Спосіб викликання суперовуляції у корів-донорів при проведенні трансплантації ембріонів

1. Способ вызывания суперовуляции у коров-доноров при проведении трансплан тации эмбрионов с использованием фолликулостимулирующего гормона, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что в лютеиновую фазу поло вого цикла однократно внутримышечно вводят корове-донору комплексный гонадотропный препарат в дозе 40-50 мл, которую разделяют наполовину с последующим инъецированием в левую и правую ягодич ные мышцы или в ягодичную мышцу и мыш цу средней части шеи. 2. Способ по п. 1,о т л и ч а ю щ и й с я тем, что в качестве гонадотропного препарата используют тонкую эмульсию, в водной фазе которой содержится фолликулостимулирующий гормон, в масляной фазе эстрадиол дипропионат, тестостерон пропионат, витамины A, D3, E лецитин при следующих количествах компонентов на одну голову: Фолликулостимулирующий гормон, мг 40-45 эстрадиол дипро1,0-1,2 пионат, мг Тестостерон пропионат, мг Витамин 5 - Ю А, ИЕ -"- D3 , ИЕ -"- 150000-200000 200000-250000 Е, мг Винахід відноситься до тваринництва, зокрема до способів штучного викликання суперовуляції у корІв-донорІв при проведенні трансплантації ембріонів. користання комплексного гонадотропного препарату в якому нове поєднання компонентів у вигляді ліпосомальної емульсії дозволяє забезпечити стійкий пролонгуючий ефект дії і за рахунок цього досягається зниження суперовулюючої дози ФСГ на 5-10%, скорочення в 8-10 разів кількості Ін'єкцій І тривалості обробки, збільшення виходу повноцінних ембріонів на одного донора. В основу винаходу покладено завдання удосконалення способу викликання суперовуляції у корів-донорів при проведенні транс плантації ембріонів на ос нові ви 100-150 3. Способ по п. 2, отличаю щи йс я тем, что комплексный гонадотропный препарат готовят путем смешивания фолликулостимулирующего гормона с готовой эмульсией или при диспергации на частоте 35 кГц на протяжении 5-6 секунд или непосредственно перед введением встряхиванием флакона 30-40 секунд. С > О 6773 Поставлене завдання вирішується тим, що спосіб викликання суперовуляціі у корівдонорів при проведенні трансплантації ембріонів вміщує філокулостимулюючий гормон, згідно винаходу відрізняється тим, що в лютеїнову фазу статевого циклу одноразово внутрім'язево вводять корові-донору комплексний гонадотропний препарат в дозі 40-50 мл, яку розділяють на половину з подальшим ін'єктуванням в лівий І правий сідничний м'яз або в сідничний м'яз і м'яз середньої частини шиї Як основа гонадотропного препарату використовується тонка емульсія, водна фаза вміщує філокулостимулюючий гормон (ФСГ), а масляна-естрадіол дипропіонат, тестостерон пропіонат, вітаміни A, D3, E, лецитин при слідуючих кількостях компонентів на одну голову: Фолікулостимулюючий гормон, мг 40-45 Естрадіол дипро піонат, мг 1,0-1,2 Тестостерон про піонат, мг 5-10 Вітамін А, 10 150000-200000 Вітамін D3, 10 200000-250000 Вітамін Е, мг 100-150 Комплексний гонадотропний препарат готують шляхом змішування фолікулостимулюючого гормона з готовою емульсією або при диспергації на частоті 35 кГц на протязі 5-6 с або безпосередньо перед вве денням струшуванням флакона 30-40 с. Причинно-наслідковий зв'язок між сукупністю суттєвих ознак винаходу, який заявляється і досягненим технічним результатом є наступним: - без жиророзчинних вітамінів A, D3, E неможливий процес утворення ліпосомальної емульсії (жирова фаза), активації амінокислот і генерації енергії в клітині; - без естрадіолу та тестостерону немож ливий повноцінний проліферативний ефект в ендометрії; - без лецитину і твіну неможливе ут ворення ліпосом. Дані характеристики компонентів являються оптимальними для функціональної взаємодії, направленої на пролонгування дії препарату з покращенням способу викликання повноцінної