК в точці реплікації та сприяти індукції мутантів. N-метил-N'-нітро-N-нітрозогуанідин є активним мутагеном і використовується для одержання мутантів на різних об'єктах, в тому числі і на трансформуючій ДНК - див., наприклад: - Wosawa A. Properties of a membrane attached from of the folded chromosome of E.coli. - J. Mol.BioL, 1974, 82, #1, p. 91-105 [36]; - Delic V., Hopwood D.A., Friend E.J. Mutagenesis by N-methyl-N-nitro-N-nitrosoguanidine (NTG) in Streptomyces coelicolor,- Mutat.Res., 1970, W.9, #2, p. 167-182 [37]; - Konichkova-Radochova M., Maiek I. The mutagenic effect of nitrosoguanidine on Mycobacterium phlei PA. - Folva microbial, 1969, 14, #3, p. 201207 [38]; - Chattoo В. Sinha U. Mytagenic activity of Nmethyl-N-nitro-N-nitrosoguanidine (NTG) and NmethyI-N-nitrosourea (NMU) in Aspergillus nidulans. Mutat. Res.,1974, 23, #1, p.41-49 [39]; - Kimball R.E., Setlow J.K. Mutation induced in Haemophilus influenzae by transformation with nitrosoguanidine - treated DNA. - Mut.Res., 1972, 14, #2, p. 137-146 [40]. Використовували суспензію мікроорганізмів, які знаходилися в стані спокою, у фосфатному буфері з рН = 6,0 та з мікробним навантаженням 108 клітин/мл. До суспензії мікроорганізмів дода 26 вали хімічний мутаген в концентраціях від 0,5 до 2мкг/мл в залежності від виду мікроорганізму і вели обробку протягом 60 хв. Після обробки клітини висівали на агаризовані поживні середовища, які містили АДР дезінфікуючих засобів в концентраціях, що дорівнювали мінімальній бактерицидній для даного АДР та виду мікроорганізму і не містили АДР дезінфікуючих засобів, які використовували як контроль. Після експозиції проводили облік мікроорганізмів. Виживання мікроорганізмів після дії мутагену визначали по контрольному досліду в процентному відношенню до вихідної концентрації мікроорганізмів в суспензії. Контролем для визначення активності мутагену 'N-метил-N'-нітро-Nнітрозогуанідину була наявність індукції (поява) під дією мутагену а уксотрофних м утантів, тобто мутантів, що не ростуть на мінімальних поживних середовищах без додавання амінокислот. Методом реплік з використанням мінімальних поживних середовищ визначали індукцію ауксотрофних мутантів в процентному відношенню до виживших мікроорганізмів при дії хімічного мутагену на клітини мікроорганізмів, які знаходились в стані спокою,- див. Lederberg J., Lederberg Е. Replica plating and indirect selection of bacterial mutants - J Bacteriol., 1962, v.63, № 3, p. 399-406 [41]. Дані, отримані при вивченні індукції мутантів, стійких до дезінфектантів при дії одного із сильних хімічних мутагенів, наведені у таблиці 10, з якої видно, що при виживанні клітин вивчених штамів мікроорганізмів від 11 до 21% індукція мутантів, стійких до хлорного вапна, коливалась від 3 до 8%, стійких до хлораміну - від 3 до 6%. Не було одержано жодного мутанту, стійкого до дії заявленого дезінфікуючого засобу, в той час як індукція ауксотрофів (контроль мутагенезу) при вказаній виживаємості була досить високою і коливалась від 2,6 до 6,5% в залежності від штаму та виду мікроорганізмів. Одержані експериментальні дані свідчать про неможливість одержання стійких до заявленого дезінфікуючого засобу мутантів при дії одного із найсильніших хімічних мутагенів. Приклад 6 Виконували умови прикладу 5. Але при вивченні можливої індукції мутантів мікроорганізмів, стійких до заявленого дезінфікуючого засобу, вивчали дію нітрозогуанідину та ПГМГ на синхронно ростучі клітини досліджуваних мікроорганізмів з використанням методу екпериментального мутагенезу. При синхронному рості в клітинах реплікаційна вилка ДНК йде по всій хромосомі і знаходиться в різних місцях з початку росту, що, при додаванні мутагену в різні терміни від початку росту, суттєво збільшує кількість можливих ділянок взаємодії мутагену з ДНК мікроорганізмів і дає можливість одержувати мутанти з більш широким спектром ауксотрофності. Це обумовлено тим, що нітрозогуанідин індукує тісно зціплені мутації, тобто комутації - див., наприклад: - Guerola N., Ingraham J.L., Cerda-Olmedo E. Induction of crossed linked multition mutation by nitrosoguanidine. - Nature, New BioL, 1971, 230, N 12, p. 122-125 [42]; 27 84593 - Oeschger M.P., Berlin M.K. A simple procedure for localized mutagenesis using nitrosoguanidine. Мої. and Gen. Genet, 1974, 134, N 1, p. 77-83 [43]. Комутації відбуваються безпосередньо в районі реплікації хромосоми, чутливість якої до нітрозогуанідину в 220 разів вища порівняльне з іншими ділянками ДНК. - Див. Мацелюх Б.П. Рекомбинация и репликация ДНК бактерий и актеномицетов. - Київ, На укова думка, 1979, 286 с. [44]. Для одержання клітин з синхронним ростом використовували інгібітор синтезу ДНК дезоксиаденозин (аденозин-2-дезоксирибозид) фірми Sigma (USA). Синхронізація росту клітин під дією дезоксиаденозину обумовлена тим, що дезоксиаденозин призводить до накопичення аденозинтрифосфату за рахунок гальмування фосфорилювання і пригнічення утворення дезоксигуанозіндифосфату та дезоксицитозінтрифосфа ту. Для грампозитивних клітин дезоксиаденозин використовували в концентрації 0,5мкг/мл, для грамнегативних - 0,7мкг/мл, для інших - від 0,7 до 2,0мкг/мл. Взаємодію клітин з дезоксиаденозином виконували на протязі від 2 до 3,5год. Потім дію дезоксиаденозину припиняли шляхом трьохразової відмивки клітин фізіологічним розчином, після чого клітини переносили в пробірки з рідким поживним середовищем (м'ясо-пептонний бульйон, середовище Сабуро - для кандіда). Така обробка клітин призводила до синхронізації циклів поділу клітин. Контроль синхронізації росту клітин проводили згідно відомих методів - див., наприклад: - Ворновицкая Г.И. О механизме действия дезоксиаденозина на синтез нуклеиновых кислот в раковой клетке. - В ж. „Биохимия", 1998, т. 33, С. 1192-1196 [45]; - Коротяев А.И. Содержание ДНК-мутантов E.coli, резистентных к рифампицину и налидиксовой кислоте. - В ж. "Микробиология", 1982, т. 51, № 6, С. 983-987 [46]; - Миллер Д. Эксперименты в молекулярной генетике. - М., Изд-во "Мир", 1976, 360 с. [47]. В подальшому додавали нітрозогуанідин у концентраціях від 0,5 до 2мкг/мл в залежності від виду мікроорганізму і вели обробку протягом, відповідно, 20, 40 та 60 хв. від початку реплікації ДНК. Після цієї обробки клітини висівали на агаризовані середовища, що містили заявлений дезінфікуючий засіб (ПГМГ) у кількості, що дорівнювала МБК, і визначали можливість одержання резистентних мутантів. Контролем для визначення активності мутагену було експериментальне вивчення інтенсивності індукції ауксотрофних мутантів під дією мутагену методом реплік з використанням мінімальних поживних середовищ. В таблиці 11 наведені дані щодо індукції мутантів, стійких до заявленого дезінфікуючого засобу, при дії мутагену та заявленого дезінфікуючого засобу (ПГМГ) на клітини із синхронним ростом через 20, 40 та, відповідно, 60 хв. з початку реплікації ДНК. З таблиці 11 видно, що при дії на всі штами мікроорганізмів мутагену та заявленого дезінфікуючого засобу при концентрації останнього, що дорівнювала МБК, м утанти, стійкі до заявленого 28 дезінфікуючого засобу, не утворюються як у сальмонел, шигел, стафілококів, бацил, коринебактерій, так і у нижчих еукаріотів - кандид. А в контролі (індукція ауксотрофів) кількість мутантів в залежності від терміну дії мутагену зростає. Отже, експериментальне було доведено, що, не зважаючи на суттєві збільшення можливих ділянок взаємодії мутагену з ДНК мікроорганізмів, стійкі до заявленого дезінфікуючого засобу мутанти не утворюються. Одержані експериментальні результати, наведені в прикладах 5 та 6, є важливим доповненням до даних про неможливість одержання мутантів, стійких до заявленого дезінфікуючого засобу, одержаних шляхом послідовних пересівів на середовища х зі зростаючими концентраціями цього дезінфікуючого засобу. Приклад 7 З метою визначення тривалості дезінфікуючих властивостей після одноразової обробки поверхонь з різних матеріалів та різному мікробному навантаженні були проведені дослідження ефективності застосування протягом значного проміжку часу заявленого дезінфікуючого засобу, який як активно діючу речовину містив поліалкіленгуанідин, а саме - полігексаметиленгуанідин хлорид (ПГМГ). Як тест-об'єкти використовували пластинки площею 100см з матеріалів різної природи: скляні, керамічні, металічні (чорний метал та нержавіюча сталь), дерев'яні з лакофарбним покриттям і без нього, гумові, пластмасові та шматочки тканини - батисту того ж розміру. Як тест-мікроби використовували стійкі до фенолу та хлораміну штами кишкової палички та золотистого стафілококу. Мікробне навантаження складало 10 та 108 клітин/мл. Заражені тест-об'єкти обробляли дезінфікуючим засобом шляхом занурення, зрошення чи протирання ганчіркою, змоченою робочим розчином дезінфікуючого засобу. Після цього тест-об'єкти зберігали в звичайних умовах лабораторії. Концентрація робочих розчинів дезінфікуючого засобу коливалась від 0,05 до 1 мас. % по АДР і складала, відповідно, 0,05; 0,1; 0,5 та 1,0 мас. %. Після обробки тест-об'єктів проводили мікробіологічні дослідження змивів з поверхонь тест-об'єктів на мікробне обсіменіння (контамінацію) протягом всього часу досліджень. Дослідження показали, що ані метод обробки заявленим дезінфікуючим засобом поверхонь, а саме шляхом протирання, зрошення, занурення, ані мікробне навантаження (104 або 108 клітин/мл) не впливають на ефективність знезараження та на тривалість дії дезінфікуючого засобу. Незалежність ефективності знезараження від мікробного навантаження свідчить про надійність процесу дезінфекції при застосуванні заявленного дезінфікуючого засобу. В таблиці 12 представлені результати мікробіологічного дослідження змивів з поверхонь тестоб'єктів на мікробне обсіменіння (контамінацію) на протязі 30 днів, що складали час досліджень. З таблиці 12 видно, що тривалість - пролонгованість, дезінфікуючої активності заявленого дезінфікуючого засобу після однократного його застосування 29 84593 залежить від природи поверхні, що обробляють, та вмісту полігуанідину в робочому розчині і складає 8-30 діб (час досліджень), а саме: 8-14 діб для робочого розчину дезінфікуючого засобу з концентрацією діючої речовини 0,05 мас. %, 16-22 діб для робочого розчину дезінфікуючого засобу з концентрацією діючої речовини 0,1 мас. %, 22 - 28 діб для робочого розчину дезінфікуючого засобу з концентрацією діючої речовини 0,5 мас. % та 30 і більше діб для робочого розчину дезінфікуючого засобу з концентрацією діючої речовини 1,0 мас.