Спосіб консервування сперми людини

Изобретение относится к медицине, предназначено для низкотемпературного консервирования спермы человека для искусственной инсеминации. Цель изобретения - повышение выживаемости спермы человека. Для этого сперму помещают на.25-30 мин в термостат (37°С) для разжижения. Затем к сперме добавляют в соотношении 1:1 консервирующую среду со следующими компонентами, мае. %: глюкоза 3,74,3; натрий лимоннокислый 1,1-1,4; желток куриного яйца 24,0-30,0; 20%ный р-р холинахлорида 1,6-2,4і глицерин 4,6-6,0; вода дистиллированная - остальное. Затем сперму разливают в подключичные катетеры после 45-60 мин эквилибрации при комнатной температуре. Замораживают с начальной скоростью 0,5 град/мин до +2 - +5°С, затем 90-100 град/мин до температуры от -180 до -190 С, переносят в жидкий азот для хранения. 1 табл. С СО СЛ ел ГчЭ 1 1355212 ее сначала со скоростью 1 град/мин Изобретение относится к медицине ff до +2 Ct а затем " со скоростью и может быть использовано при низко90 град/мин до -180°С, после чего температурном консервировании спермы образцы перенесли для хранения в жидчеловека с целью искусственной инсекий азот. Размораживание осуществляли минации. через 3 недели хранения в водяной баЦелью изобретения является повыне при 40°С в течение 5 с. шение выживаемости спермы человека. Способ осуществляют следующим обДанные сперматограммы: рН 7,4, образом. щее количество спермиев в 1 мл 62 млн, Сперму помещают на 25-30 мин в подвижных спермиев 55%, активно подтермостат (37°С) для разжижения. Посвижных 43%, спермиев нормальной форле этого к сперме в соотношении 1:1 мы 72%. добавляют консервирующую среду, соП р и м е р 2. Для опыта взяли держащую следующие компоненты, мае.%: 2 пробы спермы по 2 мл и добавили к Глюкоза 3, 7-4,3 ней по 2 мл среды, содержащей,мае.%: Натрий лимонноГлюкоза 4,0 кислый 1, 1 -1,4 Натрий лимонноЖелток куриного кислый 1,2 яйца 24,0-30,0 Желток куриного 20%-ный раствор яйца , 26,0 холинахлорида 1,6-2,4 Глицерин 5,0 Глицерин 4,6-6 20%-ный раствор Вода дистиллирохолинахлорида • * Остальное ванная Остальное После расфасовки спермы по 0,3 мл После 45-60 мин эквилибрации при в подключичные катетеры ее заморозили: сначала обе пробы заморозили со комнатной температуре сперму разлискоростью 1 град/мин до +5°С, а завают в подключичные катетеры. тем одну пробу замораживали со скоЗамораживание осуществляют сначала со скоростью 0,5 град/мин до 2 30 ростью 90 град/мин, другую - со скоростью 100 град/мин. После того как 5 С, а затем со скоростью 90 обе пробы заморозили до -\80°С, их 100 град/мин до температуры от -180 перенесли для хранения в жидкий азот. до -190 С, после чего переносят в Через три недели разморозили в водяжидкий азот для хранения. Разморажиной бане. При этом получены следуювание осуществляют в водяной бане 35 щие результаты: при 40°С в течение 5-7 с. П р и м е р 1. Для опыта взяли Скорость охлаждеПодвижность сперсперму со следующими показателями: ния на II этапе объем эякулята 2,4 мл, общее колимов после размочество сперматозоидов 136 млн в 1 мл, 40 замораживания, раживания, % С/мин нз них активно подвижных 65%, подвижных форм 71%, нормальных форм 80%, лейкоцитов 1-2 в поле зрения, про90 48,81+1,48 статические тельца изредка, вязкость нормальная. J00_ 46,13+3,42 К 2 мл спермы после ее разжижения добавили 2 мл среды, содержащей,мае.% Приведенные примеры свидетельстГлюкоза 4,0 вуют о том, что применение глицерина Натрий лимоннов концентрации 4,6-6% и ведение замокислый 1,2 раживания на II этапе со скоростью 50 Желток куриного яйца 26,0 90-100 град/мин способствует повышеГлицерин 5,0 нию выживаемости спермы после размо20%-ный раствор раживания, что является весьма сухолчнахлорида 2,0 щественным для последующей инсемиВода дистиллиронации. 55 ванная Остальное Ф о р м у л а и з о б р е т е н и я Через 45 мин после этого спермой Способ консервирования спермы чезапочнили подключичные катетеры диаловека путем двуступенчатого замораметром 1,4 мм по 0,3 мл и заморозили живания до -180 -190 С в криокон 3 1355212 4 серванте, содержащем глицерин, со но-цитратном консерванте, концентскоростью замораживания на первом рация глицерина в котором составляет этапе 0,5-1,0 град/мин до температу4,6-6£, а отношение объема последнеры не выше +5°С, о т л и ч а ю го к объему замораживаемой спермы щ и й с я тем, что, с целью повысоставляет 1:1, при этом замораживашения выживаемости спермы, заморажиние на втором этапе ведут со ско— вание осуществляют в глюкозо-желточростьюг 90-100 град/мин. Редактор М.Циткина Составитель Л.Гохштейн Техред Л.Сердюкова Корректор В.Бутяга Заказ 5731/А Тираж 628 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5 Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, А