Спосіб оцінки резистентності організму

Спосіб оцінки резистентності організму шляхом забору проб біологічного матеріалу з наступним визначенням в них вмісту імуноглобулінів класів А, М, G методом радіальної імунодифузм у гелі по Манчіні та показника резистентності, який відрізняється тим, шо як біологічний матеріал використовують слину, та визначають показник місцевої резистентності по формулі Де •M o -G c _ В | К 0 В И И коефіцієнт, Винахід відноситься до медицини, біологи та валеологм і може бути використаний для оцінки місцевої резистентності організму Відомий спосіб прогнозування частих інфекційних захворювань дггей (а с СРСР 1332229, кл G01 №33/48, від 1985) шляхом забору проби сійни з наступним визначенням вмісту імуноглобулінів класів А та G методом радіальної імунодіфузм по Манчіні, активності лізоциму нефелометрічним методом та визначення коефіцієнта К по формулі G-40 , де A-0.6-L G - вміст імуноглобуліну G, г/л А - вміст імуноглобуліну А, г/л L - рівень активності лізоциму, при значеннях К більше 2 прогнозують часті захворювання Як і в запропонованому винаході, у відомому способі оцінку резистентності організму здійснюють шляхом забору проб слини з наступним визначенням в них вмісту імуноглобулінів класів А та G, К= AxМхGxLx вміст у пробі Імуноглобулінів класу А, г/л, вміст у пробі Імуногдобулінів класу М, г/л, вміст у пробі Імуноглобулінів класу G, г/д, рівень активності лізоциму у пробі %, Ао, Mo, Go, Lo - нормативнБ величини, ВІДОМІ З практики, І при значеннях МПР у ВІЦІ 6-10 років від 49,52 до 83,5 умовних одиниць, у ВІЦІ 11-15 років від 27,74 до 83,46 умовних одиниць, у ВІЦІ 16-18 років від 118,9 до 190,4 умовних одиниць, у ВІЦІ 19-29 років від 136,33 до 177,87 умовних одиниць, у ВІЦІ 30-45 років від 241,28 до 260,00 умовних одиниць, у ВІЦІ 46 і більше років від 77,26 до 99,86 умовних одиниць, місцеву резистентність організму оцінюють як нормальну, вище перенапружену, нижче знижену а також рівня активності лізоциму Причиною, що перешкоджає отриманню технічного результату є недостатня вірогідність способу в цілому ряді захворювань, наприклад при лейкозних процесах При використанні відомого способу при лікуванні хворих гемобластозами можливі невірогідні результати, оскільки лейкозний процес супроводжується дизімуноглобулонімією, що проявляться у збільшенні концентрації імуноглобулінів класу А і особливо М Крім того, при окремих формах гемоцитобластоза має місце посилення лізоцимної активності, що також може призвести до одержання невірогідних результатів Відомий спосіб оцінки резистентності організму шляхом забору крові, одержання сироватки та визначення вмісту в ній імуноглобулінів класів А, М, G, а в крові - визначення абсолютної КІЛЬКОСТІ В-лімфоцитів Показник резистентності організму визначають по формулі 00 о ю 45108 М- вміст імуноглобулінів класу М, г/л ріалу слини та визначення резистентності за ноG - вміст імуноглобулінів класу G, г/л вою формулою дозволило б здійснювати забір А - вміст імуноглобулінів класу А,г/л проб біологічного матеріалу нетравмуючим прироВ - абсолютна КІЛЬКІСТЬ В-лІмфоцитІв, кл/мкл дним способом, а оцінку резистентності по формуПри ПР більше 5,78 резистентність організму лі, що більш повно враховує ефективність стимуоцінюють як нормальну, при ПР менше 5,78, але люючої функції лізоциму у відношенні імуноглобубільше 3,04 - як знижену, а при ПР менше 3,04 лінів класів А, М, G і за рахунок цього збільшити як низьку безпечність способу, його інформативність, а також спростити процес обстеження та обробки проб Як і в запропонованому винаході, в відомому досліджуваного біологічного матеріалу аналогу резистентність організму оцінюють шляхом забору проб біологічного матеріалу з наступСуть винаходу полягає в тому, що в способі ним визначенням в них імуноглобулінів класів А, оцінки резистентності організму шляхом забору М, G методом