Спосіб одержання специфічної сироватки крові для діагностики метапневмовірусної інфекції птиці

Реферат: Спосіб одержання специфічної гіперімунної сироватки проти метапневмовірусу птиці включає кількаразове внутрішньом'язове введення вірусного антигену тваринам-продуцентам з наступним відбором крові і отриманням сироватки. Крім того, як тварин-продуцентів використовують курчат-донорів (гомологічних тварин), імунізацію курчат починають з 30денного віку і проводять триразово з інтервалом 14 діб, при цьому для перших двох імунізацій використовують очищений, концентрований та інактивований метапневмовірусний антиген у 3 об'ємі 0,5 см , а для третьої імунізації антиген попередньо змішують з ад'ювантом "Монтанід" ISA-70 у співвідношенні 30:70, кров для отримання сироватки відбирають через 14 діб після останнього введення антигену UA 72060 U (12) UA 72060 U UA 72060 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Корисна модель належить до ветеринарної медицини і стосується, зокрема, способу одержання специфічних сироваток для ідентифікації метапневмовірусу птиці в серологічних реакціях. Сироватки будуть використовуватися для виготовлення діагностичних наборів з метою виявлення специфічних антитіл до метапневмовірусу птиці у сироватці крові курей, індиків, курчат-бройлерів в реакції непрямої гемаглютинації та методом ІФА (імуноферментний аналіз). Існує нагальна проблема у розробці високочутливих експрес-методів діагностики, що прискорить проведення наукових досліджень і дасть змогу проводити своєчасний контроль напруженості імунітету у птиці. Задача корисної моделі - одержання специфічних гіперімунних сироваток, отриманих до метапневмовірусу, що будуть входити до складу наборів, призначених для діагностики метапневмовірусної інфекції птиці. Існують способи отримання типоспецифічних сироваток, наприклад, до збудників синдрому зниження несучості [1]. Цей спосіб включає багаторазове введення кролям (тваринампродуцентам) вірусного антигену з інактивованої вакцини проти СЗН-76 внутрішньовенно та 3 підшкірно по 1см із додаванням 5-7 % пенетранту димексиду (диметилсульфоксиду). Є ще подібний патент [2] - Спосіб одержання специфічної гіперімунної сироватки проти Mycoplasma gallisepticum-інфекції птиці. Суть цього способу полягає у введенні тваринам3 продуцентам антигену із додаванням 5 % димексиду внутрішньовенно в об'ємі 1 см , після чого відбирають кров при повному знекровленні тварин на 5 добу після останньої ін'єкції. В обох способах використовувались гетерологічні тварини-донори (вівці, кролі, кози), вони є більш громіздкими та складними у виконанні у порівнянні із запропонованим нами, а отже більш вартісними. В основу корисної моделі поставлено задачу: розробити спосіб одержання специфічних сироваток крові для діагностики метапневмовірусної інфекції птиці з метою виготовлення компонентів набору для РНГА та ІФА. Спосіб виконується таким чином. Для отримання специфічних гіперімунних (позитивних) сироваток крові курей до метапневмовірусу використовували курчат 30-добового віку, вільних від антитіл до збудників ньюкаслської хвороби, інфекційної бурсальної хвороби, інфекційного бронхіту курей та метапневмовірусної інфекції. Очищений, концентрований та інактивований метапневмовірусний антиген (вихідний 3 інфекційний титр вірусу до очищення складав 3 lg ТЦЦ so/си ) триразово вводили курчатам 3 внутрішньом'язово у об'ємі 0,5 см за такою схемою: перша імунізація - у віці 30 діб; друга імунізація - через 14 діб після першої імунізації; третя імунізація - очищений, концентрований та інактивований антиген метапневмовірусу попередньо змішували з ад'ювантом "Монтанід" ISA-70 у співвідношенні 30:70 і вводили через 14 діб після другої імунізації. Через 2 тижні після останньої імунізації курчата були тотально знекровлені і отримана сироватка крові. Приклад 1. При дослідженні сироватки крові гіперімунізованих курчат-донорів встановлено, що титр специфічних антитіл, в середньому, складав 1: 8253 в ІФА. Отже, у запропонованому способі одержання специфічних сироваток для ідентифікації метапневмовірусу птиці в серологічних реакціях використовуються тільки гомологічні тваринидонори - курчата, відмінні строки імунізації, їх кратність та дози введення антигену. Одержані за таким способом сироватки крові є специфічними і ефективними при виготовленні набору компонентів для РНГА та ІФА з метою діагностики метапневмовірусної інфекції птиці. Джерела інформації: 1. Патент на корисну модель № 10359 Спосіб одержання специфічної сироватки для ідентифікації в серологічних реакціях вірусу синдрому зниження несучості (СЗН -76), А 61К 39/00; опубл. 15.11.05, бюл. № 11.-4с. 2. Патент на корисну модель № 28537 Спосіб одержання специфічної гіперімунної сироватки проти Mycoplasma gallisepticum-інфекції птиці, А 61К 39/00; опубл. 15.11.2006, бюл. № 11.-4с. 1 UA 72060 U ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 5 10 Спосіб одержання специфічної гіперімунної сироватки проти метапневмовірусу птиці, що включає кількаразове внутрішньом'язове введення вірусного антигену тваринам-продуцентам з наступним відбором крові і отриманням сироватки, який відрізняється тим, що як тваринпродуцентів використовують курчат-донорів (гомологічних тварин), імунізацію курчат починають з 30-денного віку і проводять триразово з інтервалом 14 діб, при цьому для перших двох імунізацій використовують очищений, концентрований та інактивований метапневмовірусний 3 антиген у об'ємі 0,5 см , а для третьої імунізації антиген попередньо змішують з ад'ювантом "Монтанід" ISA-70 у співвідношенні 30:70, кров для отримання сироватки відбирають через 14 діб після останнього введення антигену Комп’ютерна верстка А. Крижанівський Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 2