Фармацевтична композиція, що містить інсулін

1. Фармацевтична композиція уповільненого вивільнення для перорального використання, що містить інсулін на полісахаридному носії, яка відрізняється тим, що як носій вона містить хітозан, позитивно заряджений золь якого змішаний з не U 2 (19) 1 3 34458 рого або злегка опалесціювального розчину (RU 2316339, 10.02.2008). Проте одержаний препарат не має властивості регульованого вивільнення активної речовини. Для виготовлення лікарських форм уповільненого вивільнення найбільш перспективними є полімерні біоруйновані носії. Відомий, наприклад, біоруйнований триблоковий полімер з середньою молекулярною масою 2000-4990 Дальтон, що має властивості оборотного термічного желатинування, тобто існуючий у вигляді водного розчину при низьких температурах, та утворює гель при фізіологічно підхожих температурах. Полімер містить біоруйнований гідрофобний складний поліефір на основі різних мономерів і біоруйнований гідрофільний полімерний блок з поліетиленгліколю, в який можна ввести інсулін (RU 2232779, 20.07.2004). За прототип запропонованої корисної моделі прийнята фармацевтична композиція, що містить інсулін на полісахаридному носії, одержана способом, який включає змішування вихідних інгредієнтів, за які беруть суспензію хітозану у фосфатному буферному розчині з рН 7,3-7,4 або з рН=4 і натрієвий інсулін у фосфатному буферному розчині з рН 7,3-7,4 або з рН=4, розчини змішують в об’ємному співвідношенні 1:1 та вводять соляну кислоту до утворення розчинного комплексу інсуліну з хітозаном з рН 3,6-4,4. Запропонований засіб призначений для назального застосування, або як вакцина (US 5554388, 10.09.1996). Недоліком цієї фармацевтичної композиції є її недостатня стабільність. Композиція з такою великою відмінністю властивостей не може бути придатною для перорального використання. Препарати, що вводяться перорально, проходять через стравохід, шлунок і кишечник (органи, які мають різну кислотність середовища та різні ферменти), що ускладнює розробку ефективних засобів для перорального приймання. Інсулін при пероральному введенні розщеплюється на амінокислоти і малі пептиди, які швидко розкладаються в епітелії тонкої кишки амінопептидазою, що ослабляє дію препарату та знижує ефективність регульованого вивільнення. Задачею даної корисної моделі є розробка фармацевтичної композиції, що містить інсулін на полісахаридному носієві, для перорального введення, яка характеризується стабільністю властивостей та забезпечує уповільненого вивільнення інсуліну. Поставлена задача вирішується запропонованою фармацевтичною композицією, що являє собою інсуліно-хітозановий комплекс у вигляді твердих часток розміром 10-100мкм при вмісті інсуліну 190IU/ml, яка має ефект уповільненого вивільнення інсуліну і рекомендована для перорального використання. Фармацевтичну композицію одержують шляхом змішування вихідних інгредієнтів, за які беруть позитивно заряджений золь хітозану з рН, дорівнюючим 3,5-4,5, і негативно заряджений інсулін, що не містить цинку, у вигляді колоїдного розчину або у вигляді нанорозмірних кристалічних часток, доводять рН змішаного золю до 5,5-6,5, проводять 4 гелювання та зневоднення гелю з одержанням твердих часток розміром 10-100мкм. Переважно, гелювання здійснюють за присутності альгінату натрію у змішаному золі в кількості, що не перевищує 5% мас, з розрахунку на суху речовину. Передбачено, що змішування вихідних інгредієнтів здійснюють з розрахунку масового відношення інсуліну до хітозану у змішаному золі, дорівнюючого (0,2-0,8):1, при забезпеченні електронейтральності змішаного золю. Переважно, на змішування подають позитивно заряджений золь хітозану в ацетатному буферному розчині з розміром часток хітозану 200-400нм. Переважно, на змішування подають позитивно заряджений золь хітозану у вигляді його хлоргідрату, що має молекулярну масу 80-120kDа та ступінь деацетилювання 85-89%. На змішування подають інсулін у вигляді кристалічних часток з розміром 800-1200нм або колоїдний розчин інсуліну у фосфатному буфері з рН 8,0-9,0. У кращому варіанті на змішування подають хроматографічно очищений генно-інженерний інсулін, одержаний з використанням Штаму ESCHERICHIA COLIXLI-BLUE/PINSR як Продуцент ПРЕПРОІНСУЛІНУ. Заявлена фармацевтична композиція одержана способом, який забеспечує стійкість золю носіяхітозану, одержання стабільного змішаного нанозолю з високим ступенем