Спосіб одержання антигену для діагностики туберкульозу у кровокраплинній реакції аглютинації

Спосіб одержання антигену для діагностики туберкульозу у кровокраплинній реакції аглютинації, що включає інактивацію, виготовлення бактеріальної маси, який відрізняється тим, що інактивацію бактеріальної маси проводять за допомогою автоклавування при 0,5 атм. протягом 60 хвилин з антигеном, який вміщує 5 мг/см 3 бактеріальних клітин. (19) (21) u200810256 (22) 11.08.2008 (24) 12.01.2009 (46) 12.01.2009, Бюл.№ 1, 2009 р. (72) ЗАВГОРОДНІЙ АНДРІЙ ІВАНОВИЧ, UA, СТЕГНІЙ БОРИС ТИМОФІЙОВИЧ, U A, ПОЗМОГОВА СВІТЛАН А АРКАДІЇВН А, U A, ШАПОВАЛОВА ОЛЬГА ВІКТОРІВН А, U A, АЛЕКСЄЄВА Н АТАЛІЯ ВІКТОРІВН А, U A (73) НАЦІОН АЛЬНИЙ НАУКОВИЙ ЦЕНТР "ІНСТИ 3 38467 4 вить 5мг/см 3 розчину. Результати активності і специфічності виготовлених антигенів в порівнянні з прототипом приведені в таблиці. З матеріалів таблиці видно, що при дослідженні проб крові від інфікованої М. avium птиці з антигеном, що вміщува в 1мг/см 3 бактеріальних клітин, позитивну ККРА відмічали на 15 добу тільки у 1 голови, 3мг/см 3 - у 4 голів, 5мг/см 3 - у 5 голів, а на 20 добу у 3 голів, 4 голів та 6 голів відмічено тоді, як з антигеном-прототипом на 15 добу позитивна ККРА встановлена у 4 голів, 20 добу - 5 голів та на 30-40 добу - у 6 голів. Через 30 діб позитивна ККРА була встановлена у птиці з антигеном 1мг/см 3 у 5 голів, 3мг/см 3 - 6 голів і 5мг/см 3 - 6 голів, а на 40 добу після ін'єкції М. avium позитивна ККРА з антигеном була встановлена у всі х хворих туберкульозом курей. При дослідженні проб крові від контрольної групи курей в ККРА з дослідним антигеном при п'яти дослідженнях отримано негативний результат, а з антигеном-прототипом в одному випадку сумнівна реакція та самоаглютинація в контролі. Результати проведених досліджень свідчать про те, що антиген із штаму М. avium, який вміщує 5мг/см 3 бактеріальних клітин не володіє самоаглютинуючими властивостями, має високу активність і специфічність та дозволяє на 5-10 добу виявити інфіковану збудником туберкульозу М. a vium хвор у птицю. чному розчині, що вміщує 0,1% формаліну та 0,4% натрію цитрату до кінцевої концентрації бактеріальної маси 1мг см 3 розчину. До одержаного таким чином антигену додають 0,003% малахітового зеленого. Отриманий таким чином антиген перевіряють на активність та специфічність з кров'ю здорових та хворих на туберкульоз курей в ККРА. ККРА проводять на предметних скельцях при температурі 18-20°С таким чином. На предметне скельце наносять краплину антигену в об'ємі 0,03см 3 та змішують з 0,04см 3 крові від хворої на туберкульоз птиці. Другу краплину антигену (0,03см 3) змішують з 0,03см 3 крові від здорових курей. Облік реакції враховують через 2 хвилини. Результат вважають позитивним при появі дрібних або крупних скупчень у вигляді піску світло-сірого кольору та просвітлення рідини з кров'ю хворих курей. При негативній реакції рідина (антиген + кров) залишається гомогенною без просвітлення та утворення піщинок з кров'ю здорових курей. Приклад №1. Антиген виготовляють із інактивованої бактеріальної маси як вказано вище при концентрації бактеріальних клітин 1мг/см 3 розчину, отриманий антиген перевіряють на активність і специфічність з цільною кров'ю здорових та хворих туберкульозом курей. Приклад №2. Так само, як і в прикладі №1 тільки концентрація бактеріальних клітин становить 3мг/см 3 розчину. Приклад №3. Так само, як і в прикладі №1, тільки концентрація бактеріальних клітин стано Таблиця Спосіб одержання антигену для діагностики туберкульозу у крокраплинній реакції аглютинації (ККРА) Кількість заражених голів 1 2 3 4 5 6 Контроль (здоров і кури) 1 2 3 4 5 6 Контроль (фіз. розчин) 10 1мг/см 15 20 + + + + 3 30 + + + + + + 40 + + + + + + Реагув али з антигенами в ККРА через діб (гол) Досліджуваний антиген 3мг/см 3 5мг/см 3 10 15 20 30 40 10 15 20 30 40 + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + Прототип 10 15 + + + + 20 + + + + + 30 + + + + + + 40 + + + + + + + + Комп’ютерна в ерстка А. Крулевський Підписне Тираж 28 прим. Міністерство осв іт и і науки України Держав ний департамент інтелектуальної в ласності, вул. Урицького, 45, м. Київ , МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислов ої в ласності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601