суперовуляції. П р и к л а д 1. Препарат готують Із розрахунку на 5 корів-донорів. Дпя цього в склянку з поділками вносять 45-50 мл тривітаміну (A, D3, Е), 5-6 мл 0,1 %-ного масляного розчину естрадіола дипропіонату, 0,5-1 мл 5%-ного масляного розчину тестостерона пропіонату, 7-Ю мл 10%-ного ефірного розчину лецитина і 5-8 капель твіна. Дистильованою водою об'єм доводять до мітки 200-250 мл. Вмістиме склянки перемішують і диспергують на ультразвуковому диспергаторі УЗДН-1 при частоті 5 35 кГц на протязі 2-3 хв до зникнення плям жиру на поверхні і утворення тонкої емульсії білого кольору. ФСГ можна змішувати з готовою емульсією двома методами: 10 - 200-240 мг ФСГ розчиняють в 200-250 мл емульсії, після чого диспергують при частоті 35 кГц на протязі 5-6 с. Препарат зберігається в захищенному від світла місці, при температурі 0-4°С на 3 міс; 15 - 200-225 мг ФСГ безпосередньо перед введенням коровам-донорам розчиняють в 200-250 мл данної емульсії. Флакон щільно закривають і Інтенсивно збовтують на протязі 30-40 с, після чого препарат, розділений на 20 дози, зразу вводять коровам-донорам. П р и к л а д 2. Комплексний гонадотропний препарат одноразово вводять коровам внутрішньом'язево в період лютеїнової фази статевого циклу (8-13-й день) 25 в дозі 40-50 мл. Дозу препарату розділяють на половину з наступним ін'єктуванням в лівий І правий сідничний м ' я з або в сідничний м'яз і м'яз середньої частини чиї корови-донора. ЗО Через 54 г піс ля введення препарату вводять простагландін Фг альфа з розрахунку 500 мкг клопростенола. Охота наступає звичайно через 48 г після введення простагландіна Фг альфа. Запліднюють 35 корів підвійною дозою сперми на протязі всієї охоти (2-3 рази з інтервалом 12 г). Вимивання і пересадку ембріонів проводять на 7-8 день після закінчення охоти. У відомому способі використовується 40 класична 4-5 денна схема введення ФСГ: дворазове щоденне введення з інтервалом 12 г, а також препарат ГСЖК (фоллігон), вводимий одноразово. Ефективність різних методів гормональ45 ної обробки корів-донорів приведено в таблиці. З даних таблиці видно, що використання препарату більш ніж в 2 рази підвищує вихід придатних до пересадки ембріонів в 50 перерахунку на одного донора. В групі тварин, яким вводили комплексний гонадотропний препарат, цей показник складає 5,7 ембріона на одного донора, в цей час як в групах корів-донорів, яким вводили ФСГ І 55 ГСЖК по відомим схемам, показник виходу складав 2,7 ембріонів на одного донора. Запропонований спосіб викликання суперовуляції у корів-донорів, зокрема використання комплексного гонадотропного препарату, забезпечує зниже ння су 5 6773 леровулюючоїдозиФСГ на 5-10%, скорочення в 840 разів кількості ін'єкцій і тривалості обробки; збільшення більше ніж в 2 рази виходу ембріона на одного донора. Використання розробленого способу 5 викликання суперовуляції у корів-донорів при проведенні трансплантації ембріонів у великої рогатої худоби на пунктах ( центрах трансплантації буде сприяти зниженню затрат на підготовку тварин і якісному підвищенню ефективності викликання суперовуляції. Показатели, Обработка препаратом ГСЖК известным (фоллигон) предлагаемым ФСГ Использование коров-доноров, голов Реагировало суперовуляцией 59 17 10 44 75% 12 71% 10 100% Количество доноров, от которых получены эмбрионы 35 59% 7 41% 6 60% Извлечено эмбрионов всего 122 жизнеспособных 95 32 78% 50 19 60% 34 68% дегенерированных о 7% • 3 9,4% 2 4% неоплодотворенных яйцеклеток 18 15% 10 31% 14 28% Пригодных к пересадке эмбрионов в расчете на одного донора Пересажено эмбрионов Упорядник Замовлення 644 2,7 95 Техред М.Моргентал 2,7 5,7 19 34 Коректор М. Ткач Тираж Підписне Державне патентне відомство УкраТни, 254655, ГСП, Київ-53, Львівська пл., 8 Виробничо-видавничий комбінат "Патент", м. Ужгород, вул.Гагаріна, 101