однорідності та можливістю його гелювання до одержання стабільного, здатного до перетворення на наночастки, високо структурованого ксерогелю без втрати активності діючої речовини. З одержаних часток ксерогелю можна формувати лікарські форми за допомогою відомих методів, як у вигляді таблеток та пілюль, так і у ви гляді капсул. Нижче наведені конкретні приклади одержання заявленої фармацевтичної композиції. Приклад 1. Для одержання позитивно зарядженого золю хітозану використовують частки хлоргідрату хі тозану, деацетильованого до ступеня 87%, що мають молекулярну масу 100кДа, середній розмір часток 300нм, дзета-потенціал +50mV. Обрані частки хітозану інтенсивно перемішують з ацетатним буферним розчином з рН=4,0 приготовленим на бідистильованій воді, із забезпеченням мольного відношення іонів водню (Н+) до глюкозамінних ланок хітозану (GLCN), дорівнюючого (0,5-1):1. Кількість позитивно заряджених центрів на поверхні хітозану (густина позитивного заряду) залежить від ступеня протонування аміногруп хітозану. Дзета-потенціал часток золю склав +50mV. Na-інсулін одержаний з використанням Штаму ESCHERICHIA COLI XLI-BLUE/PINSR як Продуцента ПРЕПРОІНСУЛІНУ відповідно до патентів RU 2148642, 2000 та UA 24452, 2003. 50мл приготовленого позитивно зарядженого золю хітозану з концентрацією 10мг/мл змішують з 50мл колоїдного розчину Na-інсуліну, що має негативний заряд і суспендований у фосфатному буферному розчині з рН=9,0, при концентрації інсу 5 34458 ліну 5мг/мл, тобто при масовому відношенні інсулін: хітозан, дорівнюючому 0,5:1. Доводять рН змішаного золю до 6,0 і витримують протягом 10 хвилин до одержання стійкого електронейтрального гелю. Одержаний гель піддають зневодненню шляхом сушіння сублімації з одержанням ксерогелю із розміром часток від 10 до 50мкм. В результаті одержана фармацевтична композиція: інсуліно-хітозановий комплекс при вмісті інсуліну 190IU/ml, що має ефект уповільненого вивільнення і рекомендований для перорального використання. Приклад 2. Спосіб здійснений з використанням позитивно зарядженого золю ацетату хітозану із ступенем деацетилювання 85%, що має середній розмір часток 400нм, молекулярну масу 80kDa, які дисперговані в ацетатному буфері з рН 3,5. Негативно заряджені кристалічні частки людського біосинтетичного інсуліну з розміром 800-1200нм вводять у золь хітозану при інтенсивному перемішуванні та масовому відношенні інсуліну до хітозану, дорівнюючому 0,2:1, додають альгінат натрію у кількості 5% мас, додають луг до рН 5,5 і продовжують перемішування протягом 3 хвилин. Одержаний електронейтральний гель піддають розпилювальному сушінню і одержують тверді частки інсулінохітозанового комплексу з розміром 50-100мкм. Приклад 3. Комп’ютерна в ерстка Д. Шев ерун 6 Спосіб здійснений так само, як і у прикладі 1, з використанням позитивно зарядженого золю глутамату хітозану із ступенем деацетилювання 89%, що має середній розмір часток 200нм, молекулярну масу 120kDa, які дисперговані в ацетатному буфері з рН 4,5. Дзета-потенціал часток золю склав +35mV. На змішування із золем поданий колоїдний розчин свинячого інсуліну у фосфатному буфері з рН 9,0, при масовому відношенні інсулін: хітозан, дорівнюючому 0,8:1. Після встановлення рН змішаного золю 6,5 і витримки системи до одержання електронейтрального стійкого гелю продукт подрібнюють на кульовому млині і висушують. Одержано інсуліно-хітозановий комплекс при вмісті інсуліну 220IU/ml, з розміром часток 10100мкм, що має ефект уповільненого вивільнення. Одержана фармацевтична композиція перевірена на мишах. Моніторинг кінетики вивільнення інсуліну з одержаної фармацевтичної композиції проведений за допомогою високоефективної рідинної хроматографії з оберненою фазою та градієнтним елююванням. Дані щодо безперервного вивільнення інсуліну подані на фігурі 1 у вигляді графічної залежності кількості інсуліну від часу. Аналіз результатів показав високу ефективність інсулін-хітозанового комплексу, одержаного описаним способом. Одержана фармацевтична композиція уповільненого вивільнення для перорального введення показала добре регульоване вивільнення інсуліну протягом 7-8 діб. Підписне Тираж 28 прим. Міністерство осв іт и і науки України Держав ний департамент інтелектуальної в ласності, вул. Урицького, 45, м. Київ , МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислов ої в ласності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601