Спосіб оцінки сполучного впливу на організм ссавців нітробензолу та позитивних низьких температур в експерименті

Спосіб оцінки сполучного впливу стресових чинників на організм ссавців нітробензолу та позитивних низьких температур в експерименті, що включає вимір показників змін функціонування біологічних систем організма, який відрізняється тим, що вплив на організм даних чинників оцінюють після 30 затравок за показниками гематологічних змін: метгемоглобіну, сульфгемоглобіну, лейкоцитів, ретикулоцитів і сегментоядерних лейкоцитів та за коефіцієнтом маси печінки та селезінки. (19) (21) u200911054 (22) 02.11.2009 (24) 25.03.2010 (46) 25.03.2010, Бюл.№ 6, 2010 р. (72) ЗАВГОРОДНІЙ ІГОР ВОЛОДИМИРОВИЧ, НАКОНЕЧНА ОКСАНА АНАТОЛІЇВНА, СТЕЦЕНКО СВІТЛАНА ОЛЕКСАНДРІВНА, КАПУСТНИК ВАЛЕРІЙ АНДРІЙОВИЧ, М'ЯСОЄДОВ ВАЛЕРІЙ ВАСИЛЬОВИЧ, БАЧИНСЬКИЙ РУСЛАН ОРЕСТОВИЧ, САВЕЛЬЄВА ОЛЕНА ВАЛЕРІЇВНА (73) ХАРКІВСЬКИЙ НАЦІОНАЛЬНИЙ МЕДИЧНИЙ УНІВЕРСИТЕТ 3 групи піддавалися сполучному впливу НБ і позитивної низької температури повітря 4°±2°С. Тварини 2-й групи піддавалися ізольованому впливу тільки позитивної низької температури 4°±2°С, тобто були контролем стосовно тварин 1-й групи. Позитивні низькі температури (тобто холодової стрес) моделювалися в умовах 200-літрової затравочної камери загального призначення Б.А.Курляндського і співавторів (Методы определения токсичности и опасности химических веществ / Под ред. И. В. Саноцкого. // АМН СССР. М.: Медицина, 1970 - С. 70-73.), додатково обладнаної осередками, що забезпечують ізольоване вільне розміщення тварин, а також термоелектричним охолоджувальним пристроєм типу повітряповітря (модель: 180-24-АА, серійний номер: 040100) інженерно-виробничої фірми «Криотерм» (Санкт-Петербург, Росія). Вивчення особливостей токсикодинаміки НБ в умовах холодового стресу і температурного оптимуму в умовах підгострого токсикологічного експерименту проводилися шляхом введення НБ у шлунок у дозі 1/10 ЛД50, що складало 70мг/кг маси тіла щурів (Василенко Н. М. Токсикология ароматических аминов и нитросоединений бензольного ряда - продуктов анилинокрасочной промышленности: Автореф. дисс. ... д-ра мед. наук. - К., 1980. - 45с.). НБ вводили в шлунок спеціальним зондом у виді 1% розчину на соняшниковій олії, а тваринам контрольних груп - відповідно соняшникова олія в таких же кількостях. З метою виявлення змін показників, що вивчалися, їхнє визначення в контрольних і піддослідних тварин проводили після 5, 15 і 30 затравки НБ. У токсикологічному експерименті оцінювали комплекс гематологічних показників як найбільш патогномонічних проявів дії НБ (Василенко Н.М. Токсикология ароматических аминов и нитросоединений бензольного ряда - продуктов анилинокрасочной промышленности: Автореф. дисс. ... д-ра мед. наук. - К., 1980. - 45с.; Василенко Н.М. Нитро 48683 4 бензол. // МРПТХВ. Серия: Научные обзоры советской литературы по токсичности и опасности химических веществ. - М.: Центр международных проектов ГКНТ, 1984. - 21с.). Оцінювали: рівень загального (Hb заг.) і оксигенованого (НbO2) гемоглобіну, метгемоглобіну (MetHb) крові і сульфгемоглобіну (Sfflb) за допомогою ціанідного спектрофотометричного методу (Кушаковский М.