% в залежності від природи поверхні, що обробляють. Приклад 8 Виконували умови прикладу 1, за яких вивчали можливість розвитку резистентності мікроорганізмів до заявленого дезінфікуючого засобу, який як активно діючу речовину містив поліоксиалкіленгуанідин, а саме - полідіоксододекангуанідин фосфат (ПДОДДГ). Дані про відсутність розвитку стійкості у різних видів та родів мікроорганізмів, що відбувався при послідовних пасажах на середовища х зі зростаючими концентраціями вказаного дезінфікуючого засобу, наведені в таблиці 13 і аналогічні результатам, одержаним в прикладі 3. З таблиці 13 видно, що стійкість усіх штамів усі х досліджених мікроорганізмів не зростала під впливом активнодіючої речовини заявленого дезінфікуючого засобу, а саме під впливом ПДОДДГ. Як тільки при пересівах досягали концентрації ПДОДДГ, що становила мінімальну бактерицидну концентрацію, клітини мікроорганізмів не росли, а під мікроскопом спостерігали повну загибель клітин. Результати цього експериментального дослідження свідчать про повну відсутність розвитку резистентності у широкого спектру мікроорганізмів до ДІЇ заявленого дезінфікуючого засобу. Приклад 9 За тих же умов, що й в попередньому прикладі, вивчали можливість розвитку резистентності заявленого дезінфікуючого засобу, який як активнодіючу речовину містить сополімер алкіленгуанідину з оксиалкіленгуанідином, а саме - сополімер хлориду гексаметиленгуанідину з діоксододекангуанідином (СГМДДОДДГ). Отримали такі ж самі результати, що й у попередньому прикладі. Вони наведені в таблиці 13 і аналогічні результатам, одержаним в прикладі 3. Приклад 10 За тих же умов, що й в попередньому прикладі, вивчали можливість розвитку резистентності заявленого дезінфікуючого засобу, який як активнодіючу речовину містив суміш полігексаметиленгуанідину хлориду та полідіоксододекангуанідину фосфа ту (ПГМГ та ПДОДДГ). Отримали такі ж самі результати. Вони наведені в таблиці 13 і аналогічні результатам, одержаним в прикладі 3. Приклад 11 За тих же умов, що й в попередньому прикладі, вивчали можливість розвитку резистентності заявленого дезінфікуючого засобу, який як активнодіючу речовину містив суміш полідіоксододекангуанідину хлориду та сополімер хлориду гексаметиленгуанідину з діоксододекангуанідином (ПДОДДГ та СГМДДОДДГ). Отримали такі ж самі 30 результати. Вони наведені в таблиці 13 і аналогічні результатам, одержаним в прикладі 3. Приклад 12 За тих же умов, що й в попередньому прикладі, вивчали можливість розвитку резистентності заявленого дезінфікуючого засобу, який як активно-діючу речовину містив суміш полігексаметиленгуанідину хлориду та сополімер хлориду гексаметиленгуанідину з діоксододекангуанідином (ПГМГ та СГМДДОДДГ). Отримали такі ж самі результати. Вони наведені в таблиці 13 і аналогічні результатам, одержаним в прикладі 3. Приклад 13 Виконували умови прикладу 2 для визначення тривалості дезінфікуючих властивостей після одноразової обробки поверхонь. Протягом значного проміжку часу експериментальне досліджували ефективність застосування заявленого дезінфікуючого засобу, який як активнодіючу речовину містив поліоксиалкіленгуанідин, а саме полідіоксододекангуанідин фосфат (ПДОДДГ). Як тест-об'єкти використовували скляні та металеві (нержавіюча сталь) пластинки площею 100 см 2, а концентрація робочих розчинів дезінфікуючого засобу складала 0,1мас.% по АДР. Результати мікробіологічного дослідження змивів з поверхонь тест-об'єктів на мікробне обсіменіння (контамінацію) після одноразової обробки цих поверхонь робочим розчином заявленого дезінфікуючого засобу представлені в таблиці 14. З таблиці видно, що поверхні одноразово оброблені дезінфікуючим засобом, який як активнодіючу речовину містив полідіоксододекангуанідин фосфа т (ПДОДДГ), довгий час залишалися знезараженими - мікробіологічні дослідження змивів з поверхонь тест-об'єктів на протязі тривалого часу (22 ¸ 23 доби) не виявляли росту мікроорганізмів. Приклад 14 За тих же умов, що й в попередньому прикладі, експериментальне досліджували тривалість дезінфікуючої дії заявленого дезінфікуючого засобу, який як активнодіючу речовину містив сополімер алкіленгуанідину з оксиалкіленгуанідином, а саме сополімер гексаметиленгуанідин хлориду з діоксододекангуанідином (СГМДДОДДГ). В таблиці 14 представлені результати мікробіологічного дослідження змивів з поверхонь тестоб'єктів на мікробне обсіменіння (контамінацію) після одноразової обробки цих поверхонь робочим розчином заявленого дезінфікуючого засобу. З таблиці 14 видно, що поверхні, одноразово оброблені дезінфікуючим засобом, який як активнодіючу речовину містив СГМДДОДДГ, довгий час залишалися знезараженими - мікробіологічні дослідження змивів з поверхонь тест-об'єктів не виявили росту мікроорганізмів на протязі 18 ¸ 20 діб. Приклад 15 За тих . же умов, що й в попередньому прикладі, експериментальне досліджували тривалість дезінфікуючої дії заявленого дезінфікуючого засобу, який як активнодіючу речовину містив суміш полігексаметиленгуанідину хлориду та полідіоксододекангуанідину фосфа ту (ПГМГ та ПДОДДГ). Результати мікробіологічного дослідження змивів з поверхонь тест-об'єктів на мікробне обсі 31 84593 меніння (контамінацію) після одноразової обробки цих поверхонь робочим розчином заявленого дезінфікуючого засобу представлені в таблиці 14. З таблиці 14 видно, що поверхні, одноразово оброблені дезінфікуючим засобом, який як активно-діючу речовину містив суміш ПГМГ та ПДОДДГ, довгий час залишалися знезараженими - мікробіологічні дослідження змивів з поверхонь тестоб'єктів не виявили росту мікроорганізмів на протязі 20 ¸ 21 діб. Приклад 16 За тих же умов, що й в попередньому прикладі, експериментальне досліджували тривалість дезінфікуючої дії заявленого дезінфікуючого засобу, який як активнодіючу речовину містив суміш полідіоксододекангуанідину хлориду та сополімер хлориду гексаметиленгуанідину з діоксододекангуанідином (ПДОДДГ та СГМДДОДДГ). В таблиці 14 представлені результати мікробіологічного дослідження змивів з поверхонь тестоб'єктів на мікробне обсіменіння (контамінацію) після одноразової обробки цих поверхонь робочим розчином заявленого дезінфікуючого засобу. З таблиці 14 видно, що поверхні, одноразово оброблені дезінфікуючим засобом, який як активно-діючу речовину містив суміш ПДОДДГ та СГМДДОДДГ, довгий час залишалися знезараженими - мікробіологічні дослідження змивів з поверхонь тест-об'єктів не виявили росту мікроорганізмів на протязі 18 ¸ 21 діб. Приклад 17 За тих же умов, що й в попередньому прикладі, експериментальне досліджували тривалість дезінфікуючої дії заявленого дезінфікуючого засобу, який як активнодіючу речовину містив суміш полігексаметиленгуанідину хлориду та сополімер хлориду гексаметиленгуанідину з діоксододекангуанідином (ПГМГ та СГМДДОДДГ). В таблиці 14 представлені результати мікробіологічного дослідження змивів з поверхонь тестоб'єктів на мікроробне обсіменіння (контамінацію) після одноразової обробки цих поверхонь робочим розчином заявленого дезінфікуючого засобу. З таблиці 14 видно що, поверхні, одноразово оброблені дезінфікуючим засобом, який як активнодіючу речовину містив суміш ПГМГ та СГМДДОДДГ, довгий час залишаються знезараженими - мікробіологічні дослідження змивів з поверхонь тест-об'єктів не виявили росту мікроорганізмів на протязі 17 ¸ 20 діб. Приклад 18 З метою визначення тривалості дезінфікуючих властивостей заявленого дезінфікуючого засобу після одноразової обробки поверхонь в умовах лікувально-профілактичної установи, а саме в умовах гінекологічної операційної та перев'язувальної кімнати, застосовували заявлений дезінфікуючий засіб, який, як активнодіючу речовину, містив поліалкіленгуанідин, а саме полігексаметиленгуанідин хлорид (ПГМГ). Дезінфікуючий засіб застосовували для проведення заключної дезінфекції, яку проводили 0,1%-ним робочим розчином дезінфікуючого засобу шляхом одноразового протирання поверхонь. Після дезінфекції кожного дня проводили вологе прибирання 32 чистою водою без застосування дезінфікуючих та миючих засобів. Для визначення ефективності використання заявленого дезінфікуючого засобу при заключній дезінфекції було проведено мікробіологічне дослідження змивів з поверхонь на мікробне обсіменіння - контамінацію об'єктів навколишнього середовища гінекологічної операційної та перев'язувальної кімнати протягом 20 днів, що складало час досліджень, рахуючи з дня одноразової обробки поверхонь. Результати визначення ефективності дезінфекції поверхонь об'єктів зовнішнього середовища в гінекологічному відділенні лікарні заявленим дезінфікуючим засобом представлені в таблиці 15. Мікробіологічні дослідження висівів змивів з поверхонь показали, що у ти х випадках, в яких спостерігався ріст мікроорганізмів (на 6-18 добу після обробки в залежності від природи поверхні та механічного впливу на неї), - це були поодинокі колонії Staphylococus aureus або Bacillus subtilis (в кількості 1 ¸ 4 шт.). 3 таблиці 15 видно, що заявлений дезінфікуючий засіб, який був застосований для заключної дезінфекції в умовах конкретної лікувально-профілактичної установи, а саме гінекологічної операційної та перев'язувальної кімнати, зберігає свою 100%-ну дезінфікуючу активність на протязі 6 діб з дня першої обробки поверхонь для об'єктів навколишнього середовища, які зазнавали значного механічного впливу (підлога) і на протязі 9 ¸ 18 діб і більше - для інших об’єктів навколишнього середовища, поверхня яких мало зазнавала або зовсім не зазнавала механічного впливу. Приклад 19 Для встановлення принципового механізму дії заявленого дезінфікуючого засобу провели контамінацію культурою ста філококу поверхні металевої пластини із нержавіючої сталі розмірами 10см х 10 см, перед тим оброблену робочим розчином дезінфікуючого засобу, що як діючу речовину містив ПГМГ з концентрацією 0,5 мас.