Спосіб підвищення ефективності специфічної імунопрофілактики телят

Спосіб підвищення ефективності специфічної імунопрофілактики телят, який включає вакцина 3 0,01%- водного розчину в дозі 10 мл сухостійним коровам на 8-му місяці тільності три дні підряд і народженим від них телятам в дозі 5 мл у вищі 7, 14, 28, та 60 днів по три дні підряд. Спосіб забезпечує стимуляцію гуморального та клітинного імунітету, посилює здатність телят адаптуватися до умов зовнішнього середовища та напруженість їхньої резистентності до шлунковокишкових хвороб. Недоліком способу є недостатня його ефективність та неможливість компенсації нестачі селену в селeнодефіцитних районах, а також відсутність даних про хімічну формулу використаної у способі сполуки германію, та відсутність відомостей про вплив способу на ефективність вакцинації телят проти інфекційних захворювань, наприклад колібактеріозу. Відомий також «Спосіб профілактики імунодефіцитних станів та оксидаційних стресів молодняка великої рогатої худоби» /ПУ на корисну модель №40632/. Спосіб включає додаткове пероральне введення телятам препарату «Сен-Плекс» та підшкірне введення препарату «Максидин 0,4» в дозі 1мл, на 10кг маси тіла тварини 2 рази на добу протягом 3-4 днів в період переведення телят з молочного на рослинний тип годівлі. Спосіб забезпечує профілактику імунодефіцитних станів та оксидантних стресів у молодняка великої рогатої худоби шляхом корекції імунного статусу та процесів вільнорадикального окиснення ліпідів. Зазначений спосіб, як і попередні, не передбачає підвищення ефективності специфічної імунної профілактики. Найбільш близьким по суті до способу, що заявляється, є спосіб підвищення імунного статусу у телят при колібактеріозі (Hogan J.S., Weiss W.P., Smith K.J. Vitamin E as an adjuvant in an // J.Dairy. Sci. - 1993. - V.76. - P.401407). Спосіб включає використання вітаміну Е як імуномодулятора парентерально одночасно при введенні вакцини проти колібактеріозу телят. Спосіб забезпечує підвищення Т- і В-лейкоцитів периферичної крові та деяких показників природної резистентності, сприяє збереженості молодняка та підвищує продуктивність тварин. Заявлений спосіб і прототип мають суттєві спільні ознаки: включають вакцинацію з внутрішньом'язовим застосуванням імуномодулятора, що містить вітамін Е. Недоліком відомого способу є недостатня його ефективність. Заявлений нами спосіб усуває недоліки прототипу і забезпечує значне підвищення активності фагоцитів при одночасному збільшенні числа лейкоцитів, а також супроводжується більш інтенсивною продукцією специфічних антитіл, що обумовлює підвищення ефективності специфічної імунопрофілактики телят. В основу корисної моделі поставлена задача: розробити новий ефективний спосіб підвищення ефективності специфічної імунопрофілактики телят при вакцинації в період переведення з молочного на рослинний тип годівлі, зручний і економіч 51186 4 но вигідний для господарств, в яких він використовується. Технічний результат досягають тим, що телятам у віці 2 місяців на тлі вакцинації використовують імуномодулятор, що додатково вміщує левамізол при такому співвідношенні компонентів імуномодулятора: вітамін Е 2,0мл на 10кг живої маси левамізол 6,0мл на 10кг живої маси, при цьому компоненти імуномодулятора вводять внутрішньом'язово одночасно із вакциною. В заявленому способі для вакцинації використовували вакцину проти колібактеріозу телят, вакцину проти сальмонельозу телят в поєднанні з левамізолом та вітаміном Е. Технічний результат способу обумовлений використанням одночасно з вакцинацією імуномодуляторів вітаміну Е та левамізолу, а саме їх роллю в обмінні речовин і зокрема їх впливом на імунний статус телят. Так вітамін Е токоферол - має широкий спектр дії, впливає на процеси обміну білків, жирів і вуглеводів, покращує засвоєння каротиноїдів, вітамінів А, Д, К, є ефективним природним антиоксидантом, запобігає утворенню перекисів в організмі, що дозволяє уникнути ряду захворювань, пов'язаних з нагромадженням різних перекислих продуктів. При дефіциті вітаміну Е, знижується плодючість, наступає дистрофія, пошкоджується мускулатура, відбуваються зміни у судинній і нервовій системах (ексудативний діатез і енцефаломаляція), виникають захворювання печінки, порушується депонування і