Спосіб корекції епіталоном показників про- та антиоксидантного стану крові при експериментальному моделюванні імобілізаційного стресу у старих щурів на фоні зміненого фотоперіоду

Спосіб корекції епіталоном показників про- та антиоксидантного стану крові при експериментальному моделюванні іммобілізаційного стресу у старих щурів на фоні зміненого фотоперіоду, що включає використання препарату епіталон, який відрізняє ться тим, що епіталон уводять у дозі 0,17 мкг/100 г маси тіла щура вн утрішньом'язово. (19) (21) u200803518 (22) 19.03.2008 (24) 10.09.2008 (46) 10.09.2008, Бюл.№ 17, 2008 р. (72) ПІШАК ВАСИЛЬ ПАВЛОВИЧ, UA, ЛОМАКІНА ЮЛІЯ В'ЯЧЕСЛАВІВН А, UA (73) БУКОВИНСЬКИЙ ДЕРЖАВНИЙ МЕДИЧНИЙ УНІВЕРСИТЕТ МОЗ УКРАЇНИ, U A 3 35208 4 лабораторних тварин»] шляхом уведення епіталодо уведення мелатоніну та епіталону. Неферменну внутрішньом'язово. Спосіб-прототип здійснютна ланка АОС (вітаміни А та Е) - виявилася більш ється наступним чином: щурам уводять внутрічутливою як до світлового проміжку, так і до увешньом'язово в дозі 0,5мг/кг маси тіла епіталон 2 дених препаратів. Максимальну кількість змін акрази на добу. тивності антиоксидантних ферментів та жиророзНедоліками прототипу є те, що не вивчався чинних вітамінів під впливом препаратів відмічено вплив епіталону на показники про- та антиоксидау гр упі тварин, яких утримували за умов постійного нтного стану крові старих щурів за умов зміненого освітлення, а мінімальну - в умовах природної зміфотоперіоду та іммобілізаційного стресу. ни дня і ночі. Найбільш чутливими до експерименНами пропонується рішення, що усуває вказатальних впливів виявився рівень активності СОД і ні недоліки. каталази у печінці і нирках, при цьому зміни під В основу корисної моделі поставлене завданвпливом мелатоніну і постійної темряви в більшоня удосконалити спосіб корекції епіталоном показсті випадків були односпрямованими, та під вплиників про- та антиоксидатного захисту при модевом мелатоніну та епіталону відрізнялися [Винолюванні іммобілізаційного стресу в старих щурів градова И.А., Илюха В.А., Ильина Т.Н., Узенбаева шляхом призначення епіталону в іншому дозуванні Л.Б., Федорова А.С. Влияние мелатонина и эпитадля забезпечення урахування впливу на показники лона на антиоксидантную систему крыс зависит от про- та антиоксид атного в щурів при іммобілізасветового режима // Патол. физиол. и эксперим. ційному стресі та старінні. терапия. - 2006. - N 3. - С.22-26.]. Поставлене завдання вирішується тим, що в У Санкт-Петербурзькому інституті біорегуляції способі корекції епіталоном показників про- та анта геронтології ПЗО РАМН вивчали вплив епіталотиоксидатного захисту при моделюванні іммобіліну на вікову динаміку ПОЛ у інадаптивних лініях заційного стресу в умовах зміненого фотоперіоду Drosophila Melanogaster. Встановлено, що однорав старих щурів шля хом призначення епіталону, зове уведення епіталону на личинковій стадії знизгідно до корисної моделі, епіталон уводять у дозі жує рівень кон'югованих гідроперекисей та основ 0,17мкг/100г маси тіла щура вн утрішньом'язово. Шиффа впродовж всього життя імаго. ОхарактеСпільними ознаками прототипу та рішення, що ризовані міжлінійні і міжстатеві різниці динаміки заявляється, є призначення епіталону для корекції досліджуваної ознаки [Хавинсон В.Х., Мыльников змін системи про- та антиоксидантного захисту С.В. Влияние эпиталона на возрастную динамику внутрішньом'язово. Корисна модель відрізняється ПОЛ у Drosophila Melanogaster // Бюл. эксперим. від прототипу тим, що епіталон вводять в іншій биол. и медицины. - 2006. - Т.130, №11. - С.585дозі: 0,17мкг/100г маси тіла щура. 588.]. Теоретичне підґрунтя для застосування споСпосіб здійснюється наступним чином. собу. При моделюванні іммобілізаційного стресу в За останні роки отримані переконливі дані, які старих щурів в умовах зміненого фотоперіоду щусвідчать про присутність в епіфізі мозку пептидів, рам уводять епіталон внутрішньом'язово у дозі що здатні здійснювати інформаційний зв'язок між 0,17мкг/100г маси тіла щура. різними клітинними групами і, таким чином, вплиПриклад практичного застосування способу. вати на їх функціональну активність [Мещишен Нами було проведено дослідження ефективІ.