%. Після експозиції протягом 30 хв. робили змив та аналізували його на наявність росту мікроорганізмів. Ріст мікроорганізмів був відсутнім. Наступної доби оброблену поверхню мікробіологічною петлею додатково заражали суспензією культури ста філококу з мікробним навантаженням 104 клітин/мл. Через 60 хв. робили змив з поверхні та аналізували його на наявність росту мікроорганізмів. Ріст був відсутнім. Таку додаткову контамінацію обробленої поверхні та мікробіологічний аналіз змивів з поверхні проводили протягом 5 діб. Кожного разу ріст мікроорганізмів був відсутнім. Отримані в цьому прикладі результати, наявність широкого спектру антимікробної дії у заявленого дезінфікуючого засобу на основі полігуанідинів та дані про тривалу, тобто пролонговану, дезінфікуючу дію заявленого засобу, що наведені у прикладах 7, 13 ¸ 18, дають можливість зробити припущення про те, що заявлений дезінфікуючий засіб за принципом своєї дезінфікуючої дії є новим типом дезінфектанту - це так званий дезінфектант -"пастка". Принцип його дії полягає в наступному. Біоцидні властивості полігуанідинів в значній мірі обумовлені наявністю в їх макромолекулах 33 84593 гуанідинових угруп увань. Останні також надають значний позитивний заряд макромолекулам полігуанідинів. Ме ханізм біоцидної дії полімерних гуанідинів частково схожий на дію інших високомолекулярних катіонних біоцидів і полягає в наступному: оскільки мікроорганізми звичайно мають негативний сумарний електричний заряд, вони притягують до себе позитивно заряджені макромолекули полігуанідину, які у такий спосіб зтикаються з мікроорганізмом. Отже, першою стадією взаємодії мікроорганізму та дезінфікуючого засобу на основі полігуанідинів є електростатична взаємодія, результатом якої є утворення безпосереднього контакту між мікроорганізмом та макромолекулами полігуанідину і порушення електричного поля навкруги мікробної клітини, тобто порушення польових умов, за яких йдуть фізіологічні процеси в клітині. Це поле є життєво необхідним фактором для клітини - а саме для внутрішньоклітинних біохімічних процесів. Це пов'язано з тим, що електричне поле клітини фактично є її біологічним полем, тобто, з одного боку, воно є результатом біохімічних реакцій в клітині, коли електрони в атомах молекул, що вступають в біохімічні взаємодії, переходять з однієї орбіталі на іншу і при цьому випромінюють відповідні кванти енергії, створюючи енергетичне електричне поле клітини, яке забезпечує умови проходження реакцій обміну в клітині. З іншого боку, згадане електричне поле клітини є відображенням фізіологічних процесів, що проходять в клітині, і, таким чином, є її інформаційним полем. Тому порушення цього поля викликає значне пригнічення фізіологічних процесів в клітині. Наступною стадією взаємодії полімерних гуанідинів з мікроорганізмами є адсорбція макромолекул полімерного гуанідину на фосфоліпідних мембранах клітин і проходження їх всередину клітини через клітинну мембрану, викликаючи її руйнування. Швидкому перебігу цієї стадії сприяє наявність в хімічній структурі макромолекул полімерних гуанідинів алкиленових та оксиалкіленових ланок, що з'єднують гуанідинові угруп ування. В середині клітини полігуанідин паралізує обмінну функцію ферментів, порушує відтворюючу здатність нуклеїнових кислот і білків, а також пригнічує ди хальну систему. Такий багатофакторний вплив, а саме: порушення польових умов, за яких йдуть фізіологічні процеси в клітині, руйнування клітинних мембран, паралізування обмінної функції ферментів, порушення відтворюючої здатності нуклеїнових кислот та білків, пригнічення дихальної системи - все це і призводить до швидкої загибелі мікроорганізму при обробці поверхні робочим розчином заявленого дезінфікуючого засобу. Крім того, наявність багатофакторного впливу полігуанідинів на мікроорганізм є, на наш погляд, однією з вирішальних умов відсутності розвитку резистентності мікроорганізмів різних родів та видів до дії полігуанідинів. При обробці поверхні робочим розчином заявленого дезінфікуючого засобу значна частина дію 34 чої речовини - полігуанідину, довгий час залишається на поверхні, оскільки полігуанідини - досить стійкі сполуки і не розкладаються, на відміну від АДР відомих дезінфектантів (хлор та його сполуки, перекиси, альдегіди). Хімічна будова макромолекул полігуанідинів (наявність як полярних, так і неполярних груп), а також їх конформаційна рівновага в робочому розчині дезінфікуючого засобу забезпечують надійну сорбцію макромолекул полігуанідинів на оброблюваних поверхнях будь-якої природи таким чином, що адсорбовані макромолекули виявляються рівномірно розташованими в приповерхневому об'ємі у вигляді петельок і вільних кінців, утворюючи при цьому адсорбційний шар. Відомо, що внаслідок конформаційних обмежень, що накладає поверхня, та статистичних конформацій макромолекулярних клубків в розчині, полімерний ланцюг під час адсорбції зв'язується з поверхнею тільки відносно невеликою частиною сегментів. Таким чином, частина сегментів полімерного ланцюга «викладена» на поверхні, а решта - простирається в об'єм розчину у вигляді петельок різної конфігурації або вільних кінців. В останньому випадку макромолекулу, що адсорбована на поверхні, можна розглядати як «якірно» зв'язану з нею. Внаслідок неповного зв'язування сегментів макромолекули поблизу межі розділу виникає приповерхневий шар розчину полімеру, локальна концентрація в якому перевершує середню концентрацію полімеру в об'ємі (в розчині). Це пояснює досить високу біоцидну активність робочих розчинів заявленого дезінфікуючого засобу, навіть при дуже низьких концентраціях діючої речовини в розчині. Оскільки під час сорбції макромолекул полігуанідинів на поверхні при її обробці заявленим дезінфікуючим засобом відбувається неповне зв'язування сегментів макромолекули, то більшість гуанідинових угр уповань у ланцюгах полігуанідину залишається вільною І здатною до ефективної взаємодії з мікроорганізмами. Макромолекули адсорбційного шару, маючи дуже сильний позитивний заряд, навіть не вкриваючи щільно всю оброблену поверхню, надають їй сильний позитивній заряд, яка після цього притягує до себе - начебто "виловлює" - клітини мікроорганізмів, що потрапляють на цю оброблену поверхню, де макромолекули полігуанідину вступають у взаємодію з фосфоліпідними мембранами клітин мікроорганізмів, руйнуючи їх. Оскільки поверхня міцно утримує адсорбційний шар із макромолекул полігуанідину, що утворюється на поверхні після обробки її робочим розчином заявленого дезінфікуючого засобу, адсорбційний шар є досить стійким до механічного впливу, а самі полігуанідини стійкі у часі, нелеткі і не розкладаються, то оброблена таким дезінфікуючим засобом поверхня тривалий час здатна знешкоджувати мікроорганізми, що потрапляють на неї. Тим самим, дезінфікуючий засіб, який ми заявляємо, будучи один раз нанесеним на поверхню, фактично "очікує" потрапляння мікроорганізмів на оброблену поверхню, "виловлює" їх і знешкоджує, захищаючи в такий спосіб оброблену поверхню протягом тривалого часу. 35 84593 Утворений адсорбційний шар з макромолекул полігуанідину на поверхні, що обробляють дезінфікуючим засобом, не є полімерною плівкою у фізичному її розумінні. Адсорбційний шар, який утворюють на продезінфікованій заявленим дезінфікуючим засобом поверхні, є не видимим для ока людини, не змінює кольору та фізичних властивостей поверхні, що обробляють. Внаслідок цього навіть на полірованих металевих поверхнях медичних, стоматологічних та перукарських інструментів при дотриманні технології дезінфікуючої обробки не залишається білого нальоту, який би погіршував зовнішній вигляд інструментів. Приклад 20 Для виготовлення заявленого дезінфікуючого засобу як активнодіючу речовину використовували поліалкіленгуанідин, а саме - полігексаметиленгуанідин хлорид. ПГМГ у кількості 100г заливали 200мл дистильованої води і витримували для набрякання протягом 10год. при кімнатній температурі. Потім додавали ще 200мл дистильованої води і перемішували протягом 1,0 год. Під час перемішування ПГМГ повністю розчиняли у воді з утворенням гомогенного розчину. Вміст компонентів в одержаному дезінфікуючому засобі складав, мас. %: полігексаметиленгуанідин хлорид - 20,0; - Вода - решта до 100, Одержаний дезінфікуючий засіб досліджували на наявність пролонгованого дезінфікуючого ефекту та звикання мікроорганізмів. Для цього виконували умови прикладу 2, але як тест-об'єкти використовували пластинки із нержавіючої сталі, площею 100 см 2 кожна, а концентрація робочого розчину дезінфікуючого засобу по АДР при цьому складала 0,1 мас. %. Обробку поверхні проводили шляхом протирання ганчіркою, змоченою робочим розчином дезінфікуючого засобу. Якщо мікробіологічні дослідження змивів з поверхні протягом 5 діб були негативними, тобто росту мікроорганізмів не спостерігали, то вважали, що досліджуваний дезінфікуючий засіб має пролонговану дезінфікуючу дію. Для встановлення відсутності розвитку резистентності мікроорганізмів до досліджуваного дезінфікуючого засобу виконували умови прикладу 1, але як тест-мікроорганізми використовували Staphylococcus aureus та Candida albicans, а дезінфікуючий засіб як активнодіючу речовину містив поліалкіленгуанідин, саме - полігексаметиленгуанідин хлорид. Дослідження експериментальне підтвердило, що заявлений дезінфікуючий засіб має пролонговані дезінфікуючі властивості та не викликає розвитку резистентності у мікроорганізмів при його застосуванні. Таким чином, одержаний дезінфікуючий засіб має сукупність властивостей: широкий спектр біоцидної активності, пролонговану дезінфікуючу дію після