використання жирів. Левамізол гідрохлорид є прозорою, безколірною рідиною, має високу активність по відношенню до кишково-шлункових і легеневих нематод, діючи на гельмінтів на всіх стадіях їх розвитку. Препарат, посилюючи вироблення нейромедіатора гальмує гамма-аміномасляну кислоту, порушує передачу нервових імпульсів у паразитів, що призводить їх до паралічу і загибелі. Крім того виявляє Н-холіноміметичну дію. Стимулює імуногенез макроорганізму. Левамізол посилює імунну відповідь на вакцину переважно у тварин, в яких вона була пригнічена і не впливає на нормальну імунну відповідь. Препарат швидко всмоктується із кишечника, рівномірно розподіляється в тканинах та піддається біотрансформації в печінці. Кумулятивними властивостями левамізол не володіє. Левамізол за механізмом дії подібний до гормону тимусутимопоетину. Обидва препарати володіють властивостями стимуляції утворення різних популяцій Т-лімфоцитів (хелперів, супресорів, кілерів) із клітин попередників. Відома стимуляція левамізолом функції макрофагів, що відіграє важливу роль у його здатності гадвищувати імунологічні властивості організму. Одним із механізмів неспецифічної стимуляції макрофагів є їх заміна під впливом трансформації зовнішніх та внутрішніх клітинних мембран. Левамізол підвищує фагоцитарну активність мононуклеарних фагоцитів тварин. Встановлена також здатність левамізолу стимулювати неспецифічну резистентність макроорганізму, що про 5 являється підвищенням вмісту загального білка у сироватці крові. Таким чином, наведені відомості про роль складових імуномодулятора, використаного у заявленому способі, у обміні речовин тваринного організму в цілому і зокрема у стимулюванні системи захисту пояснюють технічний результат заявного способу. При проведенні патентно-інформаційного пошуку авторами і заявником виявлено технічне рішення (Hogan J.S., Weiss W.P., Smith K.J. Vitamin E as an adjuvant in an // J. Dairy. Sci. - 1993. - V.76. P.401-407), що містить найбільшу кількість суттєвих ознак, спільних із заявним. Спосіб включає вакцинацію з внутрішньом'язовим застосуванням імуномодулятора, що містить вітамін Е. Але наявність зазначених ознак, спільних з прототипом, недостатня для досягнення технічного результату, що забезпечує заявлений спосіб. Технічних рішень, які б за сукупністю ознак повністю співпадали із заявленим - не виявлено. Це дозволяє зробити висновок про відповідність заявленого рішення критерію винаходу (корисної моделі) «новизна». У патентній і науково-технічній інформації не знайдено рішень, в яких були б описані відомості про ознаки, що відрізняють заявлений спосіб від прототипу і забезпечують досягнення технічного результату: попередження імунодефіцитних станів та підвищення ефективності вакцинації, зниження рівня захворюваності молодняку великої рогатої худоби досягають тим, що телятам у віці 2 місяців на тлі вакцинації використовують імуномодулятор, що додатково вміщує левамізол при такому співвідношенні компонентів імуномодулятора; вітамін Е 2,0мл на 10кг живої маси левамізол 6,0мл на 10кг живої маси, при цьому компоненти імуномодулятора вводять внутрішньом'язово одночасно із вакциною. Отже, заявлене технічне рішення не випливає явним чином з рівня техніки, що дозволяє зробити висновок про відповідність його критерію винаходу (корисної моделі) - «винахідницький рівень». Заявлена корисна модель належить до галузі ветеринарної медицини, зокрема, ветеринарної імунології, а саме до способів підвищення імунного статусу телят при проведенні специфічної імунопрофілактики. Спосіб може бути застосований у тваринницьких господарствах з різними формами власності, діяльність яких спрямована на вирощування молодняка великої рогатої худоби з метою інтенсифікації галузі, а тому відповідає критерію винаходу (корисної моделі) - «промислова придатність». Таким чином, заявлене технічне рішення є новим, промислово придатним, має винахідницький рівень, тобто відповідає всім умовам патентоспроможності винаходу (корисної моделі) згідно статті 7 розділу II Закону України «Про охорону прав на винаходи і корисні моделі» №1771-ІІІ2000р.». Заявний спосіб здійснюють наступним чином. 