Спосіб корекції показників вмісту відновленого глутатіону нирок щурів при інтоксикації тетрахлорметаном

Реферат: Спосіб корекції показників вмісту відновленого глутатіону нирок щурів при інтоксикації тетрахлорметаном шляхом призначення настоянки ехінацеї пурпурової у дозі 0,25 мл/кг маси. Додатково призначають мелатонін внутрішньошлунково в дозі 3 мг/кг маси тіла в ранкові години (8.00) впродовж 5 днів. UA 123027 U (12) UA 123027 U UA 123027 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Корисна модель належить до галузі медицини, а саме до біохімії, може бути використана для біохімічної діагностики антиоксидантних порушень нирок, які беруть участь у дезінтоксикації та виведенні різних токсичних речовин і ксенобіотиків. Оцінка антиоксидантного стану нирок з використанням різних методик дослідження дозволяє зі значною достовірністю виявити ступінь відхилення біохімічних показників від значень норми, а також передбачити можливий перебіг патології. Відомо, що вільнорадикальні процеси та ступінь їх інтенсифікації є одним з провідних патогенетичних факторів розвитку більшості патологій організму. В нормі генерація активних форм кисню та радикальних продуктів регулюється антиоксидантною системою. За умов будь-якої патології порушується збалансоване співвідношення між показниками прооксидантів та активністю компонентів антиоксидантних систем. Саме тому виникає необхідність пошуку засобів діагностики антиоксидантного стану нирок щурів при моделюванні токсичного їх ураження тетрахлорметаном. Таким засобом діагностики є визначення вмісту відновленого глутатіону нирок у щурів. Механізм антиоксидантного захисту організму може реалізуватися шляхом зниження рівня генерування активних форм кисню та радикалів внаслідок обриву ланцюгів вільнорадикальних реакцій, що забезпечується ферментативною або неферментативною антиоксидантною системою (Барабой В.А. 1998). Найближчим аналогом запропонованої корисної моделі є спосіб корекції прооксидантної системи в нирках при токсичному гепатиті (Спосіб корекції прооксидантної системи в нирках при токсичному гепатиті: патент України № 43232, № u200902057; заявл. 10.03.2009; опубл. 10.08.2009, бюл. №15), в якому за умов інтоксикації тетрахлорметаном проводять корекцію настоянкою ехінацеї пурпурової (ТОВ "ДКП "Фармацевтична фабрика", м. Житомир, Україна) у дозі 0,25 мл/кг маси. Недоліком найближчого аналога є те, що корекція є недостатньо ефективною, так як попередньо не було вивчено процес впливу розчину тетрахлорметану на антиоксидантний стан нирок, а саме зміну глутатіонової системи антиоксидантного захисту. В основу корисної моделі поставлена задача вдосконалити спосіб корекції показників вмісту відновленого глутатіону нирок щурів при інтоксикації тетрахлорметаном шляхом додаткового до призначення настоянки ехінацеї пурпурової призначення мелатоніну внутрішньошлунково в ранкові години впродовж 5 днів. Спільними ознаками корисної моделі та найближчого аналога є призначення настоянки ехінацеї пурпурової (ТОВ "ДКП "Фармацевтична фабрика", м. Житомир, Україна) у дозі 0,25 мл/кг маси. Відмінними ознаками корисної моделі від найближчого аналога є те, що додатково до призначають настоянку ехінацеї пурпурової (ТОВ "ДКП "Фармацевтична фабрика", м. Житомир, Україна) у дозі 0,25 мл/кг маси призначають мелатонін (Sigma, США) внутрішньошлунково в дозі 3 мг/кг маси тіла в ранкові години (8.00) впродовж 5 днів. Визначення термінів, які використовуються при описі корисної моделі: настоянка ехінацеї пурпурової, мелатонін, відновлений глутатіон, нирки, інтоксикація, тетрахлорметан. Теоретичні передумови здійснення корисної моделі. Використовували модель токсичного ураження органів щурів шляхом уведення тетрахлорметану, який є сильною отрутою за рахунок безпосереднього впливу на мембранні структури органів та посилення продукції активних форм кисню. Тетрахлорметан є потужною гепатотропною отрутою, одним із молекулярних механізмів дії якої є посилене утворення активних форм кисню, які ініціюють процеси вільнорадикального окиснення ліпідів та біополімерів. Інтоксикація щурів тетрахлорметаном супроводжується посиленням у крові та печінці тварин процесів пероксидного окиснення ліпідів (ПОЛ), про що, зокрема, свідчить підвищення у крові та гомогенатах печінки тварин умісту сполук із ізольованими подвійними зв'язками, кетодієнів та спряжених триєнів, малонового альдегіду. Для діагностики порушення антиоксидантного стану нирок визначали вміст відновленого глутатіону при інтоксикації тетрахлорметаном та при дії запропонованих у корисній моделі препаратів, який проводили методом об'ємного аналізу, що ґрунтується на окисненні відновленого глутатіону йоднуватокислим калієм (KJO3). Присутній у середовищі йодистий калій при надлишку йоднуватокислого калію окиснюється з виділенням вільного йоду, який дає з розчином крохмалю блакитне забарвлення. Мелатонін є досить сильним і ефективним ендогенним перехоплювачем вільних радикалів. Цей епіфізарний індоламін взаємодіє з високотоксичним гідроксил радикалом, забезпечуючи місцевий захист проти окислювального пошкодження біомолекул у клітині [Протективное действие мелатонина при оксидативном поражении печени у мышей, вызванном четыреххлористым углеродом / Xu Jian-Ming, Xu Shu-Yun, Mei Qiao and al. // Pharmacol. Bull. 1 UA 123027 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 1999. - Vol. 15, №4. - P. 311-313.]