одноразової обробки об’єкта дезінфекції, відсутність привикання (резистентності) щодо широкого спектру мікроорганізмів різних родів та видів, тобто є дезінфікуючим засобом широкого спектру мікробіологічної дії та універсального застосування для забезпечення біобезпеки як у 36 повсякденному житті, так і в епідемічних ситуаціях, а також для ефективної боротьби з внутрішньолікарняними інфекціями. Приклад 21 Для виготовлення заявленого дезінфікуючого засобу, використовували поліалкілен-гуанідин як активно-діючу речовину, а саме - полігексаметиленгуанідин хлорид, а як розчинник використовували водний розчин органічного розчинника, а саме - етилового спирту у співвідношенні вода : спирт =1:5. ПГМГ у кількості 50г заливали 200мл розчинника, закривали ємкість кришкою і витримували для набрякання полімеру протягом 10 год. при кімнатній температурі. Потім додавали ще 250мл розчинника і перемішували протягом 0,5 год. Під час перемішування ПГМГ повністю розчиняли з утворенням гомогенного розчину. Вміст компонентів в одержаному дезінфікуючому засобі складав, мас. %: полігексаметиленгуанідин хлорид - 10,0; водний розчин етилового спирту - решта до 100,0. При вивченні сукупності властивостей одержаного дезінфікуючого засобу виконували умови прикладу 20. Дослідження показали, що одержаний дезінфікуючий засіб має таку ж сукупність властивостей, як у прикладі 20. Приклади 22 - 27 Заявлений дезінфікуючий засіб на основі полігуанідинів у вигляді композиції як допоміжну речовину містить розчинник у концентрації від 0,001 до 70,0 мас. %. При вмісті АДР у складі дезінфікуючого засобу в кількості менше 0,001 мас. % не забезпечують достатню біоцидну активність засобу (приклад 22, таблиця 16). Якщо ж дезінфікуючий засіб містить у своєму складі АДР більше 70,00 мас. %, тоді товарна композиція засобу буде мати густу консистенцію, що утруднює його використання (приклад 23, таблиця 16). При заявленому вмісті АДР у складі дезінфікуючого засобу останній має консистенцію від рідкої до пастообразної, що робить легким його дозування при приготуванні робочих розчинів. Оптимальними концентраціями АДР у складі дезінфікуючого засобу є інтервал концентрацій від 0,001 до 5,00 мас. %, переважно 0,01 - 2,00 мас. % - для препаративних форм, готових до використання (готових робочих розчинів), та 5,00 - 50,0 мас. % - для товарних форм у вигляді концентрату (приклади 24 - 27, таблиця 16). При вивченні сукупності властивостей одержаного дезінфікуючого засобу виконували умови прикладу 20. Дослідження показали, що одержаний дезінфікуючий засіб має таку ж сукупність властивостей, як у прикладі 20. Приклад 28 Для виготовлення заявленого дезінфікуючого засобу, як активнодіючу речовину використовували суміш поліалкіленгуанідинів, а саме - суміш полігексаметиленгуанідину хлориду та полігексаметиленгуанідину фосфа ту у співвідношенні 1:1. 250г заливали 400мл дистильованої води, закри 37 84593 вали ємкість кришкою і витримували для набрякання суміші поліалкіленгуанідинів протягом 10 год. при кімнатній температурі. Потім додавали ще 350мл розчинника і перемішували протягом 0,5 год. Під час перемішування суміш поліалкіленгуанідинів повністю розчиняли з утворенням гомогенного розчину. Вміст компонентів в одержаному дезінфікуючому засобі складав, мас. %: Суміш полігексаметиленгуанідину хлориду та полігексаметиленгуанідину фосфату - 25,0; вода - решта до 100,0. При вивченні сукупності властивостей одержаного дезінфікуючого засобу виконували умови прикладу 20. Додаткові дослідження підтвердили, що одержаний дезінфікуючий засіб має таку ж сукупність властивостей, як у прикладі 20. Приклад 29 Для виготовлення заявленого дезінфікуючого засобу використовували поліоксиалкілен-гуанідин, а саме полі-(4,9-діоксододекангуанідин) та допоміжні речовини - поверхнево-активну речовину поліоксіпропіленполіоксіетиленсополімер та барвник - харчовий синий блискучий Е 133. При цьому 200г полі-(4,9-діоксододекангуанідину) заливали 400мл дистильованої або очищеної води, закривали ємкість кришкою і витримували для набрякання полі-(4,9-діоксододекангуанідину) протягом 6 год. при кімнатній температурі. Потім додавали ще 350мл дистильованої води або очищеної води і перемішували протягом 1,0 год. 100г поліоксіпропілен-поліоксіетиленсополімеру розчиняли при перемішуванні в 200мл дистильованої води; 0,2г барвнику розчиняли при перемішуванні в 100мл дистильованої води. До розчину полі-(4,9-діоксододекангуанідину) поступово доливали при перемішуванні розчин поліоксіпропілен-поліоксіетилен-сополімеру, потім розчин барвника, об’єм суміші доводили водою до 1000мл. Суміш перемішували протягом 30хв. до утворення розчину без розшарування. Вміст компонентів в одержаному дезінфікуючому засобі складав, мас. %: полі-(4,9-діоксадодекангуанідин) - 20,0; поліоксіпропілен-поліоксіетиленсополімер - 10,0; барвник - харчовий синий блискучий Е 133 - 0,02; вода - решта. Одержаний дезінфікуючий засіб має мийні властивості та світло-синє забарвлення. При вивченні сукупності властивостей одержаного дезінфікуючого засобу виконували умови прикладу 20. Дослідження показали, що одержаний дезінфікуючий засіб має таку ж сукупність властивостей, як у прикладі 20. Приклад 30 Для виготовлення заявленого дезінфікуючого засобу як активнодіючу речовину використовували сополімер алкіленгуанідину з оксиалкіленгуанідином, а саме сополімер хлориду гексаметиленгуанідину з діоксододекангуанідином (СГМДДОДДГ), який у кількості 100г заливали 200мл дистильованої води і витримували для на 38 брякання протягом 12 год. при кімнатній температурі. Потім додавали ще 200мл дистильованої води і перемішували протягом 1,0 год. Під час перемішування СГМДДОДДГ повністю розчиняли у воді з утворенням гомогенного розчину. 100г суміші ПАР, а саме суміш поліалкиленоксиду (неонолу) з алкилбензол-сульфонатом натрію (сульфанол) у співідношенні 4:1 - 3:2 розчиняли при перемішуванні в 200мл води; 5,0г ароматизатора пихтової оливи розчиняли при перемішуванні у 100мл води. Потім при перемішуванні до розчину СГМДДОДДГ додавали розчин суміші ПАР, а потім - розчин ароматизатора, після чого доводили об’єм розчину до 1000мл і перемішували до утворення суміші без розшарування. Вміст компонентів в одержаному дезінфікуючому засобі складав, мас. %: сополімер хлориду гексаметиленгуанідину з діоксододекангуанідином (СГМДДОДДГ) -10,0; суміш поліалкиленоксиду (неонолу) з алкилбензолсульфонатом натрію (сульфанол) - 10,0; пихтова олива - 0,5; вода - решта до 100,0. Одержаний дезінфікуючий засіб має миючі властивості та запах пихти. При вивченні сук упності властивостей одержаного дезінфікуючого засобу виконували умови прикладу 20. Дослідження показали, що одержаний дезінфікуючий засіб має таку ж сукупність властивостей, як у прикладі 20. Приклади 31-35 При наявності ПАР або суміші ПАР у складі заявленого дезінфікуючого засобу останній має мийні властивості, що забезпечує більш якісну дезінфекцію при обробці забруднених поверхонь. Заявлений дезінфікуючий засіб на основі полігуанідинів як ПАР містив у своєму складі 2,0 мас.% сульфанолу (приклад 31, таблиця 17). Одержаний дезінфікуючий засіб мав миючі властивості і забезпечував якісну дезінфекцію забруднених поверхонь. При відсутності ПАР або суміші ПАР в складі дезінфікуючого засобу не забезпечується якісна дезінфекція сильно забруднених поверхонь, особливо ліпідами (приклад 32, таблиця 17). Вміст ПАР або суміші ПАР в складі дезінфікуючого засобу вище заявлених 25 мас. % недоцільна, оскільки при високих концентраціях може відбуватись процесі міцелоутворення ПАР і значне зниження поверхневої активності розчинів та їх миючих властивостей (приклад 33, таблиця 17). Оптимальними концентраціями ПАР або суміші у складі дезінфікуючого засобу є 1,0 -20,0%, переважно 5,0 - 15,0% (приклади 34,35, таблиця 17). Дезінфікуючі засоби, що містили у своєму складі ПАР, одержані згідно прикладів 31, 33, 34, досліджували на наявність заявленої сукупності властивостей. При цьому виконували умови прикладу 20. Експериментальні дослідження показали, що одержані згідно прикладів 31, 33, 34 дезінфікуючі 39 84593 засоби мають таку ж сукупність властивостей, як у прикладі 20. Приклад 36 Для виготовлення заявленого дезінфікуючого засобу використовували суміш полігексаметиленгуанідину хлориду та полідіоксододекангуанідину хлориду у співвідношенні 8 : 2 і допоміжні речовини: комплексоутворювач - динатрієву сіль етилендиамінтетраоцтової кислоти (ДНЕДТОК), та барвник - метиленовий голубий. 200г суміші ПГМГ та ПДОДДГ заливали 600мл дистильованої водиі витримували 8 год. для набрякання. Потім додавали ще 200мл дистильованої води і перемішували протягом 1,0 год. Під час перемішування суміш полігуанідинів, а саме: суміші ПГМГ та ПДОДДГ, повністю розчиняли у воді з утворенням гомогенного розчину. До розчину суміші полігуанідинів (ПГМГ та ПДОДДГ) додавали 50г ДНЕДТОК і перемішувал до повного розчинення. Після цього 1г ароматизатора - лимонної косметичної віддушки, ступово додавали до попереднього розчину при постійному перемішуванні до повного розчинення. До одержаної суміші додавали 0,1г барвника, доводили об’єм суміші водою до 1000мл і перемішували до повного розчинення і утворення суміші без розшарування. Вміст компонентів в одержаному дезінфікуючому засобі складав, мас. %: ПГМГ та ПДОДДГ - 20,0; ДНЕДТОК - 5,0; ароматизатор - лимонна косметична віддушка -0,1; барвник - метиленовий голубий - 0,01; вода - решта до 100,0. Одержаний дезінфікуючий засіб має лимонний запах та голубе забарвлення і зберігає свої біоцидні властивості при використанні для приготування робочих розчинів засобу у воді з підвищеною жорсткістю. При вивченні сукупності властивостей одержаного дезінфікуючого засобу виконували умови прикладу 20. Експериментальні дослідження показали, що одержаний дезінфікуючий засіб має таку ж сукупність властивостей, як у прикладі 20. Приклад 37 Для виготовлення заявленого дезінфікуючого засобу використовували поліалкіленгуанідин, а саме - полігексаметиленгуанідин хлорид (ПГМГ) та допоміжні речовини: суміш комплексоутворювачів - суміш динатрієвої солі етилендиамінтетраоцтової кислоти (ДНЕДТОК) та триетаноламіну у співвідношенні 7 : 3, та барвник - кислотний ярко-синій антрахіноновий. 