Спосіб прогнозування плацентарної дисфункції у вагітних із ожирінням з урахуванням поліморфізму генів

Реферат: UA 79129 U UA 79129 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Корисна модель належить до галузі медицини, а саме до акушерства, і може бути використана для прогнозування плацентарної дисфункції у вагітних із ожирінням. Незважаючи на значну кількість наукових робіт, спрямованих на вивчення плацентарної дисфункції, встановлення нових діагностичних та прогностичних критеріїв, а також розробку більш досконалих методик медикаментозної корекції, ця проблема й досі залишається однією з найбільш складних і актуальних питань акушерської науки. У структурі перинатальної захворюваності та смертності суттєву роль займають наслідки плацентарної дисфункції. Особливу категорію складають жінки із ожирінням. На сьогоднішній день у світі 30 % жінок мають зайву вагу, а 27 % - ожиріння (INSERM Study). Загалом на планеті понад 1,5 млрд. людей страждають на надмірну вагу чи ожиріння, що свідчить про її глобальні масштаби. Експерти ВООЗ прогнозують збільшення цієї цифри упродовж найближчих 10 років на 40 %. У структурі жінок фертильного віку ожиріння займає приблизно 30-41 % [3] і супроводжується у 2-3 рази частішим розвитком гестозів, невиношуванням, аномаліями пологової і післяпологової діяльності, акушерським травматизмом та перинатальною патологією. Останнім часом спостерігають загальну тенденцію до збільшення подібних станів, що також детермінується як структурно-функціональними, так і гемореологічними змінами у фетоплацентарній системі у т.ч. зумовлених генетично. Визначення генетичних детермінант розвитку плацентарної дисфункції у вагітних із ожирінням відкриває нові можливості профілактування гестаційних ускладнень. Найбільш близьким до запропонованого технічного рішення є: "Спосіб прогнозування плацентарної дисфункції у жінок з пієлонефритом", патент на винахід, № 66408, Запорожан В. М. (UA), Голубенко М. Ю. (UA), патент опубліковано 26.12.2011, бюл. № 24. Спосіб прогнозування плацентарної дисфункції у жінок з пієлонефритом, що включає генетичне дослідження сироватки крові майбутньої матері, який відрізняється тим, що додатково проводять генетичне дослідження сироватки крові майбутньої матері методом полімеразної ланцюгової реакції на наявність нормальної гомозиготної форми гена ферменту конституційної ендотеліальної NO-синтази 3 - типу в інтроні 4 (eNOS4в/в), його поліморфної гетерозиготної форми (eNOS4в/a) і мутантного варіанта поліморфізму у гомозиготній формі (eNOS4a/a) та їх впливу на активність ферменту і при наявності мутагенних форм гена ендотеліальної NO-синтази 3 - типу в інтроні 4а/а прогнозують ймовірність виникнення плацентарної дисфункції у жінок з пієлонефритом. Однак, для прогнозування плацентарної дисфункції у вагітних із ожирінням генетичне дослідження сироватки крові майбутньої матері на наявність поліморфізмів генів невідоме. В основу корисної моделі поставлена задача вдосконалення способу прогнозування плацентарної дисфункції у вагітних із ожирінням, що включає генетичне дослідження сироватки крові майбутньої матері методом полімеразної ланцюгової реакції (ПЛР) на наявність I/D поліморфізму гена АСЕ та 4G5G поліморфізму гена РАІ-1, причому носіїв несприятливих Dалеля та 4С-алеля відносять до груп із високою прогностичною цінністю позитивного результату розвитку плацентарної дисфункції у вагітних із ожирінням. Поставлена задача вирішується тим, що, згідно з корисною моделлю, проводять генетичне дослідження сироватки крові майбутньої матері методом ПЛР на наявність алельної належності I/D поліморфізму гена АСЕ і 4G5G поліморфізму гена РАІ-1 та прогнозують ймовірність виникнення плацентарної дисфункції у жінок із ожирінням з урахуванням індивідуального гаплотипу, що дозволить вчасно проводити профілактику. Ознаки корисної моделі: 1. Спосіб може бути використаний в практиці перинатологами, акушерами-гінекологами, сімейними лікарями, терапевтами, генетиками. 2. Вперше застосовується для прогнозування плацентарної дисфункції у вагітних із ожирінням. 3. Спосіб істотно відрізняється від подібних відомих (прототипів) перевагами, що роблять доцільним його використання. 4. Індивідуальний характер прогнозування. 5. Покращує ефективність прогнозування плацентарної дисфункції у вагітних з ожирінням. Спільні ознаки прототипу та корисної моделі. Для прогнозування використовується новітні досягнення предиктивної медицини - визначення генного поліморфізму генів-кандидатів розвитку плацентарної дисфункції. Відмінність корисної моделі від прототипу. Проводять генетичне дослідження сироватки крові майбутньої матері методом ПЛР на наявність алельної належності I/D поліморфізму гена АСЕ і 4G5G поліморфізму гена РАІ-1 та прогнозують ймовірність виникнення плацентарної дисфункції у жінок із ожирінням з урахуванням індивідуального гаплотипу, що дозволить вчасно проводити профілактику. 