. Головний біохімічний механізм дії мелатоніну на клітину антиоксидантний. Можливо, це відбувається за рахунок кетоенольної таутомерії молекули мелатоніну з утворенням активної ОН-групи, яка може виступати донором протонів. Поряд із прямим антирадикальним ефектом гормон дії, і як вторинний антиоксидант, стимулюючи активність антиоксидантний ферментів (глутатіонпероксидази, глутатіон редуктази, супероксиддисмутази, глюкозо-6-фосфатдегідрогенази) [Мещишен І.Ф… Мелатонін: обмін та механізм дії / І.Ф. Мещишен, В.П. Пішак, І.І. Заморський. // Бук. мед. Вісник. - 2001. - Т. 5, № 2. С. 3-15.] Останнім часом увагу науковців та лікарів-клініцистів привертають рослинні лікарські препарати, оскільки вони володіють антиоксидантними, імуностимулюючими, мембраностабілізуючими ефектами, зокрема за умов тривалої дії хімічних чинників. Такі властивості мають препарати ехінацеї [Чекман І.С. Клініко-фармакологічні властивості ехінацеї / Чекман І.С. // Ліки. - 2001. - № 3. - С. 25-26]. Поруч з цим, поєднана дія настоянки ехінацеї пурпурової та мелатоніну покращила показники вмісту відновленого глутатіону у нирках на фоні токсичного гепатиту і зкорегувала їх, наближаючи до контролю. Спосіб здійснюють наступним чином. Проводять інтоксикацію нирок щурів розчином тетрахлоретану шляхом дворазового (через день) інтрагастрального його уведення у вигляді 50 % олійного розчину в дозі 0,25 мл/100 г маси щура. На наступний день після останнього введення токсину вводять мелатонін та настоянку ехінацеї пурпурової впродовж п'яти днів. Мелатонін (Sigma, США) уводять внутрішньошлунково в дозі 3 мг/кг маси тіла в ранкові години (8.00) та настоянку ехінацеї пурпурової (ТОВ "ДКП "Фармацевтична фабрика", м. Житомир, Україна) з розрахунку 0,25 мл/кг маси тварини. Приклади використання корисної моделі. Приклад 1. В отриманих супернатантах нирок щурів визначали вміст відновленого глутатіону за допомогою відомої методики (Мещишен И. Ф. Окисление и восстановление глутатиона в органах крыс при введений этония / И.Ф. Мещишен, И.В. Петрова // Український біохімічний журнал. - 1983. - Т. 55, № 5. - С. 571-573.) Для інтоксикації тварин уводили розчин тетрахлоретану дворазового (через день) інтрагастрально у вигляді 50 % олійного розчину в дозі 0,25 мл/100 г маси тварини. В супернатантах нирок визначали вміст відновленого глутатіону, який становив 9,9±1,91 мкмоль/г тканини. Далі проводили корекцію показників вмісту відновленого глутатіону нирок щурів при інтоксикації тетрахлорметаном за допомогою способу найближчого аналога та корисної моделі. Було визначено, що у групі тварин, яким проводили корекцію за допомогою способу, що заявляється, вміст відновленого глутатіону знизився порівняно з показниками групи тварин, яким корекцію проводили за допомогою способу-прототипу, і становив - 8,4±0,90 мкмоль/г тканини. Це свідчить про зменшення процесів пероксидації біополімерів та антиоксидантну дію вибраних нами для корекції препаратів на фоні токсичного ураження нирок. Тобто корекція препаратами показників вмісту відновленого глутатіону показала кращі результати в порівнянні з найближчим аналогом. Технічний результат. Запропонований спосіб дозволяє проводити ефективну корекцію показників вмісту відновленого глутатіону нирок щурів при інтоксикації тетрахлорметаном за допомогою настоянки ехінацеї пурпурової та мелатоніну, дає можливість використовувати дані препарати у клініці з лікувально-профілактичною метою при ураженні нирок. ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 50 Спосіб корекції показників вмісту відновленого глутатіону нирок щурів при інтоксикації тетрахлорметаном шляхом призначення настоянки ехінацеї пурпурової у дозі 0,25 мл/кг маси, який відрізняється тим, що додатково призначають мелатонін внутрішньошлунково в дозі 3 мг/кг маси тіла в ранкові години (8.00) впродовж 5 днів. 55 Комп’ютерна верстка Л. Бурлак Міністерство економічного розвитку і торгівлі України, вул. М. Грушевського, 12/2, м. Київ, 01008, Україна ДП “Український інститут інтелектуальної власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 2