250г ПГМГ заливали 500мл дистильованої води і витримували 7 год. для набрякання ПГМГ. Потім додавали ще 200мл дистильованої води і перемішували протягом 1,0 год. Під час перемішування ПГМГ повністю розчинявся у воді з утворенням гомогенного розчину. 40г суміші комплексоутворювачів (ДНЕДТОК та триетаноламін) додають при перемішуванні до розчину ПГМГ, продовжуючи перемішувати до повного розчинення. До одержаної суміші додають 1г барвника, доводять об’єм суміші водою до 40 1000мл і перемішують до повного розчинення і утворення суміші без розшарування. Вміст компонентів в одержаному дезінфікуючому засобі складав, мас. %: ПГМГ - 25,0; ДНЕДТОК та триетаноламін - 4,0; барвник - кислотний яркосиній антрахіноновий - 0,1; вода - решта до 100,0. Одержаний дезінфікуючий засіб зберігає свої біоцидні властивості при використанні води з підвищеною жорсткістю для приготування робочих розчинів і світло-синє забарвлення. При вивченні сукупності властивостей одержаного дезінфікуючого засобу виконували умови прикладу 20. Дослідження показали, що одержаний дезінфікуючий засіб має таку ж сукупність властивостей, як у прикладі 20. Приклади 38-43 Заявлений дезінфікуючий засіб як допоміжну речовину містив у своєму складі 15,0 мас. % комплексоутворюючої сполуки - ТНЕДТОК (приклад 38, таблиця 18). Наявність у складі заявленого дезінфікуючого засобу комплексоутворюючої сполуки або суміші комплексоутворюючи х сполук гарантує імовірність зберігання високих дезінфікуючих властивостей робочих розчинів у тому випадку, коли як розчинник використовують воду з високим ступенем жорсткості. При відсутності комплексоутворюючої сполуки або суміші комплексоутворюючих сполук у складі деззасобу знижується імовірність збереження дезінфікуючих властивостей робочих розчинів у випадку використання як розчинника жорсткої води (приклад 39). При вмісті комплексоутворюючої сполуки в складі дезінфікуючого засобу 28 мас. %, тобто вище заявлених 25,0 мас. %, дезінфікуючі властивості робочих розчинів у жорсткій воді зберігаються, але це недоцільно з економічної точки зору (приклад 40, таблиця 18). Оптимальним інтервалом вмісту комплексоутворюючої сполуки або суміші комплексоутворюючих сполук у складі заявленного дезінфікуючого засобу є 1,0 ¸ 10,0 мас. %, переважно 3,0 ¸ 8,0 мас. % (приклади 41 - 43, таблиця 18). Дезінфікуючі засоби, що містили у своєму складі комплексоутворюючу сполуку, досліджували на наявність заявленої сукупності властивостей. Дезінфікуючі засоби, що містили у своєму складі комплексоутворюючі сполуки або суміш комплексоутворюючи х сполук, досліджували на наявність заявленої сукупності властивостей. При цьому виконували умови прикладу 20. Експериментальні дослідження показали, що вони мають таку ж сукупність властивостей, як у прикладі 20. Приклад 44 При наявності барвника у складі заявленого дезінфікуючого засобу останній має колір цього барвника. При відсутності барвника дезінфікуючий 41 84593 засіб або не має кольору, або має невиразний жовтуватий або ж рудий колір. Заявлений дезінфікуючий засіб як допоміжну речовину містив барвник трифенілметановий кислотний ярко-голубий в кількості 0,05 мас. %. Одержаний дезінфікуючий засіб мав голубий колір середньої інтенсивності. При підвищенні вмісту барвника в складі дезінфікуючого засобу ви ще заявлених 0,5 мас. % колір засобу стає дуже інтенсивним. Оптимальним концентраційним інтервалом для барвника у складі заявленного дезінфікуючого засобу є 0,005 ¸ 0,1 мас. %. При такому вмісті барвника у складі дезінфекційного засобу останній має колір барвника середньої інтенсивності, приємний для ока людини. Дезінфікуючі засоби, що містили у своєму складі барвник, досліджували на наявність заявленої сукупності властивостей. При цьому виконували умови прикладу 20. Експериментальні дослідження показали, що вони мають таку ж сукупність властивостей, як у прикладі 20. Приклад 45 При наявності ароматизатора у складі заявленого дезінфікуючого засобу останній має запах цього ароматизатора. При відсутності ароматизатора дезінфікуючий засіб або не має запаху, або має незначний специфічний запах. Заявлений дезінфікуючий засіб як допоміжну речовину містив в своєму складі до 0,01 мас. % ароматизатора - пихтової оливи. Одержаний дезінфікуючий засіб мав запах пихти слабкої інтенсивності. При підвищенні вмісту ароматизатора в складі дезінфікуючого засобу вище заявлених 2,5 мас. % запах дезінфікуючого засобу стає дуже різким. Оптимальним концентраційним інтервалом для ароматизатора у складі заявленного дезінфікуючого засобу є 0,01 ¸ 1,0 мас. %. При такому вмісті ароматизатора у складі дезінфікуючого засобу останній має приємний запах від слабкої до середньої інтенсивності. Дезінфікуючі засоби, що містили у своєму складі ароматизатор, досліджували на наявність заявленої сукупності властивостей. При цьому виконували умови прикладу 20. Експериментальні дослідження показали, що вони мають таку ж сукупність властивостей, як у прикладі 20. Приклад 46 Із дезінфікуючого засобу, одержаного за прикладом 28, готували робочий розчин з концентрацією діючої речовини 0,1 мас. % і залишали на 1 год. З поверхонь, які підлягають дезінфікуючій обробці, видаляли бруд звичайними засобами. Після цього робочим розчином змочували ганчірку і протирали поверхні, які підлягали дезінфекції. Експозиція складала 30 і 60 хв. Обробку поверхонь, які підлягали механічному впливу (підлога, підвіконня, двері), повторно протирали ганчіркою, змоченою робочим розчином дезінфікуючого засобу, через 5 днів. Інші поверхні (стіни, поверхні меблів, прилади) - протирали через 10 ¸ 30 діб. Оскільки дезін 42 фікуючий засіб, який використовували, не леткий і не токсичний, дезінфекцію проводили в присутності людей і після дезінфекції оброблені поверхні не змивали. Щоденне вологе прибирання проводили чистою водою без застосування інших дезінфікуючих та/або миючих засобів. Мікробіологічний аналіз змивів робили з підвіконня на 5-й день та зі стін на 10-й день після першої обробки робочим розчином дезінфікуючого засобу. Дослідження показали, що у всіх випадках росту мікроорганізмів не виявили. Дані, викладені в цьому прикладі, були отримані внаслідок експериментальних досліджень, проведених для реєстрації дезінфікуючого засобу в МОЗ України. Приклад 47 Із дезінфікуючого засобу, одержаного за прикладом 27, готували робочі розчини з концентрацією діючої речовини 0,05; 0,1; 0,5; 1,0 и 2,0 мас. % кожний за 0,5 год., 1 год., 5 днів, 1 місяць, б місяців, 1 рік, 1,5, 2,0, 2,5 та 3 роки до їх використання. Робочі розчини після приготування і до використання зберігали в умовах мікробіологічної лабораторії. У вказані терміни, тобто через 0,5 год., 1 год., 5 днів, 1 місяць, 6 місяців, 1рік, 1,5, 2,0, 2,5 та через 3 роки визначали наявність біоцидної активності в робочих розчинах дезінфікуючого засобу шляхом визначення мінімальної бактерицидної концентрації діючої речовини дезінфікуючого засобу. Результати визначення наведені в таблиці 19, з якої видно, що чим більша концентрація діючої речовини в робочих розчинах, тим довше зберігається біоцидна активність робочих розчинів. Термін зберігання робочих розчинів складає від 1,5 до 3-х років (термін спостережень). Наприкінці терміну зберігання робочі розчини, вказані в таблиці 19, досліджували на наявність сукупності заявлених властивостей. При цьому виконували умови прикладу 20. Експериментальні дослідження показали, що, в залежності від концентрації робочі розчини дезінфікуючого засобу, приготовлені за 0,5 год., 1 год., 5 днів, 1 місяць, 6 місяців, 1 рік, 1,5, 2,0, 2,5 та 3 роки до використання, в кожному випадку мають таку ж сукупність властивостей, як у прикладі 20. Дані, викладені в цьому прикладі, були отримані внаслідок експериментальних досліджень, проведених для реєстрації дезінфікуючого засобу в МОЗ України. Приклад 48 Для боротьби з внутрішньо-лікарняною інфекцією був застосований заявлений дезінфікуючий засіб, який як активнодіючу речовину містив поліалкіленгуанідин, а саме - полігексаметиленгуанідин хлорид. Концентрація діючої речовини у використаному дезінфікуючому засобі складала 25,0 мас. %. Дезінфікуючий засіб застосовували для ліквідації стійких вогнищ сальмонельозу в двох дитячих стаціонарах. Штами S.Typhimurium та S.Enterinidis, що викликали спалах сальмонельозу, були стійкими до традиційних концентрацій таких 43 84593 дезінфікуючих засобів, як хлорамін, хлорантоїн, перекис водню та четвертинні амонієві сполуки, внаслідок чого дезінфікуючі заходи були неефективними, а дезінфікуючі засоби, що використовували, були шкідливими для хворих та їх о точення, до того ж економічно невигідними. В цій ситуації був застосований заявлений дезінфікуючий засіб, який як АДР містив поліалкіленгуанідин, а саме - полігексаметиленгуанідин хлорид. З поверхонь, які підлягали дезінфікуючій обробці, видаляли бруд звичайними засобами. Після цього робочим розчином, що містив 0,25 мас. % діючої речовини, змочували ганчірку і протирали поверхні, які підлягали дезінфекції. Експозиція складала 10 ¸ 30 хв. Обробку поверхонь, які підлягали механічному впливу (підлога, підвіконня, двері), повторно протирали ганчіркою, змоченою робочим розчином дезінфікуючого засобу, через 5 діб. Інші поверхні (стіни, поверхні меблів, прилади) - протирали через 10 діб. Оскільки дезінфікуючий засіб, який використовували, нелеткий і нетоксичний, дезінфекцію проводили в присутності людей і після дезінфекції оброблені поверхні не змивали. Щоденне вологе прибирання проводили чистою водою без застосування інших дезінфікуючих та/або миючих засобів. Крім того, для гарантованого переривання ланцюга передачі інфекції від джерела до пацієнтів спецодяг лікарів та обслуговуючого персоналу (халати, маски) обробляли 0,1%-ним робочим розчином шляхом аерозольного зрошення з наступним висушуванням або додаванням деззасобу до води при споліскуванні спецодягу після прання. Мікробіологічний аналіз змивів з підвіконня та підлоги робили на кожний 5-й день, а зі стін та поверхонь предметів навколишнього середовища (прилади, холодильники, ліжка та інш.)