1 UA 79129 U Таблиця «Порівняння корисної моделі та прототипу» Гени-кандидати Спосіб прогнозування Спосіб прогнозування плацентарної дисфункції плацентарної дисфункції у вагітних з у вагітних з ожирінням пієлонефритом Ген ангіотензинперетворювального ферменту Ген інгібітору активатора плазміногену І типу Ген ендотеліальної NO-синтази 5 10 15 20 25 30 35 40 45 + + + Визначення термінів, які використовуються при описі корисної моделі. Ожиріння - надлишкове відкладення жиру, збільшення маси тіла за рахунок жирової тканини. Плацентарна дисфункція (раніше плацентарна недостатність) - клінічний синдром, зумовлений морфофункціональними змінами в плаценті і порушенням її компенсаторнопристосувальних можливостей. У зв'язку з цим спостерігається комплекс порушень транспортної, трофічної, ендокринної та метаболічної функції плаценти, що лежать в основі патології плода та новонародженого. Ступінь і характер ушкоджуючої дії на плід визначається багатьма аспектами: терміном вагітності, тривалістю впливу несприятливого фактора, станом компенсаторно-пристосувальних механізмів у системі "мати-плацента-плід". Генетичний поліморфізм довготривале існування в популяції двох і більше генотипів, частоти яких достовірно перевищують ймовірність виникнення відповідних повторних мутацій. Генотип генетична конституція, сукупність генів даного організму, отримана від батьків. Кожен вид мікроорганізмів, рослин і тварин має характерний для нього генотип. Гаплотип - сукупність алелів на локусах однієї хромосоми, зазвичай наслідуваних разом. Алель - один з можливих форм одного і того ж гена. Алелі розташовані в однакових ділянках (локусах) гомологічних (парних) хромосом; визначають варіанти розвитку однієї і тієї ж ознаки. Серед найважливіших причинних чинників різних гестаційних ускладнень суттєву роль приділяють ремоделюванню спіральних артерій в ранні терміни вагітності. Фізіологічне ремоделювання спіральних артерій під час вагітності регулюється РААС. Відповідно АПФ, як ключовий компонент РААС, через AT II впливає на гемостаз через фібриноліз, агрегацію тромбоцитів та згортання крові, а також підвищує сприйнятливість судин до запалення, гіперплазії і, через деградацію брадикініну, зменшує вміст монооксиду нітрогену, сприяючи розвитку ендотеліальної дисфункції вазоконстрикції. Тому гени, що кодують тонус судин і гемореологію відіграють життєво важливе значення. Зокрема, встановлено, що DD-генотип гена АПФ є тромбофілічним чинником і асоціює з негативними "подіями" під час вагітності (прееклампсією, втратою вагітності, порушенням внутрішньоутробного росту плода, передчасними пологами, тощо). Виявлення алельних варіантів генів, що сприяють розвитку ендотеліальної дисфункції, є ланцюгами патогенетичного кола плацентарної дисфункції і може сприяти визначенню групи ризику та бути критеріями профілактики ПД у жінок із ожирінням. Для прогнозування планетарної дисфункції у жінок із ожирінням виділяють геномну ДНК, проводять ПЦР - дослідження сироватки крові в ранні терміни вагітності для визначення алелей поліморфних ділянок I/D Alu-повтору у 16-му інтроні гена АСЕ (rs4340) та з'ясування однонуклеотидного поліморфізму у промоторному регіоні гена РАІ-1 q21.3-q22 у позиції -675bр. Ампліфікацію поліморфних ділянок за допомогою полімеразної ланцюгової реакції (ПЛР) проводять на ампліфікаторі "Amply-4L" (Росія). Фрагменти ампліфікованої ДНК розділяють методом гель-електрофорезу, забарвлюють етидієм броміду, візуалізують за допомогою транслюмінатора у присутності маркера молекулярних мас (100-1000 bр). Генетично зумовлена схильність до порушень фетоплацентарного кровообігу у вагітних із ожирінням характеризується зростанням ризику даної патології за наявності мутації гена АСЕ (гомозиготної присутності D-алеля у гаплотипі) у 3,35-3,65 рази. Комбінація мутацій обох генів (DD/4G4G, DD/4G5G гаплотипи) збільшує ймовірність ускладнень у вагітних у 7,88 рази. Запропонований спосіб було апробовано на 72 пацієнтках із ожирінням в ранніх термінах вагітності (до 10 тиж.). В порівнянні з прототипом, запропоноване технічне рішення за рахунок визначення алельної належності за геном АСЕ (I/D) та геном РАІ-1 (4G5G) дозволяє з високим 2 UA 79129 U ступенем вірогідності прогнозувати розвиток плацентарної дисфункції у вагітних із ожирінням та вчасно проводити профілактику. ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 5 Спосіб прогнозування плацентарної дисфункції у вагітних із ожирінням з урахуванням поліморфізму генів, що включає генетичне дослідження сироватки крові методом полімеразної ланцюгової реакції, який відрізняється тим, що визначають алельну належність I/D поліморфізму гена АСЕ та 4G5G поліморфізму гена РАI-1. 10 Комп’ютерна верстка Л.Литвиненко Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 3