Спосіб визначення впливу сполуки групи гідразонів 2-гідроксибензоїл-гідразонпірол-2-карбальдегіду на скоротливу активність тонкого кишечнику в експерименті іn vitro

Реферат: Спосіб визначення впливу сполуки групи гідразонів 2-гідроксибензоїлгідразонпірол-2карбальдегіду на скоротливу активність тонкого кишечнику в експерименті in vitro виконують шляхом підготовки ізольованої смужки за стандартною методикою в розчині Кребса-Хенслейта, яку прикріплено у робочій камері до стаціонарного гачка з одного кінця, а з іншого - до штока тензодатчика, і розтягнуто під дією пасивного розтягнення до 1150 мг, після чого на тлі преконстрикції досліджуваної смужки розчином ΚСl у концентрації 60 ммоль/л до 1300 мг -4 впливають сполукою 2-гідроксибензоїлгідразонпірол-2-карбальдегіду в концентрації 10 моль/л, стабілізованої твіном-80, об'ємом 20 мл протягом 3-5 хвилин, і при показах тензодатчика нижче 750 мг, судять про зниження скоротливої активності ізольованої смужки тонкого кишечнику свині під впливом сполуки 2-гідроксибензоїлгідразонпірол-2 карбальдегіду. UA 122279 U (12) UA 122279 U UA 122279 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Корисна модель стосується медицини, а саме урології, і може бути застосована для вивчення in vitro особливості фармакологічної регуляції скоротливої функції неоциста під дією 2гідроксибензоїлгідразонпірол-2-карбальдегіду. Рак сечового міхура залишається актуальною проблемою у зв'язку з неухильним ростом захворюваності і смертності. В Україні кожен рік реєструється близько 5 тис. нових випадків та 2,3 тис. смертей від даної патології [1]. У лікуванні інвазивного і поверхневого раку сечового міхура провідне значення мають хірургічні методи. Радикальна цистектомія з ортотопічною ілеоцистопластикою є "золотим стандартом" деривації сечі, запропоновано понад 60 методик формування кондуїту [2]. В даний час для цих цілей широко застосовуються різні відділи шлунково-кишкового тракту: клубова, товста кишка і навіть частини шлунка [3]. У міру накопичення досвіду операцій зі створення артифіціального сечового міхура (АСМ) закономірно виникав інтерес до характеру морфологічних змін його стінки при постійному контакті її з сечею [4]. В літературі є ряд згадок про можливий вплив сечі на слизову кишки. Існує мало відомостей про морфогенез неоциста, функціональну пристосованість, залежність метаболічних порушень від морфологічної перебудови стінки штучного сечового міхура (CM), а його адаптація до впливу сечі взагалі не досліджувалась. Це обумовлено невеликою кількістю робіт з дослідження будови стінки ортотопічного сечового резервуара, особливо у віддаленому періоді [5]. Відсутність достатньої інформації про будову і функцію неоциста, роль лікарських засобів в ефективній адаптації його функції залишається предметом зацікавленості науковців-урологів. В основу корисної моделі поставлено задачу розробки способу визначення впливу сполуки групи гідразонів 2-гідроксибензоїлгідразонпірол-2-карбальдегіду на скоротливу активність ізольованої смужки тонкого кишечнику свині, що дозволить з високим ступенем вірогідності вивчати вплив вказаної сполуки на активність досліджуваного фрагмента кишечнику свині, що дозволить також оцінити доцільність подальшого дослідження даної сполуки. Поставлена задача вирішується тим, що, згідно з корисною моделлю, у способі визначення впливу сполуки групи гідразонів 2-гідроксибензоїл-гідразонпірол-2-карбальдегіду на скоротливу активність тонкого кишечнику в експерименті in vitro, шляхом підготовки ізольованої смужки за стандартною методикою в розчині Кребса-Хенслейта, прикріпленої у робочій камері до стаціонарного гачка з одного кінця, а з іншого - до штока тензодатчика і розтягнутої під дією пасивного розтягнення до 1150 мг, після чого на тлі преконстрикції досліджуваної смужки розчином ΚСl у концентрації 60 ммоль/л до 1300 мг впливають сполукою 2-4 гідроксибензоїлгідразонпірол-2-карбальдегіду в концентрації 10 моль/л, стабілізованої твіном80, об'ємом 20 мл протягом 3-5 хвилин, і при показах тензодатчика нижче 750 мг, який є найбільш повторюваним, судять про зниження скоротливої активності ізольованої смужки тонкого кишечнику свині під впливом сполуки 2-гідроксибензоїлгідразонпірол-2 карбальдегіду. Спосіб виконується наступним чином. Аналоги щодо визначення впливу на скоротливу активність тонкого кишечнику свині відсутні. Для проведення досліджень використовували установку для вивчення скоротливої активності ізольованих смужок тонкого кишечнику, яка складалася з термостату, робочої камери для розміщення тканини, тензодатчика, підсилювача, самописця. Дослідження проводилися на ізольованих смужках тонкого кишечнику свиней-самиць, прикріплених