- на кожний 10-й день після обробки робочим розчином дезінфікуючого засобу. Жодного разу протягом місяця (час спостережень) не спостерігали росту мікроорганізмів. Таким чином, застосування заявленого дезінфікуючого засобу допомогло швидко ліквідувати спалахи ВЛІ - сальмонельозу, викликаних штамами S.Typhimurium та S.Enterinidis, які були резистентними до дезінфектантів, якими проводили дезінфікуючу обробку в цих дитячих лікувальних установах. Приклад 49 Періодичність використання заявленого дезінфікуючого засобу (його робочих розчинів) складає від 3 до 365 днів і залежить від фізичної та хімічної природи поверхні, що дезінфікують, від концентрації робочих розчинів. Із дезінфікуючого засобу, одержаного за прикладом 20, готували робочі розчини з концентрацією діючої речовини відповідно 0,05; 0,1; 0,5; 1,0; 2,0 та 5,0 мас. % . В умовах лабораторії цими робочими розчинами обробляли тест-об’єкти у вигляді пластинок із нержавіючої сталі, скла та дерева з лакофарбним покриттям площею 100см кожна. Обробку поверхні проводили шляхом протирання ганчіркою, змоченою робочим розчином дезінфікуючого засобу. 44 Поверхні обробляли з різною періодичністю від 3 до 365 днів (таблиця 20). Мікробіологічні дослідження змивів з поверхні робили перед черговим застосуванням дезінфікуючого засобу. Як випливає з таблиці 20, хімічний та фізичний стан поверхні, що обробляють, впливає на частоту дезінфікуючої обробки заявленим дезінфікуючим засобом. Періодичність застосування дезінфікуючого засобу обумовлена концентрацією робочого розчину, хімічним та фізичним станом поверхні, що обробляють. З даних таблиці 20 видно, що заявлений дезінфікуючий засіб використовують тим частіше, чим менша концентрація робочого розчину. Якщо поверхня зазнає фізичного впливу і її обробляють робочим розчином дезінфікуючого засобу з низькою концентрацією активнодіючої речовини, наприклад, 0,05%, тоді дезінфікуючу обробку необхідно проводити частіше (один раз на 3-5 днів). Коли поверхня не зазнає механічного впливу і робочий розчин містить 0,1% і більше активнодіючої речовини, тоді обробку поверхні можна робити значно рідше (один раз на 10 - 15 - 20 - 30 діб і рідше). Дані, викладені в цьому прикладі, ще раз підтверджують, що заявлений дезінфікуючий засіб діє як дезінфектант-пастка. Таким чином, заявниками теоретично обгрунтовано та практично встановлено, що технічний результат від використання заявленого дезінфікуючого засобу полягає в тому, що його використання забезпечує не тільки швидку загибель мікроорганізмів і не викликає їхнього звикання до дії дезінфікуючого засобу, але й гарантує тривалий надійний антимікробний захист обробленої поверхні, що перешкоджає розмноженню мікроорганізмів не менш, ніж на протязі 6 діб після використання засобу. Технічний результат від використання запропонованого дезінфікуючого засобу полягає в тому, що він може бути використаний для дезінфекції різних об'єктів, в тому числі поверхонь приміщень, приладів, санітарно-технічного обладнання, предметів догляду за хворими, білизни, посуду, при дезінфекції, в тому числі суміщеної з передстерилізаційним очищенням, виробів медичного призначення, при інфекціях бактеріальної та вірусної етнології в лікувально-профілактичних та дитячих закладах, а також для профілактичної дезінфекції на комунальних об'єктах, підприємствах комунального харчування, продовольчої торгівлі, в харчовій промисловості, населенням - в побуті. Треба особливо підкреслити, що наведений в описі винаходу принцип дії заявленого дезінфікуючого засобу робить його дуже важливим в сучасних умовах можливих актів біотероризму проти населення. І хоча сам дезінфікуючий засіб при безпосередньому впливі на спори спороутворюючих патогенних мікроорганізмів, що можуть бути застосовані для біотерористичних цілей, наприклад спори сибірської виразки, спочатку діє слабко, не знищуючи спори цілком, тому що спори мікроорганізмів є природно стійкими до дезінфектантів, однак його тривала, пролонгована дія і вище описаний механізм дії як "біоцидної пас 45 84593 тки" ефективно спрацьовує при проростанні спор і розвиткові вегетативних форм спорових мікроорганізмів на зараженій поверхні, ефективно знешкоджуючи їх. Ця властивість заявленого дезінфікуючого засобу є важливою також і для обробки спецодягу (халати, маски і ін.) персоналу, який має контакт із зараженими об'єктами. Обробка спецодягу 0,1%ним робочим розчином шляхом аерозольного зрошення з наступним висушуванням або додаванням деззасобу до води при споліскуванні спецодягу після прання надає тканині антисептичних властивостей, які зберігаються тривалий час завдяки пролонгованій дезінфікуючій дії заявленого засобу, ефективно знезаражуючи мікрофлору і сприяючи перериванню ланцюга передачі інфекції від джерела до пацієнта у вогнищі ін фекції. Заражений спецодяг медперсоналу та поверхні об'єктів навколишнього середовища в лікувальних закладах є важливою ланкою в ланцюзі внутрішньо-лікарняного (артифіціального) механізму передачі інфекції. Надійне знезараження заявленим дезінфікуючим засобом з пролонгованими властивостями спецодягу та поверхонь навколишнього середовища запобігає циркуляції інфекції у вогнищі і попереджує утворення стійких (резистентних) штамів мікроорганізмів. Це сприятиме вирішенню проблеми виникнення ВЛІ. Крім того, використання заявленого дезінфікуючого засобу із принципово новим механізмом дії (дезінфектант - "біоцидна пастка"), що має тривалу дезінфікуючу дію (поверхня завжди захищена і готова до атак мікроорганізмів - стан постійної готовності) вкрай важливо для забезпечення біобезпеки як у повсякденному житті, так і в епідемічних ситуаціях, особливо в екстремальних умовах терористичного чи військового застосування біологічної зброї. Використання протягом тривалого часу одного із варіантів складу заявленого дезінфікуючого засобу, що містить як діючу речовину полігуанідин, а саме полігексаметиленгуанідин гідрохлорид, підтвердило його високу біоцидну активність, а також властивість не викликати розвитку резистентності мікроорганізмів та пролонговану дезінфікуючу дію. За весь час його застосування не було жодного випадку виділення клінічного мікробного ізолянта, резистентного до заявленого дезінфікуючого засобу, що свідчить про відсутність виникнення резистентності у епідеміологічно показових мікроорганізмів, що, за звичай, розповсюджені у лікувально-профілактичних закладах України. Заявлений дезінфікуючий засіб на основі полігуанідинів та дезінфікуючий засіб у вигляді композицій, що містять різні варіанти складу заявленого дезінфікуючого засобу можуть бути вироблені та застосовані під такими комерційними назвами: Гембар, Гуацид, Тетрацид, Пентацид, Сандез, Дарсепт, Біовіт, Вітадар, Дезоприм, Примадез, Неодез та інші. Джерела інформації, які прийняті до уваги: 46 1. Дезинфекционные средства. Под редакцией Иванова С.И. и Шандалы М.Г. Часть 1. Справочника в двух томах. Выпуск 3-й. Том 1, М., 2001 [1]; 2. М.Г.Шандала. Состояние и перспективы разрабтки новых дезинфектологических технологий. - В ж. "Эпидемиология и инфекционные болезни", №2, 2000, С. 4 -7 [2]; 3. Ґудзь О.В.Тенденції развитку дезінфектолгії в Україні.- В ж. "Провізор", 1998, № 12 [3]; 4. В.П. Никольская, О.Б.Пудова, В.В. Буянов, К.В. Тито ва, И.П. С упрун. Проблемы дезинфекции и деконтаминации в системе биологической защиты и профилактики инфекционных заболеваний. В ж. "Вестник Российской академии медицинских наук", 2000, №1, с. 3-6 [4]; 5. Дезинфекционные средства.Справочник. Часть 1. Под ред. А. А. Монисова, М.Г. Шандалы М.: ТОО «Paporz», 1996, 176 с. [5]; 6. В.В. Шкарин. Эволюция эпидемиологии. Что впереди? - В ж. "Эпидемиология и инфекционные болезни", № 4, 2001, С. 7-10 [6]; 7. Н.С.Морозова. Дезинфектологические аспекты в проблеме внутрибольничных инфекций - В ж. "Вестник ассоциации дезінфекционистов Украины", № 6, 2002, С. 4 [7]; 8. Ковалева Е.П., Семина Н.А. Внутрибольничные инфекции как отражение уровня и структуры инфекционной заболеваемости населения России. ІІ Всероссийская научно-практическая конференция с международным участием: Тез. докл. - М., 1999, С. 115- 116 [8]; 9. П.А.Гембицкий и др. Сополимер солей алкиленгуанидина в качестве биоцидного флокулянта. - В авт. св. № RU-1728256 Ai, 27.12.1988. - [9] 10. П.А.Гембицкий и др. Антисептическое средство для желатинных систем при изготовлении галогенсеребрянных фотографических материалов. - В патенті РФ № RU-2006053 від 09.01.92 [10]. 11. В.А.Лопырев и др. Применение солей полигекса- метиленгуанидина в качестве препаратов, обладающих антимикробной активностью по отношению к анаэробной и смешанной инфекции. - В патенті РФ № RU-2143905 С1, від 27.12.1988. Прототип - 1-[11]. 12. И.Ж.Лулле и др. - Медицинский препарат противоопухолевого действия. – В міжнародній заявці PCT/SU82/00020 від 21 червня 1982 р. (міжнародна публікація WO 84/00105 від 19.01.84)-[12]. 13. П.А.Гембицкий и др. Дезинфицирующее средство при туберкулезе. - В патенті РФ № RU2176523 С1, 10.09.1999.-ПРОТОТИП-2 [ІЗ]. 14. Светлов Д.А. и др. Композиция, обладающая биоцидным действием, и способ ее получения. - В патенті РФ № RU 2118175 С1, від 27.08.98. - Прототип - 3 [14]. 15. Балалыкин Д.А. Дезинфицирующее средство и способ обработки предметов, в том числе медицинского назначения. - В патенті РФ RU2251435 Сі, 10.05.2005. - [15]. 16. ЗарицькийА.М. Дезінфектологія. - Житомир, ПП "РУТА", 2001, с.47-48- Прототип-3 [16]; 17. Смайбер Р., Криг Н. Методы общей бактериологии. Под ред. Герхард Ф.И. и др. - М., 1983, т. 3, с. 8-97 [17]; 47 84593 18. Справочник по микробиологическим методам исследований. Под ред. М.М.