Спосіб прогнозування плацентарної дисфункції залежно від рівня апоптозу у вагітних з урогенітальними інфекціями

Реферат: Винахід належить до способу прогнозування плацентарної дисфункції залежно від рівня апоптозу у вагітних з урогенітальними інфекціями за допомогою реалізації Fas-залежного сигнального шляху в сироватці периферичної крові вагітної визначають рівень індукторів апоптозу - sFasL та ФНП-α-методом імуноферментного аналізу та при значеннях рівня sFasL більше 1,00 нг/мл, а рівня ФНЛ-α в 2 рази вище аналогічного показника встановленого контролю прогнозують плацентарну дисфункцію. UA 113606 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Винахід належить до медицини, а саме до акушерства, та може бути використаним для прогнозування плацентарної дисфункції залежно від рівня апоптозу у вагітних з урогенітальними інфекціями. Відомо, що формування і нормальне функціонування фетоплацентарного комплексу залежить від впливу апоптогенних факторів, в тому числі апоптозу. Програмована клітинна загибель або апоптоз - це універсальний механізм для всіх типів тканин, який забезпечує елімінацію пошкоджених, неповноцінних або інфікованих клітин і клітин, які досягли стадії термінальної диференціації. Процес програмованої загибелі клітини відіграє значиму роль у нормальному морфогенезі та органогенезі в ембріональному і фетальному періодах розвитку і забезпечує підтримку клітинного гомеостазу в онтогенезі в цілому. Встановлено, що для плаценти в нормі характерна наявність певного рівня апоптозу, що реалізується, в основному, через Fas-залежний і мітохондріальний сигнальні шляхи. Обидва ці способи реалізації програмованої клітинної загибелі мають загальну ефекторну ланку, якою є каспаза-3. Для клітин плаценти саме каспаза-3 є об'єктивним та інформативним маркером апоптозу. Для діагностування плацентарної дисфункції залежно від рівня апоптозу рівень каспази-3 оцінюють в біоптаті плаценти після пологів [Placrntal apoptosis in preeclampsia, intrauterine growth retardation, and HELLP syndrome: an immunohistochemical study with caspase-3 and bcl-2 / U. Cali, S. Cavcaytar, L. Sirvan, N. Danisman // Clin Exp Obstet Gynecol. - 2013. - Vol. 40 (1). - P. 45-48; Trypanosoma cruzi induces apoptosis in ex vivo infected human chorionic villi / J. Duaso, G. Rojo, F. Jana et al. // Placenta. - 2011. - Vol. 32 (5). - P. 356-361]. Даний спосіб діагностики плацентарної дисфункції залежно від рівня апоптозу у вагітних є найбільш близьким до того, що заявляється, за технічною суттю та результатом, який може бути досягнутим, тому його вибрано за прототип. Основним недоліком способу-прототипу є неможливість діагностування плацентарної дисфункції залежно від рівня апоптозу у вагітних до пологів, що значно знижує діагностичну цінність відомого способу, крім того спосіб-прототип унеможливлює прогнозування плацентарної дисфункції залежно від рівня апоптозу у вагітних. В доступній нам інформації ми не знайшли способу прогнозування плацентарної дисфункції залежно від рівня апоптозу у вагітних з урогенітальними інфекціями до пологів. У зв'язку з вищевикладеним, в основу винаходу поставлено задачу розробити спосіб прогнозування плацентарної дисфункції залежно від рівня апоптозу у вагітних з урогенітальними інфекціями шляхом визначення предмоторних можливостей маркерів апоптозу в реалізації плацентарної дисфункції у вагітних з урогенітальними інфекціями, який би оцінював стан фетоплацентарного комплексу з високою точністю та давав би змогу реалізувати попереджувальні заходи в корекції дисфункції плаценти. Задачу, яку поставлено в основу винаходу, вирішують тим, що у відомому способі діагностики плацентарної дисфункції залежно від рівня апоптозу у вагітних, який включає визначення маркерів апоптозу, згідно з винаходом, для прогнозування плацентарної дисфункції залежно від рівня апоптозу у вагітних з урогенітальними інфекціями за допомогою реалізації Fas-залежного сигнального шляху в сироватці