51186 6 У господарстві, що утримує молодняк великої рогатої худоби і планує переводити телят віком 2 місяці з молочної дієти на рослинну з метою запобігання захворювання їх колібактеріозом (або сальмонельозом) проводять вакцинацію телят формолтіомерсаповою вакциною за прийнятою настановою та використанням імуномодулятора, що вміщує левамізол та вітамін Е, при такому співвідношенні компонентів імуномодулятора: вітамін Е 2,0мл на 10кг живої маси левамізол 6,0мл на 10кг живої маси, при цьому компоненти імуномодулятора вводять внутрішньом'язово одночасно із вакциною. Виходячи з відомої дози компонентів імуномодулятора та вакцини (2мл на голову та необхідної кількості поголів'я, що має бути вакциновано, приймають заходи щодо придбання необхідної кількості препаратів. Ефективність заявленого способу і його переваги перед прототипом підтверджені прикладом конкретного виконання корисної моделі. Дослідження проводили в ТзОВ «Правда» Бродівського району Львівської області. Для досліду було підібрано 15 телят віком 1,5-2 місяці, з яких за принципом аналогів сформовано 3 групи по 5 голів у кожній. І група контрольна, II і III - дослідні, з яких II «прототип», III - «новий спосіб». Тварини всіх 3-х груп у віці 2 місяців були вакциновані формолтіомерсаповою вакциною за прийнятою настановою внутрішньом'язово в дозі 2мл. Телятам II групи («прототип») на фоні вакцинації одночасно вводили вітамін Е внутрішньом'язово в дозі 2 мл на 10 кг живої маси. Телятам III групи («новий спосіб») на фоні вакцинації внутрішньом'язово вводили імуномодулятор, що містив у своєму складі вітамін Е 2мл на10кг живої маси та левамізол 6мл на 100кг живої маси. Матеріалом для досліджень слугувала кров телят. Кров для лабораторних досліджень (морфологічних, біохімічних, імунологічних) відбирали із яремної вени після фіксації вакцини, вітаміну Е та левамізолу через 7, 14, 21 доби після вакцинації тварин та в 3-х місячному віці У крові визначали: - кількість еритроцитів і лейкоцитів - шляхом підрахунку в камері Горяева; - лейкоцитарну формулу - мікроскопічним дослідженням мазків крові, що фіксували в метанолі та фарбували за Романовським-Гімза; - концентрацію гемоглобіну - за методом Салі; - гематокринну величину - мікрометодом Й.Й.Тодоровим; - вміст загального білка в сироватці крові - за біуретовим реактивом; - вміст креатиніну в сироватці крові. У зразках крові від вакцинованих телят II та II груп додатково визначали кількісний склад Т- і Всубпопуляцій лімфоцитів, Т-хелперних, Тсупресорних, Т-активованих лімфоцитів та фагоцитуючої популяції клітин. Одержані дані подано в таблиці. 7 51186 8 Таблиця Ефективність заявленого способу підвищення ефективності специфічної імунопрофілактики телят Показники І* 8,2±0,4 96,6d4,8 8,9±0,5 61,4±0,8* 14,4±0,4* 0 33,6±1,4 21,7±0,9 56,4±1,4 29,3±0,8 43,2±1,3 46,8± 1:40±1,3* 680,1±1,4 Еритроцити, Т/л Гемоглобін, г/л Лейкоцити, Г/л Загальний білок сироватки крові, г/л Імуноглобуліни молозива, % Імуноглобуліни G1 крові, % Імуноглобуліни G2 крові, % Т-лімфоцити крові, % Т-лімфоцити молозива, % В-лімфоцити крові, % В-лімфоцити молозива, % Т-гелпери крові, % Т-супресори крові, % Бактерицидність крові, % Фагоцитарна активність, % Титр нормальних антитіл Титр специфічних антитіл Середньодобові прирости, г Телята II** 7,3±0,2 91.Н4.6 8,1±0,3 55,7±0,7 55,2±0,7 0 5,9±0,2 31,2±1,3 19,2±0,8 42,6±1,2 37,4±1Д 40,2±1Д 1:20±1,1 591,1±11,9 III*** 7,3±0,2 91,ldt4,6 8,1±0,3 58,3±0,8 5,9±0,2 0 22,7±0,9 20,3±0,8 48,3±1,8 33,3±1,1 40,2±1,1 120±1Д 649,21±1,8 Примітка: *І група, **II група - прототип, ***ІІІ група - новий спосіб Аналіз таблиці показує, що факт достовірного зростання концентрації IgG1 у сироватці крові телят І групи після випоювання їм молозива більше, ніж у 2 рази порівняно з їх аналогами дослідних II і III груп. Імуноглобулінів підкласу G2 (Gig2) в сироватці крові телят усіх груп до 60-денного віку не виявили. Найбільш виражені зміни спостерігалися у телят III дослідної групи. Результати досліджень показали, що в крові телят І групи (контрольної) у відповідь на вакцинацію проти колібактеріозу, навіть при відсутності застосування імуномодулюючих засобів, кількість імунокомпетентних клітин і їх продуктів зростала порівняно з їх ровесниками II та III дослідних груп. Так, число Т-лімфоцитів у телят І групи було більшим, ніж у тварин II і III груп відповідно на 41,2% Комп’ютерна верстка Н. Лиcенко (Р