Бергер. - М., 1982 [18]; 19. Руководство по микробиологии и эпидемиологии. Под редакцией И.М. Великанова - М., 1937 [19]. 20. Плохинский Н.В. Биометрия,-1964 [20]; 21. Компютерная программа "Statistica 5.5" [21]; 22. Козлов Ю.А. Питательные среды в медицинской микробиологии. - М., 1950 [22]; 23. Ждан-Пушкина В.Н. Основы роста культур микроорганизмов. - М., 1993, 87 с.[23]; 24. Елепов В.А. Химическая микробиология. М., Изд-во "Мир", 1989, 220 с. [24]; 25. Афиногенова Г.Е. Метод определения активности дезинфектантов и антисептиков. Методическое пособие. - Санкт-Петербург, 2000 [25]; 26. Пхакадзе ТА. Антисептические и дезинфицирующие средства в профилактике эпидемий. - В ж. Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия. 2000, № 1, с. 42-47 [26], 27. Сомов Г.П., Бузолева Л.С., Бурцева Т.И. Изучение механизмов адаптации патогенных микроорганизмов к факторам окружающей среды. - В ж."Биол. эксп. биол. и медицины", 1999, т. 128, № 9, с. 19-27 - [27]; 28. Оценка способности лекарственных средств вызывать зависимость. Доклады научной группы ВОЗ. - Женева, ВОЗ, 1977, 57 с. [28]; 29. Лабораторные методы исследования клеток. Справочник. Под ред. Меньшикова В.В. -М., Медицина, 1987, 366 с. [29]; 30. Смирнов И.В. Возбудители бактериальных инфекций у человека. Клиническая мікробиология и антимикробная терапия. 2000, № 2, т.2, 412с. [30]; 31. Перт С. Основы культивирования микроорганизмов. - М., Мир, 1978, 386 с. [31]; 32. Методы молекулярной генетики. - М., Мир, 1994, 258 с. [32]; 33. Стент А. Био химическая генетика. - М., Мир, Пер. с англ., 1980, 418 с. [33]; 34. Ауэрбах Ш. Проблемы мутагенеза. - М., Изд-во "Мир", 1978, 348 с. [34]; 48 35. Hollaender A. et. al. Chemical mutagenes. Principes and methods for their Detection. - New York - London, Plenum pres, 1973 [35]; 36. Wosawa A. Properties of a membrane attached from of the folded chromosome of E.coli. - J. Мої. Biol., 1974, 82, .#1, p. 91-105 [36]; 37. Delic V., Hopwood D.A., Friend E.J. Mutagenesis by N-methyI-N-nitro-N-nitrosoguanidine (NTG) in Streptomyces coelicolor.- Mutat. Res., 1970, W.9, .#2, p. 167-182 [37]; 38. Konichkova-Radochova M., Maiek I. The mutagenic effect of nitrosoguanidine on Mycobacterium phlei PA. - Folva microbial., 1969, 14, #3, p. 201207 [38]; 39. Chattoo В. Sinha U. Mytagenic activity of Nmethyl-N-nitro-N-nitrosoguanidine (NTG) and Nmethyl-N-nitrosourea (NMU) in Aspergillus nidulans.Mutat.Res., 1974,23,# 1, p.41-49 [39]; 40. Kimball R.E., Setlow J.K. Mutation induced in Haemophilus influenzae by transformation with nitrosoguanidine-treated DNA.-Mut.Res., 1972, 14, #2, p.137-146 [40]; 41. Lederberg J., Lederberg Е. Replica plating and indirect selection of bacterial mutants. - J. Bacteriol., 1962, v. 63, №3, p. 399-406 [41]; 42. Guerola N., Ingraham J.L., Cerda-Olmedo Е. Induction of crossed linked multition mutation by nitrosoguanidine.-Nature, New Biol., 1971, 230, N 12, p. 122-125 [42]; 43. Oeschger M.P., Berlin M.K. A simple procedure for localized mutagenesis using nitrosoguanidine. - Мої. and Gen. Genet, 1974, 134, N 1, p. 77-83 [43]; 44. Мацелюх Б.П. Рекомбинация и репликация ДНК бактерий и актеномицетов. - Киев, Наукова думка, 1979, 286 с. [44]; 45. Ворновицкая Г.И. О механизме действия дезоксиаденозина на синтез нуклеиновых кислот в раковой клетке. - В ж. „Биохимия", 1998, т. 33, с.1192-1196 [45]; 46. Коротяев А.И. Содержание ДНК-мутантов E.coli, резистентных к рифампицину и налидиксовой кислоте.-В ж. "Микробиология", 1982, т. 51, №6, С. 983-987 [46]; 47. Миллер Д. Эксперименты в молекулярной генетике. - М., Изд-во "Мир", 1976, 360 с. [47]. Таблиця 1 Дезінфікуючий засіб на основі полігуаніоинів, дезінфікуючий засіб у вигляді композиції, способи їх одержання та використання Штами мікроорганізмів Прокаріоти Echerichia coli Salmonella typhimurium Shigella sonne Staphylococcus aureus 209 Staphylococcus albus Streptococcus pyogenus тип 1 Streptococcus pyogenus тип 2 Streptococcus pyogenus тип 3 Джерело отримання Музей живих культур Інституту епідеміології та інфекційних хвороб ім. Л.В. Громашевського АМН України Від хворих при проведенні досліджень по вивченню ВЛІ 49 84593 50 Продовження таблиці 1 Bacillus cereus Bacillus micoides Bacillus antracis Bacillus subtilis Bacillus mesentericus Corinebacterium diphteriae PV-8 Corinebacterium diphteriae (токе) Нижчі еука- Actinomyces olivaceus ріоти Aspergillus niger Candida tropicalis Candida krusei Candida albicans Музей живих культур Інституту епідеміології та інфекційних хвороб ім. Л.В. Громашевського АМН України Інститут загальної мікробіології АН Росії Від хворих на дифтерію Інститут мікробіології та вірусології ім. Д.К.Заболотного НАН України Від хворих на кандідози Таблиця 2 Дезінфікуючий засіб на основі полігуанідинів, дезінфікуючий засіб у вигляді композиції, способи їх одержання та використання Інтервали концентрацій, які використовували при вивченні адаптаційних змін мікроорганізмів до дезінфектантів, мкг/мл Штами мікроорганізмів Глутаровий Бензалконіум Хлорамін Хлорне вапно ПГМГ, мкг/мл альдегід хлорид Echerichia coli 0,1±0,01 0,01±0,001 0,01±0,001 - 0,1±0,01 - 0,75 0,01±0,001 8,0±0,6 5,0±0,03 2,5±0,2 ±0,06 0,095±0,005 Salmonella typhimurium 0,1±0,01 - 8,0 0,01±0,001 0,01 ±0,001 - 0,1±0,01 - 0,75 0,01 ±0,001 ±0,6 5,0±0,03 1,5±0,03 ± 0,06 0,095± 0,005 Shigella sonne 0,1 ±0,02-8,0 0,01 ±0,01-4,0 0,01±0,001 - 0,1 ±0,01-0,58 0,01± 0,001 ±0,7 ±0,03 1,0±0,015 ±0,08 0,09±0,01 Staphylococcus aureus 0,1±0,015 - 5,4 0,01 ±0,01-5,1 0,01 ±0,001 0,01 ±0,001- 0,05±0,01 -0,25± ± 0,2 ±0,2 5,0 ± 0,3 1,45±0,02 0,02 Staphylococcus albus 0,1 ±0,01-5,0 0,01 ±0,01-5,1 0,01 ±0,001 0,01 ±0,0010,05±0,01 - 0,33 ±0,3 ±0,2 4,5 ± 0,2 1,5±0,01 Streptococcus pyogenes 0,15 ±0,01 - 5,5 0,15 ±0,01-5,2 0,05 ±0,01 - 5,0 0,01 ±0,01-2,6 ± 0,05 ±0,01 -0,25 тип 1 ± 0,3 ±0,2 ± 0,2 0,03 Streptococcus pyogenes 0,15±0,02 - 5,9± 0,15 ±0,01-5,1 0,05 ±0,01 - 4,0 0,01 ±0,01-2,4 ± 0,05±0,01 - 0,25 тип 2 0,3 ±0,15 ± 0,2 0,03 Streptococcus pyogenes 0,15 ±0,02 - 6,2 0,15 ±0,02 - 4,5 0,05 ±0,01 - 4,2 0,01 ±0,01-13,0 0,05 ±0,01 -0,25 тип 3 ± 0,4 ±0,2 ± 0,3 ± 1,7 Actinomyces olivaceus 1,0 ±0,1-19,0 1,0±0,1 -40,0± 0,5 ±0,01 - 30,0 1,0 ±0,15-13,6 ± 0,5±0,01 -10,0 ±0,8 2,7 ± 2,2 1,6 ± Aspergillus niger 1,0±0,2-21,0 1,0 ±0,1 - 45,0 0,5 ± 0,02 - 9,2 0,5 ± 0,02 -6,50 0,5±0,01 -8,3 ±0,8 ±3,2 1,1 ± 0,3 Bacillus cereus 0,2 ±0,02-6,9 0,2 ± 0,02 - 9,5 0,3 ± 0,002 - 6,4 0,1 ±0,01-5,50 0,3 ±0,01-1,60 ±1,1 ± 0,6 ± 0,6 ±0,6 Bacillus mesentericus 0,2 ± 0,02 - 5,9 0,2 ±0,02-9,7 ± 0,3 ± 0,002 - 0,1 ±0,01 -5,50 0,3 ±0,01-1,60 ±0,6 0,5 6,2± 0,6 ±0,6 Bacillus micoides 0,2 ±0,02-6,0 0,2 ±0,02-9,1± 0,5 ± 0,02 - 8,0± 0,1 ±0,01-8,20 ± 0,3 ±0,01 - 1,61 ±0,6 0,6 0,6 0,6 Bacillus autracis 0,2 ± 0,02 - 7,2 0,2 ± 0,02 - 12,4 0,3 ± 0,02 - 9,2± 0,1 ±0,01 -8,20 0,35± 0,015 ±0,4 ±0,9 0,6 ± 0,4 1,91 Bacillus subtilis 0,2 ± 0,02 - 7,2 0,2 ± 0,02 - 12,6 0,3 ±0,015 - 0,1 ±0,01 -8,20 0,3 ±0,01 -1,90 ±0,6 ±0,6 8,0± 0,9 ± 0,4 Corynebacterium diphteriea 0,15 ±0,01-24,0 0,15 ±0,0150,2 ±0,015 - 0,15 ±0,02-26,0 0,5 ±0,05 -4,8 PV-8 ± 1,4 38,0 ±27 27,0± 2,2 ± 2,4 Corynebacterium diphteriea 0,15 ±0,01-22,0 0,15 ±0,0150,2 ± 0,02 - 0,15 ±0,02-26,0 0,5 ±0,05 -4,8 (tox) ±1,2 52,0 ±24 28,0± 2,4 ± 2,4 Candida tropicalis 1,5 ±0,02-31,0 1,5±0,15 0,5 ±0,15 - 0,5 ± 0,06 -15,2 0,5 ±0,05 -10,5 ±2,2 55,0±2,5 26,0± 1,2 ± 1,4 51 84593 52 Продовження таблиці 2 Candida crusei Candida albicans 1,5 ±0,02-32,0 ±1,6 1,5 ±0,02-33,0 ±2,4 1,5±0,15 70,0±3,5 1,5 ±0,15 73,0±4,3 0,5 ±0,15 27,0± 1,2 0,5 ±0,15 28,0± 1,3 0,5 ± 0,06 -15,0 0,5±0,05 -11,5 ±1,2 0,5 ± 0,06 - 15,2 0,5 ±0,05 -10,7 ± 1,6 Примітка: Кількість повторних досліджень (перевірок) була потрійною. Таблиця 3 Дезінфікуючий засіб на основі полігуанідинів, дезінфікуючий засіб у вигляді композиції, способи і одержання та використання Мінімальна бактерицидна Стійкість після В скільки Кількість № п/п Штами мікроорганізмів концентрація пасажів, мкг/мл разів зростає пасажів хлораміну, стійкість мкг/мл 1 Echerichia coli 0,21±0,01 8,0±0,6 38,1 20 2 Salmonella typhimurium 0,29±0,02 8,0±0,7 27,5 23 3 Shigella sonne 0,31±0,02 8,0±0,7 25,8 23 4 Staphylococcus aureus 209 0,44±0,02 5,4±0,4 12,2 24 5 Staphylococcus albus 0,29±0,03 5,0±0,03 17.2 24 6 Streptococcus pyogenus тип 1 1,1±0,02 5,5±0,06 5,0 26 7 Streptococcus pyogenus тип 2 1,0±0,01 5,9±0,06 5,9 26 8 Streptococcus pyogenus тип 3 0,9±0,03 6,2±0,06 6,8 26 9 Actinomyces olivaceus 6.0±0,3 19,0±0,5 3,1 26 10 Aspergillus niger 7,0±0,6 20,1±1,3 2,8 20 11 Bacillus cereus 1,6±0,3 6,9±1,1 4,3 26 12 Bacillus mesenterium 1,85±0,2 5,9±0,6 3,1 26 13 Bacillus micoides 1,8±0,2 6,0±0,6 3,3 26 14 Bacillus antracis 1,95±0,2 7,2±0,6 3,6 26 15 Bacillus subtilis 1,8±0,02 7,2±0,4 4,0 30 16 Corinebacterium diphteriae PV5,2±0,2 24,0±1,2 4,6 30 8 17 Corinebacterium diphteriae (то5,0±0,2 22,0±1,4 4,4 24 ке) 18 Candida tropicalis 13,0±1,2 31,0±2,2 2,3 20 19 Candida krusei 12,5±1,2 32,0±1,6 2,5 20 20 Candida albicans 12,6±1,3 33,0±2,4 2,6 20 Розвиток резистентності ("+" - є; "-" нема) + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + Примітка: Для всіх вивчених мікроорганізмів Р < 0,01. Кількість повторних досліджень (перевірок) була потрійною. Таблиця 4 Дезінфікуючий засіб на основі полігуанідинів, дезінфікуючий засіб у вигляді композиції, способи ї одержання та використання Мінімальна бакСтійкість В скільки терицидна конце№ п/п Штами мікроорганізмів після паса- разів зроснтрація хлорного жів, мкг/мл тає стійкість вапна, мкг/мл 1 Echerichia coli 0,21±0,04 5,0±0,03 23,8 2 Salmonella typhimurium 0,23±0,03 5,0±0,03 21,7 3 Shigella sonne 0,215±0,04 4,0±0,02 18,6 4 Staphylococcus aureus 209 0,45±0,06 5,1±0,03 11,3 5 Staphylococcus albus 0,55±0,04 5,2±0,04 9,5 6 Streptococcus pyogenus тип 1 0,55±0,03 5,1±0,03 9,2 7 Streptococcus pyogenus тип 2 0,45±0,03 4,5±0,02 10,0 Кількість пасажів 21 20 21 20 19 18 18 Розвиток резистентності ("+" - є; "-"нема) + + + + + + + 53 84593 54 Продовження таблиці 4 