у робочій камері з одної сторони до стаціонарного гачка, а з іншої - до штока тензодатчика (CD. Foster, 1989) [6]. Досліджувані частини тонкого кишечнику видалялися у свині, забитої шляхом цервікальної дислокації, і розміщувалися в препарувальній чашці зі стандартним буферним розчином Кребса-Хенслейта при кімнатній температурі. Ізольовані смужки тонкого кишечнику були завдовжки близько 10 мм і завширшки - 4-5 мм. Перед дослідженням препарати витримували протягом 30 хв при температурі 37 °C у стандартному буферному розчині Кребса-Хенслейта. Робочий розчин аерували газовою сумішшю 95 % О2 і 5 % СО2. За допомогою автоматичного термостата температура розчину в камері підтримувалася на рівні 37 °C. Всі дослідження проводилися в ізометричному режимі, смужки були попередньо розтягнуті під дією пасивного розтягнення 1150 мг, після чого на тлі преконстрикції досліджуваної смужки розчином ΚСl у концентрації 60 ммоль/л до 1300 мг впливали сполукою 2-гідроксибензоїлгідразонпірол-2-карбальдегіду. Реєстрація скоротливої активності ізольованих смужок тонкого кишечнику здійснювалася за допомогою ізометричних датчиків напруги. -4 Для дослідження сполуки in vitro використовували її водний розчин у концентрації 1·10 -4 моль/л (V=20 мл); концентрацію 1·10 готували розбавленням 0,1 Μ розчину. Всі сполуки були 1 UA 122279 U 5 10 15 20 25 стабілізовані твіном-80. Реєстрували показники датчика. При показах тензодатчика нижче 750 мг, який є найбільш повторюваним, судили про достовірне зниження скоротливої активності досліджуваної ізольованої смужки тонкого кишечнику свині під впливом сполуки 2гідроксибензоїлгідразонпірол-2-карбальдегіду. Таким чином, заявлене рішення, за рахунок оригінального підходу до визначення скоротливої активності ізольованої смужки тонкого кишечнику свині in vitro, дозволяє вірогідно судити про зниження скоротливої активності досліджуваного матеріалу під впливом сполуки групи гідразонів 2-гідроксибензоїлгідразонпірол-2-карбальдегіду, що дозволить також оцінити доцільність подальшого дослідження даної сполуки. Джерела інформації: 1. Бюлетень національного канцер-реєстру України № 16 - "Рак в Україні". - Національний інститут раку. - К., 2015. 2. Kulkarni J.H., Pramesh C.S., Rathi S., Pantvaidya G.H. Long-tern results of orthotopic neobladder reconstruction after radical cystectomy //B.J.U. Int. 2003. - Vol. 91, N 6. - P. 485-488. 3. Комяков Б.К., Новиков А.И., Гулиев Б.Г., Дорожеев С.Я., Зубань О.Η., Атмаджев Д.Н. Восстановление мочевыводящих путей различными отделами желудочно-кишечного тракта //Урология. - 2005. - № 5. - С. 12-17. 4. Ultrastructural basis for the efficiency of an ileal orthotopic neobladder 27 yers after surgery /G. Orlandi, S. Guizzadi, S. Ferretti [et al] //Urol. Int. - 2002. Vol. 69. P. 233-235.61. Фрейдович А.И. Клиническая фтизиоурология //: Медицина, 2002. - 304 с. 5. Schrier В.P., Laguna M.P., van der Pal F., Isorna S., Witjes J.A. Comparison of orthotopic sigmoid and ileal neobladders: continence and urodynamic parameters //Eur. Urol. - 2005. - Vol. 47. Suppl. (5). - P. 679-685. 6. Gopalakrishman M. (-)-(9S0-9(3-bromo-4-fluorophenyl)-2,3,5,6,7,9-hexahydrothieno [3,2-b] quinolin-8 (4H)-one 1,1-dioxide (A-278637): a novel ATP-sensitive potassium channel opener efficacious in suppressing urinary bladder contractions. In vitro characterization /M. Gopalakrishnan, S.A. Buckner, Char-Chang Shieh [et al] //J. Pharmacol. Exp. Ther. - 2002. - Vol. 303. - P. 379-386. ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 30 35 40 Спосіб визначення впливу сполуки групи гідразонів 2-гідроксибензоїлгідразонпірол-2карбальдегіду на скоротливу активність тонкого кишечнику в експерименті in vitro виконують шляхом підготовки ізольованої смужки за стандартною методикою в розчині Кребса-Хенслейта, яку прикріплено у робочій камері до стаціонарного гачка з одного кінця, а з іншого - до штока тензодатчика, і розтягнуто під дією пасивного розтягнення до 1150 мг, після чого на тлі преконстрикції досліджуваної смужки розчином ΚСl у концентрації 60 ммоль/л до 1300 мг -4 впливають сполукою 2-гідроксибензоїлгідразонпірол-2-карбальдегіду в концентрації 10 моль/л, стабілізованої твіном-80, об'ємом 20 мл протягом 3-5 хвилин, і при показах тензодатчика нижче 750 мг, судять про зниження скоротливої активності ізольованої смужки тонкого кишечнику свині під впливом сполуки 2-гідроксибензоїлгідразонпірол-2 карбальдегіду. Комп’ютерна верстка Л. Ціхановська Міністерство економічного розвитку і торгівлі України, вул. М. Грушевського, 12/2, м. Київ, 01008, Україна ДП “Український інститут інтелектуальної власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 2