Спосіб консервування мікроорганізмів

ДЛЯ СЛУЖЕБНОГО ПОЛЬЗОВАНИЯ ЭКЗ. N » • С ОІ і О 1 СОЮЗ СОВЕТСКИХ СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ РЕСПУБЛИН (51)4 С 12 N 1/00 ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИИ К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4017730/31-13 (22) 3 1 . 0 1 . 8 6 (71) Специальное конструкторско-технологическое бюро Отделения химии поверхности Института физической химии АН УССР и Институт микробиологии и вирусологии им. Д*К.Заболотного (72) Г.Е.Павлик, А.А.Чуйко, Е.И.Андреюк, А.Ф.Корниенко, Т.Ф.Дивнич, В.Е.Козырицкая, М.А.Карева и О.А.Азимцева (53) 576.8.093.1(088.8) (56) Патент США № 4246349, кл. С 12 N 11/14, опублик. 1981. (54) СПОСОБ КОНСЕРВИРОВАНИЯ МИКРООРГАНИЗМОВ (57) Изобретение относится к вирусологии и может быть использовано при сохранении микроорганизмов в 36-88 Jjpuiie коллекциях. Цель изобретения - повышение жизнеспособности микроорганизмов при сохранении их биохимических свойств. Способ консервирования микроорганизмов включает суспендирование их в жидкой среде, смешивание с дис-.. персным неорганическим кремнеземсодержащим материалом и последующую лиофилиэацию, причем в качестве дисперсного неорганического кремнеземсодержащего материала используют пирогенный кремнезем с химически привитыми к его поверхности группами NH 2 , концентрация аминогрупп на поверхности составляет 0,3-0,5 ммоль/г SiO,,, при этом пирогенный кремнезем используют в виде водной суспензии, концентраци кремнезема в которой составляет 0,1 мас,%. 2 табл. 1 1427815 Изобретение относится к микробиологии и может быть использовано при сохранении микроорганизмов в коллек-, циях* Цель изобретения - повышение жизнеспособности микроорганизмов при сохранении их биохимических свойств. Сущность способа заключается в том, что в процессе консервирования «Q микроорганизмов, включающем суспендирование их в жидкой среде, смешивание с дисперсным неорганическим крем-' неземсодержащим материалом и последующую лиофилизацию в качестве дис^ персного неорганического кремнеэемсодержащего материала используют пирогенный кремнезем с химически привитыми к его поверхности группами NHj при концентрации аминогрупп на 20 поверхности от 0,3 до 0,5 ммоль/г SiO^, а пирогенный кремнезем используют в виде водной суспензии, концентрация кремнезема в которой составляет 0,1 масс ч %. 25 Пирогенный кремнезем с привитыми к поверхности аминогруппами имеет следующую структуру СН^МНо—»• на твердые агаризованные среды через 1 сут, 6, 12 и 24 мес после лиофилизации. В качестве контроля использовали желатоэо-сахарозную среду без добавления неорганического материала, исходный кремнезем, суспендированный в воде без добавления защитной питательной 'среды, а также смесь 80% кордиерита с 20% окиси алюминия, диспергированной в 10%-ном растворе сахарозы (по известному). Полученные данные приведены в табл,1 и 2. Способ позволяет сохранять жизнеспособность и биохимические свойства стрептомицетов в течение более чем двух лет прл комнатной температуре. Консервированлые культуры представляют собой сыпучую массу, что позволяет быстро извлекать необходимую часть хранимого материала без регидратации с последующим возвратом к хранению. Таким образом, способ обеспечивает возможность многократного использования консервированных культур в качестве стандартного посевного материала, в том числе в полевых условиях. Способ пригоден для сохранения 30 как спор, так и клеток вегетативного __^Si-O-(CH 7 )^WH 1 + Н г 0 Поверхность Модификаторкремнезема моноэтаноламин Способ осуществляется следующим образом. Готовят водную взвесь культуры 35 стептомицетов, предварительно выращенной на скошенной поверхности агаризованной среды (усредненная среда Чапека). 