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 Streptococcus pyogenus тип 3 Actinomyces olivaceus Aspergillus niger Bacillus cereus Bacillus mesenterium Bacillus micoides Bacillus antracis Bacillus subtilis Corinebacterium diphteriae PV8 Corinebacterium diphteriae (токе) Candida tropicalis Candida krusei Candida albicans 0,55±0,04 9,0±1,1 9,1±1,2 2,6±0,02 2,7±0,02 2,6±0,02 2,8±0,02 2,7±0,03 4,5±0,02 40,0±2,7 45,0±2,9 9,5±0,6 9,7±0,8 9,1±0,7 12,4±0,9 12,6±1,0 8,1 4,4 4,9 3,6 3,5 3,5 4,4 4,6 18 18 18 22 22 22 21 22 + + + + + + + + 6,0±0,4 38,0±2,7 6,3 24 + 6,2±0,6 52,0±3,1 8.3 24 + 14,0±0,9 13,0±0,6 13,0±1,2 55,0±3,5 70,0±4,3 73,0±4,3 3,9 5,3 5,6 20 21 21 + + + Примітка: Для всіх вивчених мікроорганізмів Р < 0,01. Кількість повторних досліджень (перевірок) була потрійною. Таблиця 5 Дезінфікуючий засіб на основі полігуанідинів, дезінфікуючий засіб у вигляді композиції, способи їх одержання та використання № п/п Штами Мікроорганізмів 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 Echerichia coli Salmonella typhimurium Shigella sonne Staphylococcus aureus 209 Staphylococcus albus Streptococcus pyogenus тип 1 Streptococcus pyogenus тип 2 Streptococcus pyogenus тип 3 Actinomyces olivaceus Aspergillus niger Bacillus cereus Bacillus mesenterium Bacillus micoides Bacillus antracis Bacillus subtilis Corinebacterium diphteriae PV8 Corinebacterium diphteriae (токе) Candida tropicalis Candida krusei Candida albicans 17 18 19 20 Мінімальна бактерицидна В скільки концентрація Стійкість після разів зроспасажів, глутарового тає стіймкг/мл альдегіду, кість мкг/мл 0,25±0,05 2,5±0,2 3,3 0,25±0,05 1,5±0,03 6,0 0,30±0,04 1,0±0,15 3,3 0,35±0,04 5,0±0,3 14,2 0,33±0,033 4,5±0,2 13,6 0,30±0,02 5,0±0,2 16,6 0,30±0,03 4,0±0,2 13,3 0,30±0,03 4,2±0,3 14,0 15,0±1,2 30,0±2,2 2,0 6,4±0,4 9,2±1,1 1,4 2,55±0,04 6,4±0,6 2,5 2,55±0,04 6,2±0,6 2,4 2,55±0,04 8,0±0,6 3.1 2,1±0,03 9,2±0,6 4,3 2,1±0,03 8,0±0,9 3,8 Кількість Розвиток резипасажів стентності ("+" - є; "-"- нема) 18 16 18 22 20 20 21 22 19 19 20 22 22 22 22 + + + + + + + + + + + + + + + 5,6±0,6 27,0±2,2 4,8 22 + 4,1±0.04 28,0±2,4 6,8 17 + 9,0±0,8 9,2±0,6 8,3±0,4 26,0±1,2 27,0±1,2 28,0±1,3 2,8 2,9 3,3 15 16 16 + + + Примітка: Для всіх вивчених мікроорганізмів Р < 0,01. Кількість повторних досліджень (перевірок) була потрійною. 55 84593 56 Таблиця 6 Дезінфікуючий засіб на основі полігуанідинів, дезінфікуючий засіб у вигляді композиції, способи їх одержання та використання Мінімальна бактерицидна кон№ п/п Штами мікроорганізмів цернтрація бензалконіум хлориду, мкг/мл 1 Echerichia coli 0,08 ±0,01 2 Salmonella typhimurium 0,09 ±0,01 3 Shigella sonne 0,08±0,01 4 Staphylococcus aureus 209 0,4±0,02 5 Staphylococcus albus 0,4 ±0,02 6 Streptococcus pyogenus тип 1 0,35±0,03 7 Streptococcus pyogenus тип 2 0,33±0,03 8 Streptococcus pyogenus тип 3 0,35±0,04 9 Actinomyces olivaceus 1,26±0,06 10 Aspergillus niger 1,34±0,06 11 Bacillus cereus 2,45±0,3 12 Bacillus mesenterium 2,4±0,03 13 Bacillus micoides 2,4±0,03 14 Bacillus antracis 2,4±0,2 15 Bacillus subtilis 2,42±0,2 16 Corinebacterium diphteriae PV6,2±0,4 8 17 Corinebacterium diphteriae (то6,1 ±0,3 ке) 18 Candida tropicalis 15,1±1,3 19 Candida krusei 15,3±1,6 20 Candida albicans 15,1±1,3 Стійкість В скільки після паса- разів зросжів, мкг/мл тає стійкість Кількість пасажів Розвиток резистентності ("+" - є; "-" нема) 0,75±0,03 0,75±0,06 0,58±0,09 1,45±0,03 1,50±0,01 2,60±0,03 2,б0±0,03 2,40±0,03 13,0±1,6 13,6±1,7 6,50±0,3 5,50±0,6 8,20±0,4 8,20±0,6 8,20±0,4 9,3 8,3 7,2 3,6 3,7 7,4 7,8 6,8 10,0 10,0 2,6 2,2 3,4 3,4 3,3 24 23 21 22 22 22 22 22 14 14 23 26 27 27 27 + + + + + + + + + + + + + 26,0±1,1 4,1 16 + 26,0±0,6 4,2 17 + 15,2±1,4 18,0±1,2 15,2±1,6 1,0 1,1 1,0 17 19 17 Примітка: Для всіх вивчених мікроорганізмів крім кандид, Р > 0,05, (відсутність вірогідності). Кількість повторних досліджень (перевірок) була потрійною. Таблиця 7 Дезінфікуючий засіб на основі полігуанідинів, дезінфікуючий засіб у вигляді композиції, способи їх одержання та використання Діюча речовина Хлорне вапно Хлорамін ЧАС Конц. роТестбочого об'єкт розчину, мас % Дні досліджень Дні досліджень Дні досліджень 1* 1** 2 3 1* 1** 2 Скло 0,1 0,5 1,0 2,0 + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + Метал 0,1 0,5 1,0 2,0 + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + 3 Глутаровий альдегід Дні досліджень 1* 1** 2 3 1* 1** 2 3 + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + 57 84593 58 Продовження таблиці 7 Гумма 0,1 0,5 1,0 2,0 + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + 4+ + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + Примітка: 1 *- дослідження відразу після експозиції в день обробки поверхні; 1** - дослідження через 6 год. після експозиції в день обробки поверхні; « - »- відсутність росту мікроорганізмів; « +> - наявність росту мікроорганізмів. Кількість повторних досліджень (перевірок) була потрійною. Таблиця 8 Дезінфікуючий засіб на основі полігуанідинів, дезінфікуючий засіб у вигляді композиції, способи їх одержання та використання № п/п Штами мікроорганізмів 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 Echerichia coli Salmonella typhimurium Shigella sonne Staphylococcus aureus 209 Staphylococcus albus Streptococcus pyogenus тип 1 Streptococcus pyogenus тип 2 Streptococcus pyogenus тип 3 Actinomyces olivaceus Aspergillus niger Bacillus cereus Bacillus mesenterium Bacillus micoides Bacillus antracis Bacillus subtilis Corinebacterium diphteriae PV-8 Corinebacterium diphteriae (токе) Candida tropicalis Candida krusei Candida albicans Мінімальна Розвиток Стійкість піс- В скільки Кількість резистентбактерицидна ля пасажів, разів зростає пасажів концентрація ності ("+"- є; мкг/мл стійкість ПГМГ, мкг/мл "-" - нема) 0,09±0,01 0,10±0,01 1,1 18 0,09±0,01 0,10±0,01 1,1 18 0,09±0,01 0,09±0,01 1,0 18 0,25±0,02 0,26±0,02 1,0 16 0,30±0,02 0,32±0,02 1,1 16 0,25±0,02 0,26±0,02 1,0 16 0,25±0,02 0,26±0,02 1,0 16 0,25±0,02 0,26±0,02 1,0 18 9,60±1,1 9,60±1,1 1,0 18 8,20±1,2 8,20±1,2 1,0 18 1,70±0,2 1,80±0,2 1,1 20 1,60±0,2 1,70±0,2 1,1 19 1,90±0,6 1,80±0,6 0,95 19 1,95±0,6 1,95±0,6 1,0 20 1,95±0,3 1,90±0,3 0,97 19 4,80±0,5 4,90±0,5 1,0 20 4,60±0,4 4,60±0,4 1,0 20 10,50±1,2 10,50±1,2 1,0 19 11,50±1,3 11,50±1,3 1,0 19 10,70±1,3 10,80±1,3 1,0 19 Примітка: Для всіх вивчених мікроорганізмів Р > 0,05 (стійкість після 18-20 пасажів не розвивається. Якщо концентрація ПГМГ досягає МБК, то росту немає) Кількість повторних досліджень (перевірок) була потрійною. Таблиця 9 Дезінфікуючий засіб на основі полігуанідинів, дезінфікуючий засіб у вигляді композиції, способи їх одержання та використання ПГМГ Хлорамін Хлорне в апно Штами мікроорга- В скільки Розв иток В скільки Розв иток В скільки Розв иток резистент резистентрезистентнізмів разів разів разів ності ("+" ності ності ності зростає зростає зростає - є; “-“("+"- є; “-“("+" - є; "-" стійкість стійкість стійкість нема) нема) нема) Echerichia coli 1,1 38,1 + 23,8 + Salmonella ty1,1 27,5 + 21,7 + phimurium Shigella sonne 1,0 25,8 + 18,6 + Глутаров ий альдеконіум Бензалхло гід рид Розв иток Розв иток В скількі В скільки резистент эезистент разів разів зроності ("+"ності ("+"зростає стає стійє; “-“є; “-“стійкість кість нема) нема) 3,3 + 9,3 + 6,0 + 8,3 + 3,3 + 7,2 + 59 84593 60 Продовження таблиці 9 Staphylococcus aureus 209 Staphylococcus albus Streptococcus pyogenus тип 1 Streptococcus pyogenus тип 2 Streptococcus pyogenus тип 3 Actinomyces olivaceus Aspergillus niger Bacillus cereus Bacillus mesenterium Bacillus micoides Bacillus antracis Bacillus subtilis Corinebacterium diphteriae PV-8 Corinebacterium diphteriae (токе) Candida tropicalis Candida krusei Candida albicans 1,0 12,2 + 11,3 + 14,2 + 3,6 + 1,1 17.2 + 9,5 + 13,6 + 3.7 + 1,0 5,0 + 9,2 + 16,6 + 7.4 + 1,0 5,9 + 10,0 + 13,3 + 7,8 + 1,0 6,8 + 8,1 + 14,0 + 6,8 + 1,0 3,1 + 4,4 + 2,0 + 1,0 1,0 1,1 2,8 4,3 + + 4,9 3,6 + + 1,4 2,5 + + 1,0 2,6 + 1,1 3,1 + 3,5 + 2.4 + 2,2 + 0,95 1,0 0,97 3,3 3,6 4,0 + + + 3,5 4,4 4,6 + + + 3,1 4,3 3,8 + + + 3,4 3.4 3,3 + + + 1,0 4,6 + 6,3 + 4,8 + 4,1 + 1,0 4,4 + 8,3 + 6,8 + 4.2 + 1,0 1,0 1,0 2,3 2,5 2,6 + + + 3,9 5,3 5,6 + + + 2,8 2,9 3,3 + + + 1,0 1,1 1,0 Примітка: Кількість повторних досліджень (перев ірок) була потрійною. Таблиця 10 Дезінфікуючий засіб на основі полігуанідинів, дезінфікуючий засіб у вигляді композиції, способи їх одержання та використання Кількість Кількість Розв иток Кількість ауксотрофів , мутантів , резистентв ижив ших в % в ід кіль- стійких до ності до Штами мікроорганізмів мікрооргані- кості в ижив- хлорного хлорного змів після дії ших (конт- в апна, в % в апна ("+" мутагену, % роль в ід кількос- є;"-" - немутагенезу) ті в ижив ши має) Echerichia coli Salmonella typhimurium Shigella sonne Staphylococcus aureus 209 Staphylococcus albus Streptococcus pyogenes Actinomycus olivacus Bacillus cereus Bacillus mesentericus Bacillus micoides Bacillus antracis Bacillus subtilis Corynebacterium diphteriea PV-8 Candida tropicalis Candida albicans Candida crusei Кількість мутантів , Розв иток Кількість стійких резистент- мутантів , Розв иток до хлоності до стійких до резистентнораміну, в хлораміну ПГМГ, в % сті до ПГМГ % в ід ("+"- є; “-“- в ід кілько- ("+"- є; “-“кількості немає) сті в ижив немає) ших в иживших 4 ±0,2 + 0 11 ± 0,6 6,5 ± 0,3 6 ±0,4 + 14 ±0,8 4,0 ± 0,2 8 ±0,6 + 6 ±0,2 + 0 14 ±0,8 6,0 ± 0,4 8 ±0,6 + 4 ±0,2 + 0 16 ±0,8 4,7 ± 0,5 6 ±0,3 + 4 ±0,2 + 0 14 ±0,8 5,2 ± 0,5 6 ±0,2 + 4 ±0,2 + 0 12 ±0,8 3,0 ± 0,4 4 ±0,2 + 3±0,2 + 0 13 ±0,6 14 ±0,8 16 ±0,8 16 ±0,8 12 ±0,6 14 ±0,6 4,2 ± 0,4 2,8 ± 0,3 2,6 ± 0,4 2,7 ± 0,3 2,6 ± 0,4 2,9 ±0 4 ±0,2 6 ±0,3 8 ±0,3 3±0,3 4 ±0,3 6 ±0,3 + + + + + + 6 ±0,2 6 ±0,2 4 ±0,2 6 ±0,3 3±0,3 4 ±0,3 + + + + + + 0 0 0 0 0 0 16 ±0,4 4,5 ± 0,3 7 ±0,4 + 4 ±0,3 + 0 18 ±2,0 19 ±3,0 21 ±4,0 2,5* 2,6* 2,8* 6 ±0,4 6 ±0,3 6 ±0,3 + + + 5 ±0,3 4 ±0,3 4 ±0,4 + + + 0 0 0 Примітка: *- мутанти, стійкі до ністатіну. Кількість повторних досліджень (перевірок) була потрійною.