Спосіб моделювання цукрового діабету 2 типу у щурів

Спосіб моделювання цукрового діабету 2 типу у щурів шля хом комбінованого впливу високожирової дієти та хімічного агента, який відрізняється тим, що статевозрілих самців-щурів лінії Вістар утримують на високожировій дієті протягом чотирьох тижнів, після чого роблять внутрішньочеревну ін'єкцію розчину стрептозотоцину у цитратному буфері у дозі 40мг/кг маси тіла. (19) (21) u200810259 (22) 11.08.2008 (24) 12.01.2009 (46) 12.01.2009, Бюл.№ 1, 2009 р. (72) ГЛАДКИХ ОЛЕКС АНДР ІВАНОВИЧ, U A, ПОЛТОРАК ВІКТОРІЯ ВІТАЛІЇВН А, UA, КРАСОВА НАТАЛІЯ СЕРГІЇВНА, UA, ЛЕЩЕНКО ЖАН А АНАТОЛІЇВН А, UA, ФЕДОРОВА ГАНН А ВОЛОДИ МИРІВНА, UA (73) ДЕРЖАВНА УСТАНОВА "ІНСТИТУТ ПРОБЛЕМ ЕНДОКРИННОЇ ПАТОЛОГІЇ ІМ. В.Я. ДАНИ 3 38466 гризунам інших видів (миші, Сирійські хом'ячки, Psammomus obesus та ін.) [7]. Із хімічних сполук найчастіше застосовують алоксан, дитизон та стрептозотоцин для відтворювання гіперглікемії, та глюкокортикоїди (дексаметазон) - для моделювання інсулінорезистентності [8]. Але використання вищеозначених моделей не завжди задовольняє вимогам експериментальних ендокринологів та фармакологів, оскільки дозволяє відтворити тільки окремі ланки патогенетичного процесу. В зв'язку з цим з'являються моделі з комбінацією чинників: дієтичний вплив + хімічний агент. Найбільш наближеною до патогенезу та метаболічних характеристик ЦД 2 типу у людини моделлю такого типа натепер є модель вживання протягом 2 тижнів високожирової дієти (40% загального калоража за рахунок жирів) з наступною внутрішньовенною ін'єкцією стрептозотоцину (40мг/кг маси тіла) для відтворення гіперглікемічного стану у поєднанні з ожирінням та дисліпідемією у 7-тижневих щурів-самців лінії Sprague-Dawley [9]. Однак використання вищезазначеної моделі в Україні є проблематичним у зв'язку з відсутністю тварин цієї лінії в розплідниках науково-дослідних та господарчих установ країни. Задача винаходу - розробка оптимізованого способу моделювання цукрового діабету 2 типу у щурів. Поставлена задача вирішується тим, що статевозрілих самців-щурів лінії Вістар утримують на високожировій дієті (40% загального калоража за рахунок насичених жирів) протягом чотирьох тижнів, після чого роблять внутрішньочеревну ін'єкцію розчину стрептозотоцину у цитратному буфері (рН 4,5) у дозі 40мг/кг маси тіла. Технічний результат - розширення арсеналу експериментальних моделей для відтворення провідних патогенетичних ланок цукрового діабету 2 типу. 4 Спосіб апробовано на 6 статевозрілих (4місячних) самцях-щурах лінії Вістар. Моделювання ЦД 2 типу проводили шляхом введення низької дози стрептозотоцину (40мг/кг внутрішньочеревно, на цитратному буфері рН 4,5) після 4-х тижневого утримання тварин на високожировому раціоні харчування (дієта з надмірним вмістом насичених жирів, 40% загального калоража), з вільним доступом до води та природною зміною режиму освітлення, температура та вологість повітря - за стандартами віварію. Контрольна група тварин відповідної статі та віку споживала стандартне харчування (10% загального калоража за рахунок жирів) та утримувалася в аналогічних умовах. Стан глюкозного гомеостазу оцінювали в різні терміни після відтворення моделі (7, 14 та 21 добу) за показниками базальної глікемії та внутрішньочеревного тесту толерантності до глюкози (ВЧТТГ) (3г на кг маси тіла). Площину під глікемічними кривими (ППК) при проведенні ВЧТТГ розраховували за допомогою комп'ютерної програми "Mathlab". Коефіцієнт чутливості до інсуліну розраховували за допомогою інсулінового тесту (0,2Од/кг маси тіла підшкірно) [10]. Оцінювали динаміку ваги тварин протягом експерименту. Концентрацію неестерифікованих жирних кислот (НЕЖК) в сироватці крові оцінювали фотоколориметрично [11], рівень тригліцеридів - спектрофотометричним методом [12]. Цифровий матеріал обробляли статистично з використанням параметричного критерію Ст'юдента [13]. В результаті проведеного дослідження було встановлено, що через 1 тиждень після ін'єкції стрептозотоцину у тварин експериментальної групи спостерігалася базальна гіперглікемія та глюкозна інтолерантність, підтвердженням чому є підвищення показників площини під відповідними глікемічними кривими при проведенні навантажувального тесту з глюкозою (табл. 1). Таблиця 1 Показники глюкозного гомеостазу у щурів з цукровим діабетом 2 типу, (X±Sx) Показники після відтворення моделі через... 7 діб 21 добу Базальна глікемія, ППК, ммоль/л/хв Базальна глікемія, ммоль/л ммоль/л Група тварин n Інтактний контроль 5 3,87±0,15 588,33±23,81 4,04±0,11 625,44±16,56 Діабет 6 10,90±0,40 Р