Ф., Пішак В.П., Заморський I.I. Мелатонін: обмін ності використання способу, що заявляється. Дота механізм дії // Бук.мед.вісник. - 2001. - Т.5, №2. сліди виконано на 54 старих (20-24міс) нелінійних С.3-15., Хавинсон В.Х., Анисимов В.Н. Пептидные білих щурах-самцях масою 300±10г. Впродовж биорегуляторы и старение. - СПб.: Наука, 2003. 1міс до початку та протягом експерименту тварин 223с.]. утримували у віварії за умов сталої температури За даними аналізу амінокислотної послідовно(18-21°С), вологості повітря (50-55%) в окремих сті пептидів епіфіза мозку в Санкт-Петербурзькому клітках з вільним доступом до води та їжі. Фотопеінституті біорегуляції та геронтології ПЗО РАМН ріодичні зміни в організмі тварин моделювали синтезований тетрапептид епіталон (Ала-Глу-Аспвпродовж 1 тижня шляхом зміни режимів освітГлі). Попереднє вивчення даного пептиду показалення за допомогою лампи штучного світла (інтенло, що він володіє геропротекторною дією, що диксивність освітлення не менше 500 Лк: 1) 12.00С тує необхідність більш глибшого вивчення механі(світло): 12.00Т(темрява); 2) 24.00С:00Т; 3) змів цієї дії [Ха винсон В.Х., Мыльников С.В. ООС:24.00Т. Іммобілізаційний стрес моделювали Влияние эпиталона на возрастную динамику ПОЛ на 8-му добу експерименту шля хом утримування у Drosophila Melanogaster // Бюл. эксперим. биол. и тварин впродовж 1год у пластикових кліткахмедицины. - 2006. - Т.130, №11. - С.585-588., пеналах. Dipeptide vilon as immunomodulator in radiation Для проведення дослідження використовували model of premature ageing / I.Knya zkin, P.Ze zjulin, синтетичний пептид шишкоподібної залози - епітаN.Byko v, A.Trofimiv // VI European Congress on лон у дозі 0,17мкг/100г щура, в/м, синтезований у Clinical Gerontology. - Moscow, 2002. - P.126-127.]. Санкт-Петербурзькому інституті біорегуляції та Відомі на сьогодні дані щодо аналізу змін фегеронтології ПЗО РАМН (Росія). Декапітацію тварментного (супероксидди-смутаза - СОД, каталаринам проводили о 14.00год під легким ефірним за) і неферментного (вітамінів А та Е) ланок АОС в наркозом згідно з положеннями "Європейської органах і тканинах щурів при різних світлових проконвенції щодо захисту хребетних тварин, яких міжках і уведенні мелатоніну та епіталону. В оргавикористовують в експериментальних та інших нах 6-місячних тварин виявлено відносно високу наукових цілях" (Страсбург, 1986). За 24год до стійкість АОС до змін світлового проміжку, а також експерименту тварин утримували без їжі з вільним 5 35208 6 доступом до води. Цільну кров стабілізували розЗа умов постійної темряви жоден із досліджучином ЕДТА (1,0мг/мл крові), розділяли на плазму ваних показників про- та антиоксидантної системи (центрифугування при 3000об/хв, 15хв) і еритроне зазнавали вірогідних змін порівняно з тваринацити (з триразовим промиванням охолодженим ми контрольної групи. фізіологічним розчином натрію хлориду). У плазмі Іммобілізаційний стрес на фоні тижневої темкрові визначали вміст церулоплазміну (ЦП) [Каряви викликав, як і у всіх попередніх дослідних мышников B.C. Справочник по клиникогрупах тварин, підвищення в крові рівня МА, ОМБ, биохимической лабораторной диагностике : в 2т. церулоплазміну та зниження активності каталази Мн.: Интерпрессервис, 2003. - Т.2. - С.74-75.] і HSта вмісту HS-гр уп. Уведення таким тваринам епігруп [Ме щишен І.Ф., Григорьева Н.П. Метод кількіталону нормалізувало показники МА (зменшення сного визначення HS-груп у крові // Бук.мед.вісник. на 25%), ОМБ (зменшення на 42%), каталази (під-2002. - Т.6, №2 - С.190-192.] та ОМБ [Ме щишен вищення на 41%) та ЦП (зменшення на 18%), а І.Ф. Метод визначення окисно-модифікованих білвміст HS-груп залишався вірогідно нижчим порівків плазми (сироватки) крові / Бук. мед. вісник. няно з тваринами контрольної групи. 