радіальної імунодифузм у гелі по проб біологічного матеріалу з наступним визначенМанчіні та визначення показника резистентності ням в них вмісту імуноглобулінів класів А, М, G мепо формулі тодом радіальної імунодифузм у гелі по Манчіні та показника резистентності, як біологічний матеріал Причиною, що перешкоджає отриманню технівикористовують слину та визначають показник місчного результату є використання крові як біологічцевої резистентності по формулі ного матеріалу, що супроводжується травмуючою дією на організм та можливістю ураження хвороА у -М у -GY бами, що передаються через кров (інфекційний геШ> =— — - І М 0 0 , Де L патит, венеричні захворювання, СНІД) Крім того, X відомий спосіб недостатньо вірогідний, бо формуА -М -G ла для визначення ПР враховує лише сумарний К =— — — - віковий коефіцієнт вміст імуноглобулінів класів А, М, G але не врахоLо вує їх корелятивне взаємопотенціювання, яке обуАх- вміст у пробі імуноглобулінів класу А,г/л мовлює ефективність їх впливу на нейтралізацію Мх- вміст у пробі імуноглобулінів класу М,г/л як бактеріальних токсинів, так і бактерицидність, а Gx- вміст у пробі імуноглобулінів класу G.r/л також лізоциму та його активності, який є стимуляLx- рівень активності лізоциму у пробі,% тором захисних функцій природних антитіл Ао, М о , G o , Lo - нормативні величини, ВІДОМІ З Як прототип вибрано традиційний спосіб випрактики значення резистентності організму шляхом забору При значеннях ПМР крові, одержання сироватки з наступним визначену ВІЦІ 6-10 років від 49,52 до 83,5 умовних ням в ній вмісту імуноглобулінів класів А, М, G меодиниць тодом радіальної імунодифузм у гелі по Манчіні у ВІЦІ 11-15 років від 27,74 до 83,46 умовних Резистентність організму не прямо оцінюють по одиниць ЗМІНІ відносно норми вмісту імуноглобулінів класів у ВІЦІ 16-18 років від 118,9 до 190,4 умовних А, М, G в сироватці крові (Mancmi G et al одиниць Immunochemistry, 1965, М 2, Р 235-254) у ВІЦІ 19-29 років від 136,33 до 177,87 умовних Як і в запропонованому винаході, резистентодиниць ність організму в прототипі визначають шляхом зау ВІЦІ 30-45 років 241,28 до 260,00 умовних бору проб біологічного матеріалу з визначенням одиниць вмісту в них імуноглобулінів класів А, М, G, метоу ВІЦІ 46 років і більше від 77,26 до 99,86 дом радіальної імунодифузм у гелі по Манчіні з поумовних одиниць СЛІДІЮЧОЮ оцінкою резистентності організму місцеву резистентність організму оцінюють як Причиною, що перешкоджає отриманню технінормальну, вище - перенапружену, нижче чного результату є те, що відомий спосіб інформазнижену тивний лише у випадках гострих запалювальних Запропонований винахід відрізняється від процесів, коди імуноглобуліни класів А та G залипрототипу тим, що як біологічний матеріал шаються в нормі або збільшуються без впливу на використовують слину та визначають показник вміст імуноглобуліну класу М місцевої резистентності по формулі В той же час у випадках гострого та підгостроА у -My -GY го перебігу хвороби інформативність оцінки без Ш> =— — - І М 0 0 , Де L урахування вмісту імуноглобуліну клас М значно x знижується у зв'язку з тим, що в організмі одночас-Mr, -G но має місце як збільшення вмісту імуноглобуліну - віковий коефіцієнт к= L класу М, так і імуноглобулінів класів А та G Це обумовлено перенапруженням функції антитілоутАх- вміст у пробі імуноглобулінів класу А, г/л ворення, що є важливо в процесі модуляції імуноМх- вміст у пробі імуногдобулінів класу М, г/л генеза В-лІмфоцитами Крім того, прототип не заGx- вміст у пробі імуноглобулінів класу б, г/л безпечує нешвазивність методу дослідження у Lx- рівень активності лізоциму у пробі,% осіб різного віку та пов'язаний з можливістю ураАо, М о , G o , Lo - нормативні величини .