периферичної крові вагітної визначають рівень індукторів апоптозу - sFasL та ФНП-α - методом імуноферментного аналізу та при значеннях рівня sFasL більше 1,00 нг/мл, а рівня ФНП-α в 2 рази вище аналогічного показника встановленого контролю прогнозують плацентарну дисфункцію та починають реалізацію попереджувальних заходів в корекції дисфункції плаценти. Технічний ефект винаходу, а саме розробка способу прогнозування плацентарної дисфункції залежно від рівня апоптозу у вагітних з урогенітальними інфекціями, шляхом визначення предмоторних можливостей маркерів апоптозу в реалізації плацентарної дисфункції у вагітних з урогенітальними інфекціями, який би оцінював стан фетоплацентарного комплексу з високою точністю та давав би змогу реалізувати попереджувальні заходи в корекції дисфункції плаценти, обумовлений синергізмом засобів і заходів та їх кількісних значень, які заявляються. Спосіб виконують наступним чином: Визначають рівень індукторів апоптозу - sFasL та ФНПα - методом імуноферментного аналізу. При значеннях рівня sFasL більше 1,00 нг/мл, а рівня ФНП-α в 2 рази вище аналогічного показника встановленого контролю прогнозують плацентарну дисфункцію. Теоретичною передумовою способу, який заявляється, послугував той факт, що виявлене в сироватці крові вагітних підвищення рівня молекулярних посередників програмованої клітинної загибелі відображає активне включення лімфоцитів у відповідь на дію інфекцій. Дані зміни в організмі вагітних ведуть до каскаду реакцій на клітинно-молекулярному рівні як в імунній системі, так і тканинах-мішенях (зокрема, плаценті), які можуть, в кінцевому підсумку, привести 1 UA 113606 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 до розвитку плацентарної недостатності [Lipatov I.S. Prognosis and diagnosis of placental insufficiency on the basis of endothelial dysfunction, decidualization, apoptosis and cellular proliferation /I.S. Lipatov, Yu.V. Tezikov // Saratov Scientific Medical Journal. - 2011. - Vol. 7(1). - P. 52-59]. Ефективність способу, який заявляється, доведена клінічними дослідженнями. Для вирішення поставленої задачі у обстежених вагітних в сироватці периферичної крові визначали вміст індукторів апоптозу - sFasL і ФНП-α; після розродження оцінювали рівень каспази-3 в біоптаті плаценти. Обстежені пацієнтки були розділені на 4 групи в залежності від наявності та характеру виявленої інфекції. У контрольну групу увійшли 50 пацієнток з нормальним перебігом вагітності, у яких не виявлено ознак інфекції (група 0). У І групу (50 вагітних) включені пацієнтки з бактеріальної інфекцією (хламідії, уреаплазма, мікоплазма), в II групу - 50 вагітних з вірусною інфекцією (ЦМВ і вірус простого герпесу), в III-150 пацієнток зі змішаною вірусно-бактеріальною інфекцією, яка виявлена в II і III триместрах вагітності. Групи пацієнток з урогенітальними інфекціями в даному дослідженні вважалися основними. Кількісне визначення рівня sFasL, ФНП-α та каспази-3 виконували методом імуноферментного аналізу згідно з інструкціями фірм-виробників, використовуючи діагностичні набори для sFasL і каспази-3 фірми "eBioscience" (США), для ФНП-α - фірми "вектор Бест »(Росія). Ехографічну оцінку стану плаценти проводили з використанням ультразвукового сканера MINDRAY DC-8 (Китай). Статистичну обробку даних здійснювали за допомогою пакета програм обробки даних загального призначення Statistica for Windows версії 6.1. Для уявлення рядів даних використовували медіану і середнє значення як заходи положення; стандартне відхилення і квартилі як заходи розсіювання; мінімальне і максимальне значення для уявлення про загальну мінливість показників. Для визначення відмінностей між групами використовували непараметричний критерій Манна-Уїтні. На момент виявлення інфекцій встановлено статистично значуще збільшення рівня всіх вивчених апоптотичних показників у всіх досліджуваних групах з інфекціями в порівнянні з відповідними значеннями в контрольній групі (р