40 Взвесь разносят в пробирки и затем добавляют водную суспензию модифицированного кремнезема концентрации 0,1 мас.%. Пробирки с содержимым выдерживают в холодильной камере для замораживания 24 ч. Затем проводят 45 лиофилизацию, после чего ампулы запаивают и хранят при комнатной температуре. Определение жизнеспособности и биохимических свойств консервирован- 50 ных культур проводили путем высева мицелия культур стерптомицетов. Ф о р м у л а и з о б р е т е н и я Способ консервирования микроорганизмов , включающий суспендироваиие их в жидкой среде, смешивание с дисперсным неорганическим кремнеэемсодержащим материалом и последующую пио-Ь филизацию, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения жизнеспособности микроорганизмов при сохранении их биохимических свойств, в качестве дисперсного неорганического кремнеземсодержащего материала используют пирогенный кремнезем с химически привитыми к его поверхности аминогруппами ~ NH?, причем пирогенный кремнезем используют в виде водной суспензии, концентрация кремнезема в которой составляет 0,1 мас,%. 1427815 Т а б л и ц а Штамм Жизнеспособность консервированных Сроки хранекультур, % ния при Водная суспензия пирогенно- Желато20 °С зо-саго кремнезема (0 ,1 мас.%) харозсодержащего привитые исход- ная среда ГШ г -группы с поверх- ного ностной концентраци- (конт- (контроль) роль) ей, ммоль/г SiO-2. 0,3 0,4 [ 0,5 1 Известный состав . 1 сут 100 95 100 23 100 39 Streptomyces 0,5 г. 100 100 100 28 100 41 chromogenes 1 г. 100 100 100 20 100 41 193 2 г. 100 100 100 23 100 12 Streptomyces 1 сут 90 85 90 10 80 14 chromogenes 0,5 г. 90 85 85 10 80 16 1 г. 90 90 90 12 85 12 2 г. 90 85 90 10 85 4 Streptomyces 1 сут ПО ПО 115 25 100 70 lavendulae 0,5 г. ПО 120 115 40 100 70 165 1 г. 100 100 100 38 100 65 2 г. 100 100 100 40 100 23 Streptomyces 1 сут 95 95 100 35 90 40 lavendulae 0,5 г. 100 100 100 36 95 42 477 1 г. 100 100 100 35 95 42 2 г. 100 100 100 35 90 14 1427815 Т а б л и ц а Штамм Сроки хранения при Сохранение глюкозо-иэомеразной активи., Z Водная дисперсия пирогенного кремнезема (0,1 мас.%) содержащего привитые Ш^-группы с. поверхности концентрац., ммоль/г SiO? 0,3 ип: исходного (конт* роль) 2 Известный состав Желатозо-сахароэная среда (контроль) 0,4 0,5 140 140 65 63 115 Streptomyces 1 сут 140 chromogenes 0,5 г. 140 132 140 60 63 114 193 1 г. 130 132 130 58 60 ПО 2 г. 130 130 130 60 62 82 Streptomyces 1 сут 60 60 68 27 54 60 chromogenes 0,5 г. 68 68 70 30 60 48 Ї36 1 г. 68 68 68 26 58 50 2 г. 68 68 70 26 5S 31 1 сут 70 75 75 40 67 25 '0,5 г. 72 70 70 35 70 20 1 г. 70 70 70 35 60 . 20 2 г. 70 72 75 30 60 8 Streptomyces 1 сут 85 85 85 32 70 lavendulae 0,5 г. 85 87 90 30 68 54 477 1 г. 84 84 90 28 68 52 2 г. 84 85 90 30 72 28 Streptomyces lavendulae 165 • 52 Редактор Т.Горячева Составитель Е.Ильин Техред А.Кравчук Корректор Г.Решетник Заказ 1111/ДСП Тираж 390 Подписное ' БНИИПИ Государственного комитета СССР по делам'изобретений и открытий 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5 Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4