ВІДОМІ З ження інфекційними захворюваннями (інфекційний практики гепатит, венеричні захворювання, СНІД) і при значеннях ПМР у ВІЦІ 6-10 років від 49,52 до 83,5 умовних одиВ основу винаходу поставлено завдання ствониць рити такий спосіб визначення резистентності організму, в якому використання як біологічного матеу ВІЦІ 11-15 років від 27,74 до 83,46 умовних 45108 одиниць у ВІЦІ 16-18 років від 118,9 до 190,4 умовних одиниць у ВІЦІ 19-29 років від 136,33 до 177,87 умовних одиниць у ВІЦІ 30-45 років від 241,28 до 260,00 умовних одиниць у ВІЦІ 46 і більше років від 77,26 до 99,86 умовних одиниць місцеву резистентність організму оцінюють як нормальну, вище - перенапружену, нижче - знижену Досягнення технічного результату зумовлено тим, що вибрані показники оптимальні для визначення стану неспецифічної опорності місцевих факторів захисту Авторами винаходу була встановлена та підтверджена на базі власних діагностичних досліджень та лггературних даних їх корелятивна залежність, зумовлена біологічною природою показників, що входять в запропоновану формулу БІОЛОГІЧНИЙ матеріал, що вибраний для досліджень, являє собою секрет слинних заліз (слину), до складу якої входять гуморальні фактори неспецифічної резистентності, аналогічні таким, що містяться у плазмі крові Так імуноглобулін класу А у сироватці крові та слині виконує антибактеріальну та антитоксичну функцію, імуноглобулін класу М, що мав філогенетичну природу, відбиває стан імуногегезу організму в цілому, імуноглобулін класу G є активатором фагоцитарної функції поліморфноядерних лейкоцитів Загальною якістю імуноглобулінів, що містяться в слині та сироватці крові є їх захисна функція, яка забезпечує як загальну не специфічну резистентність, так і місцевий бар'єр опору Таким чином по вмісту імуноглобулінів класу А, М, G можна оцінювати процес модуляції імуногенезу в організмі Різниця МІЖ СЛИНОЮ та плазмою крові в наявності в останній крім гуморальних факторів клітинних, що забезпечують утилізацію шкідливих для організму ендо- та екзогенних токсичних продуктів шляхом фагоцитоза їх поліморфно-ядераими лейкоцитами з наступною елімінацією Згідно З загально прийнятними поданнями ("Імуноглобуліни"під ред Г Літмана та Р Гуда, М 1981, вид "Мир", 495 с ) на мембранах імуноглобулінів в якості рецепторів присутні мембранні рецептори, які забезпечують взаємозв'язок імуноглобулінів класів А, М, G Цей взаємозв'язок зумовлює ефективність впливу на потенційовану взаємодію імуноглобулінів класів А, М, G на нейтралізацію як бактеріальних токсинів, так і бактиріцидність Крім того, дана розрахункова формула дозволяє шляхом введення показника активності лізоциму, враховуючи його ферментну природу, визначити рівень активації захисної функції імуноглобулінів класів А, М, G, які являють собою природні антитіла Для спрощення розрахунків в формулу були введені нормативні коефіцієнти (див таблицю), що засновані на нормативних даних, одержаних на базі лабораторно-діагностичних досліджень, які були виконані на протязі багатьох років (19721982) на великій КІЛЬКОСТІ обстежених Указані нормативні коефіцієнти наведені в авт свід СРСР 1180000, кл А61К 39/00, 1578657 кл G01N 33/53, журналі "Лабороторное дело",№ 8, 1989, С 54 Спосіб здійснюється таким чином У обстеженого провадять забір слини у КІЛЬКОСТІ 2-ЗМЛ В суху пробірку Перед забором слини провадять підготовку ротової порожнини, що передбачає механічну обробку кип'яченою водою з наступним ретельним полосканням ротової порожнини дистильованною водою Через 15-20 хвилин після обробки починають забір проби безпосередньо в пробірку, 3 одержанні проби відбирають в окрему пробірку слину в КІЛЬКОСТІ 1мл В цю пробірку вводять 2мл фізіологі9 чного розчину, змішують та додають 1мл 10 вивесі бактеріальної тест-культури Lyzodetecticus(o), суміш перемішують, провадять первинне фотоелектроколориметрування, враховують одержаний результат Потім пробірки з бактеріальною вивессю та досліджуємою пробою слини термостатують при 37°С на протязі 3 годин, потім вдруге