1998. - Т.2, №1. - С.156-158]; в еритроцитах - ріПроведені дослідження вказують на те, що гівень малонового альдегіду та активність каталази пофункція (постійне освітлення) та гіперфункція [Камышников B.C. Справочник по клинико(постійна темрява) епіфіза мозку по-різному вплибиохимической лабораторной диагностике : в 2т. вають на показники про- та антиоксидантного стаМн.: Интерпрессервис, 2003. - Т.2. - С.74-75.]. ну крові старих щурів. Так, при гіпофункції шишкоОтримані результати оброблені методом варіаційподібної залози (7-ми добове освітлення) має ної статистики за допомогою програми ”BIOSTAT”. місце активація процесів ліпопероксидації, окисРезультати проведених досліджень вказують нювальної модифікації білків та пригнічення антина те, що одногодинний іммобілізаційний стрес у оксидантного захисту, тоді як при гіперфункції (7старих щурів за умов 12.00С:12.00Т впродовж семи добова темрява) не спостерігається вірогідних ми діб викликав активацію ПОЛ (рівень малоновозмін цих показників щодо контролю. Цей факт мого альдегіду зростав на 46,0%) та окисної модифіжна пояснити різною функціональною активністю кації білків (показник ОМБ зростав вдвічі порівняно шишкоподібної залози залежно від світлового пез контролем). За цих же умов експерименту активріоду доби. ність каталази еритроцитів та вміст HS-груп у плаІммобілізаційний стрес за умов зміненого фозмі крові зменшилися на 51,6 і 42,7% відповідно, а топеріоду викликає різку активацію вільнорадикарівень церулоплазміну підвищився на 80,8% льних процесів на фоні зниження антиоксидантно(табл.2). го захисту крові старих щурів. Уведення тваринам Уведення стресованим тваринам епіталону епіталону за цих умов призводить до нормалізації наближало рівні в крові МА, ОМБ та активність досліджуваних показників, що може вказувати на каталази до норми; рівень ЦП та HS-груп проявляв його безпосередню (як месенджера вільних радичітку тенденцію наближення до величин контролю. калів), чи посередню (через продукцію мелатоніну Постійне освітлення (тварини четвертої групи) шишкоподібною залозою) антиоксидантну дію. посилило (у 2,5 раза) окисну модифікацію білків Таким чином, при вивченні корегуючого впливу плазми крові та активацію каталази (на 24,6%). епіталону на показники ПОЛ - а саме на рівень Відносно інших показників, то вони не відрізнялися малонового альдегіду при іммобілізаційному стревід тварин контрольної групи (12.00С:12.00Т). Імсі доведено, що епіталон найефективніше відновмобілізаційний стрес на фоні тривалого освітлення лює показник МА при гіперфункції епіфіза мозку призводив до різкого підвищення в крові вмісту МА на 25%. При дослідженні процесів вільного ради(на 55,6%) та ОМБ (майже втричі порівняно з конкального окиснення, показник ОМБ найкраще протролем) і незначного зростання величини церулореагував на вплив епіталону за умов гіпофункції плазміну (на 30,0%). Активність каталази та рівень шишкоподібної залози - відмічається зменшення HS-груп знижувалися на 38,4 і 32,7% відповідно. цього показника на 47%. Уведення епіталону на фоні постійного освітлення Технічний результат: застосування епіталону та іммобілізаційного стресу призвело до вираженої за способом, що заявляється, призводить до коретенденції щодо нормалізації вивчених показників: кції показників про- та антиоксидатного захисту в рівні в крові МА (зменшився на 7,3%), ОМБ (зменстарих щурів при моделювання іммобілізаційного шився на 47%) та церулоплазміну (на 25%), а акстресу на фоні зміненого фотоперіоду. тивність каталази та вміст HS-груп наближалися до рівня контролю. Комп’ютерна в ерстка В. Мацело Підписне Тираж 28 прим. Міністерство осв іт и і науки України Держав ний департамент інтелектуальної в ласності, вул. Урицького, 45, м. Київ , МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислов ої в ласності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601