С. Клинические формы повреждения гемоглобина: этиология, патогенез, спектрофотометрические и биохимические методы исследования, диагностика, лечение. - Л.: Медицина, 1968. - 38с.). Крім цього, оцінювали число еритроцитів, лейкоцитів, ретикулоцитів, тілець Гейнця, лейкоцитарну формулу (Трахтенберг И. М., Сова Р.Е., Шефтель В. О., Оникиенко Ф. А. Проблема нормы в токсикологии (современные представления и методические подходы, основные параметры и константы). - М.: Медицина, 1991. - 208с.), а також зміну часу згортання крові (Филатов А.Н., Котовщикова М.А. Свертывающая система крови в клинической практике. - Л.: Медицина, 1963. - 160с.). Для оцінки стану тіолдисульфідної системи як ведучої ланки з молекулярних механізмах антиоксидантного захисту організму визначали вміст сульфгідрильних груп у крові і сироватці методом амперометричного титрування (Соколовский В. В. Определение содержания сульфгидрильных групп в крови методом амперометрического титрования // Лабораторное дело. -1962.-№8.-С. 3-6.).Як інтегральний показник був обраний коефіцієнт маси внутрішніх органів (Зяббарова С. Н., Куклина М. А. Весовые коэффициенты как показатель воздействия факторов малой интенсивности // Санитарная охрана внешней среды: Тр. Ленингр. сан.-гиг. мед. ин-та. - Л., 1974. - С. 25-26.). Вірогідність результатів токсикологічних досліджень визначали за критерієм Стьюдента. Результати експерименту зведені в таблиці 1, 2, 3. 5 48683 6 Таблиця 1 Деякі гематологічні показники білих щурів при підгострій затравці нітробензолом при температурі t=+4°±2°С Контроль НБ та позити- Контроль (по- НБ та позитивні Контроль (пози- НБ та позитивні (позитивні вні низькі t зитивні низькі t) низькі t тивні низькі t) низькі t низькі t) Група № 1 Група № 2 Група № 1 Група № 2 Група № 1 Показники Група № 2 n x±Sx n x±Sx n x±Sx n x±Sx n х±Sx n x+Sx 5 затравок 15 затравок 30 затравок 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 Нb 129,83±8,7 79,83+5,32* загальний, 6 6 6 125,90+3,37 6 96,20 ±3,23*** 6 125,82±3,97 5 108,62±6,59 5 ** г/л 126,53±8,1 70,52+5,22* НbО2, г/л 6 6 6 124,78+3,41 6 89,38±3,61*** 6 123,11±4,16 5 101,96±6,34* 6 ** MetHb, % 6 2,04±0,29 6 6,38+0,86*** 6 1,49+0,18 6 4,40+0,20*** 6 1,82±0,20 5 4,49±0,40*** SfHb, % 6 0 6 2,80+0,24 6 0 6 2,59±0,48 6 0,25±0,09 5 2,07±0,18*** Еритроци6 4,60±0,16 6 3,19±0,18*** 6 4,91+0,25 6 3,89±0,31* 6 5,40±0,22 5 4,35±0,24** 12 ти, 10 /л Лейкоцити, 6 9,80±1,18 6 11,43±0,88 6 10,93±1,20 6 19,08±1,04*** 6 8,17±0,42 5 16,20±1,06*** 9 10 /л Ретикулоцити 6 28,8±0,11 6 48,7±0,30*** 6 28,83±1,85 6 46,67±2,50*** 6 28 50±2,05 5 79,20±4,07*** 0/00 Тільця Гей6 0 6 54,17±5,07 6 0 6 55,00±4,83 6 0 5 66,00±4,62 нця, % SH-групи крові 3213,33±151,3 2246,67±86,05* 2833,33±120,1 2360,00±146,9 6 6 6 6 6 5 мкмоль/100 2 ** 9 7* мл Примітка: * - розходження достовірні при р