Спосіб моделювання фізичної опіоїдної залежності у щурів, які перебувають під впливом етанолу

Реферат: Спосіб моделювання фізичної опіоїдної залежності у щурів, які перебувають під впливом етанолу, що включає введення опіоїдного наркотичного препарату, причому експериментальним тваринам (щурам) вводять опіоїдний анальгетик "Налбуфін" внутрішньоочеревинно щоденно 1 раз на добу в однаковий проміжок часу протягом 42 діб (6 тижнів) з поступовим визначеним підвищенням доз опіоїду кожних 7 діб на фоні внутрішньошлункового введення сталої дози 20 % розчину етанолу. UA 76566 U (12) UA 76566 U UA 76566 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 Корисна модель стосується медицини, зокрема наркології, і може бути використана для відтворення експериментальної моделі фізичної опіоїдної залежності у щурів, які перебувають під впливом етанолу, на підставі якої можна проводити експериментальні морфологічні дослідження поєднаного впливу етанолу та опіоїдного анальгетика та проводити відповідні медикаментозні корекції. Відомий спосіб моделювання комбінованої опіоїдно-алкогольної інтоксикації, яку моделювали на щурах, котрим внутрішньоочеревинно вводили 1 % розчин морфіну гідрохлориду, чимраз збільшуючи дозу препарату (від 5 мг/кг до 45 мг/кг) та 40 % розчин етанолу 7 г/кг протягом одного місяця [Біловицький О. В. Субмікроскопічна морфологія головного мозку при алкогольно-морфінній інтоксикації в експерименті // Таврический медикобиологический вестник.-2010. - Том 13.- № 1 (49). - С. 13-16]. Запропонований спосіб дозволяє моделювати тільки інтоксикаційну модель етанольно-опіоїдного впливу, що не дає можливості дослідити плавність наростання морфологічних змін у тканинах експериментальної тварини в динаміці. Окрім цього, для досягнення поставленої мети використовують опіоїдний наркотичний препарат у вигляді чистого розчину, що значно обмежує можливості експериментального моделювання. В основу корисної моделі поставлено задачу створити спосіб моделювання фізичної опіоїдної залежності у щурів, які перебувають під впливом етанолу, шляхом поступового підвищення доз доступного опіоїдного наркотичного анальгетика з метою, в подальшому, вивчення поєднаного впливу етанолу та опіоїду на організм експериментальних тварин. Поставлена задача вирішується тим, що у способі моделювання фізичної опіоїдної залежності у щурів, які перебувають під впливом етанолу, що включає введення опіоїдного наркотичного препарату, згідно з корисною моделлю, експериментальним тваринам (щурам) вводять опіоїдний анальгетик "Налбуфін" внутрішньоочеревинно щоденно 1 раз на добу в однаковий проміжок часу протягом 42 діб (6 тижнів) з поступовим визначеним підвищенням доз опіоїду кожних 7 діб на фоні внутрішньошлункового введення сталої дози 20 % розчину етанолу. У запропонованому способі поступовим підвищенням доз (кожних 7 діб) опіоїдного анальгетика досягається плавне тренування опіоїдних рецепторів експериментальної тварини на фоні введення нетоксичної сталої дози 20 % розчину етанолу. Препарат "Налбуфін" - це препарат опіоїдної групи, де діючою речовиною є похідний морфіну - морфінан (виробник Русан Фарма Лтд., Індія). Спосіб моделювання фізичної опіоїдної залежності у щурів, які перебувають під впливом етанолу, здійснюють таким чином. Експериментальним тваринам (щурам) вводять опіоїдний наркотичний анальгетик "Налбуфін", а також - 20 % розчин етанолу. Налбуфін вводять внутрішньоочеревинно, а розчин етанолу - внутрішньошлунково, щоденно 1 раз на добу в однаковий проміжок часу протягом 42 діб (6 тижнів), поступово підвищуючи визначену дозу опіоїду кожних 7 діб і вводячи при цьому стабільну дозу етанолу. У ході постановки експериментальної моделі фізичної опіоїдної залежності використовували білих щурів (самці) лінії "Wistar" в кількості 30 тварин, з початковою масою 77 г, віком 1,5-2,0 місяці. Ін'єкції препарату "Налбуфін" проводили внутрішньоочеревинно щоденно 1 раз на добу в однаковий проміжок часу (10-11 година ранку протягом 42 діб), а 20 % розчин етанолу внутрішньошлунково щоденно 1 раз на добу в однаковий проміжок часу (13-14 година протягом 42 діб). Кожний тиждень дозу препарату "Налбуфін" для ін'єкції збільшували у послідовності, що наведена у таблиці. Таблиця Дози введення препарату "Налбуфін" експериментальним тваринам Показники Середня вага щурів, г Доза "Налбуфіну", мг/кг Доза 20 % розчину етанолу, мл/кг І тиждень II тиждень III тиждень IV тиждень V тиждень VI тиждень 77 82 93 105 111 125 8 15 20 25 30 35 3,6 3,6 3,6 3,6 3,6 3,6 1 UA 76566 U 5 10 15 20 Дозу препарату для проведення ін'єкцій визначали, виходячи з того, що LD 0 для препарату "Налбуфін" становить 700 мг/кг, і що дослідження є довготривалим та відноситься до субхронічних. Визначили діапазон терапевтичних доз, які у цьому випадку становили відповідно: ЕД5=700/16 × 0,05=2,19 мг/кг і ЕД90=700/16 × 0,90=39,38 мг/кг. Тому була вибрана наступна послідовність підвищення доз: І тиждень - 8 мг/кг, II тиждень - 15 мг/кг, III тиждень - 20 мг/кг, IV тиждень - 25 мг/кг, V тиждень - 30 мг/кг, VI тиждень - 35 мг/кг. Зважування тварин виконували 1 раз на тиждень перед черговим підвищенням дози. Для внутрішньошлункових введень використовували 20 % розчин етанолу, розчинником виступав 5 % розчин глюкози. Дозу для введення вираховували, виходячи з того, що LD 0 для 96° етанолу становить 12,24 г/кг, і що дослідження є довготривалим та відноситься до субхронічних, максимальна нетоксична доза склала 0,64 г/кг, або 0,75 мл/кг. В результаті перерахунку на 20 % розчин етанолу LD0 становив 3,6 мл/кг маси тіла експериментальної тварини. Наступної доби після проведення останньої ін'єкції препарату "Налбуфін" експериментальним тваринам було введено агоніст-антагоніст опіоїдних рецепторів "Налоксон" в дозі 1 мг/кг з метою отримання поведінкових реакцій, які свідчили про фізичну опіоїдну залежність. Як результат введення спостерігали симптоми відміни, які полягали у наступному: пілоерекція, скреготіння зубів, струшування передніми лапами, діарея, "струшування мокрої собаки". За допомогою запропонованого способу змодельовано фізичну опіоїдну залежність на фоні введення етанолу - сформовано стан, що проявлявся змінами поведінкових реакцій тварин в результаті відміни опіоїдного анальгетика "Налбуфін" після довготривалого введення. ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 25 30 Спосіб моделювання фізичної опіоїдної залежності у щурів, які перебувають під впливом етанолу, що включає введення опіоїдного наркотичного препарату, який відрізняється тим, що експериментальним тваринам (щурам) вводять опіоїдний анальгетик "Налбуфін" внутрішньоочеревинно щоденно 1 раз на добу в однаковий проміжок часу протягом 42 діб (6 тижнів) з поступовим визначеним підвищенням доз опіоїду кожних 7 діб на фоні внутрішньошлункового введення сталої дози 20 % розчину етанолу. Комп’ютерна верстка Л. Купенко Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 2