здійснюють нефелометрію При цьому як контроль використовують фізіологічний розчин Розраховують активність лізоциму І_х по формулі Lv = °~ ] -100%, Де X А, До - оптична ЩІЛЬНІСТЬ до термостатування в пробі Ді - оптична ЩІЛЬНІСТЬ після термостатування в пробі Потім З одержаної проби відбирають в 3 пробірки проби слини в КІЛЬКОСТІ 0,025мл для визначення вмісту імуноглобулінів класів A,M,G та методом радіальної імунодифузм у гелі по Манчіні визначають вміст імуноглобулінів даних класів Одержані результати підставляють в формулу ПМР Для спрощення розрахунків в співвідношення, А. , що являє собою постійну нормативну величину для кожної вікової групи, введений коефіцієнт К (див таблицю) Основна перевага запропонованого способу полягав у фіксованій ОЦІНЦІ стану імунологічних змін, що характеризують не специфічну опорність організму в цілому, в тому числі і факторів місцевого захисту Це дає можливість більш вірогідно діагностувати стан здоров'я на базі стійких змін захисних якостей імунорезистентності Якість імунної системи на протязі довгого часу зберігати зміни, що виникли в організмі, дозволяють оцінити рівень його захисних можливостей після закінчення дії несприятливих екзо- та ендогенних факторів, що є прогностичним і дає можливість пролонговано обирати адекватні методи лікування та корекції для профілактики можливих порушень стану здоров'я Приклад 1 Обстежуваний К звернувся до валеолопчної лабораторії з проханням обстежити стан резистентності організму Для цього був проведений збір проби слини згідно із способом в КІЛЬКОСТІ Змл, потім були приготовані проби для визначення в них вмісту імуноглобулінів класів А, М, G та активності лізоциму Вміст імуноглобуліну класу А складав 39г/л Вміст імуноглобуліну класу М складав 1,35 г/л Вміст імуноглобуліну класу G складав 7,91 г/л Рівень активності лізоциму L складав 68,15% 45108 8 Вміст імуноглобуліну класу А складав 6,2г/л Вміст імуноглобуліну класу М складав 1,02г/л Вміст імуноглобуліну класу G складав 7,57г/л Рівень активності лізоциму и складав 68,85% Одержані дані були підставлені в формулу Одержані дані були підставлені в формулу ПМР _ 3,9-1,35-7,91 68,15 ' ' (норма 118,9) мало місце зниження показника місцевої резистентності організму Обстежуваному була впроваджена фггокорекція сиропом "Валеотон" на протязі 1 місяця Дослідження проби слини після корекції встановило Вміст імуноглобуліну класу А - 5,7 г/л Вміст імуноглобуліну класу М -2,85 г/л Вміст імуноглобуліну класу G -8,91 г/л Рівень активності лізоциму - 82,45% Одержані дані були підставлені в формулу ПМР Ш = 0 ПМР ІЮ = 3,07-1,02-7,57 1,58-100 = 65,56 68,85 (норма 1 . , ^__. 241,28) Обстежуваному була впроваджена фггокорекція сиропом "Валеотон" на протязі 1 місяця Дослідження проби слини після корекції дозволило встановити Вміст імуноглобуліну класу А - 6,2г/л Вміст імуноглобуліну класу М -1,71 г/л Вміст імуноглобуліну класу G - 9,26г/л Рівень активності лізоциму L складав 70,45% Одержані дані були підставлені в формулу = 82,45 Одержані дані свідчать про високу ступінь функціонального стану захисних бар'єрів місцевої резистентності та загального опору організму також Обстежуваний відпущений та знятий з обліку в задовільному стані Приклад 2 Обстежуваний М у ВІЦІ 43 роки скаржився на болі в нижній частині живота та цитоуретріт Був обстежений стан резистентності його організму Для цього був проведений забір проби слини в КІЛЬКОСТІ Змл, потім були приготовані проби для визначення в них вміст імуноглобулінів класів А, М, G та активності лізоциму 1Ю = .1,58.100 = 254,49 70,45 Обстежуваний відпущений та знятий з обліку в задовільному стані Таблиця Спосіб оцінки резистентності організму Вік 6-Ю 11-15 К 0,81 0,73 16-18 19-29 1,23 ДП "Український інститут промислової власності "(Укрпатент) Україна, 04119, Киів-119, вул сім'ї Хохлових, 15 (044) 456-20-90 1,20 30-45 45 і більше 1,58 0,97