Спосіб кількісного визначення ципрофлоксацину

Спосіб кількісного визначення ципрофлоксацину, включаючий приготування проби для аналізу, взаємодію її з хімічним реагентом у розчині; вимірювання інтенсивності люмінесценції розчину, який відрізняється тим, що пробу піддають взаємодії із стандартним розчином хлориду тербію при рН 6,5-7,0 у присутності додецил-сульфату натрію, триоктилфосфіноксиду і вимірюють інтенсивність люмінесценції тербію, по величині якої визначають концентрацію ципрофлоксацину. (19) (21) 99031326 (22) 11.03.1999 (24) 15.02.2001 (33) UA (46) 15.02.2001, Бюл. № 1, 2001 р. (72) Єгорова Алла Володимирівна, Бельтюкова Світлана Вадимівна, Теслюк Ольга Іванівна (73) Фізико-хімічний інститут ім.О.В. Богатського НАН України, Одеська державна академія харчових технологій 33566 ну, у якому за рахунок заміни реагентів забезпечується підвищення чутливості визначення. Поставлену задачу вирішено у способі кількісного визначення ципрофлоксацину, який включає приготування проби для аналізу; взаємодію її з хімічним реагентом у розчині, вимірювання інтенсивності люмінесценції розчину, тим, що пробу піддають взаємодії із стандартним розчином хлориду тербій при РН 6,5-7,0 у присутності додецилсульфату натрію та триоктилфосфіноксиду (ТОФО) з подальшим вимірюванням інтенсивності люмінесценції тербію, за величиною якої визначають концентрацію ципрофлоксацину. Новим у заявлюваному винаході є використання сенсибілізованої люмінесценції іону тербію, посиленої у присутності поверхневоактивної речовини додецилсульфату натрію та використання водних розчинів у присутності уротропіну. Причинно-наслідковий зв'язок між сукупністю ознак, що заявляється і досягнутим результатом можна пояснити таким. Підвищення чутливості стало можливим завдяки використання поверхнево - активної речовини – додецилсульфату натрію, який дає можливість збільшити жорсткість молекул комплексу, а також сприяє дегідратації молекули комплексу, і тим самим зменшити випромінювальну дезактивацію енергії збудження. Це приводить до збільшення інтенсивності люмінесценції. Підвищення чутливості визначення досягається також тим, що, на відміну від прототипу, у пропонованому способі використовуються водні розчини для приготування проби, у котрій ми вимірюємо інтенсивність люмінесценції і для приготування розчину хлориду тербію. Застосування водних розчинів у присутності додецилсульфату натрію дозволяє підвищити інтенсивність люмінесценції комплексу Тв-ципрофлоксацин-ТОФО у 400 разів. На відміну від прототипу, у пропонованому способі розчин ТОФО готують не на токсичному метанолі, а на етанолі. Згідно з нашими даними, метанол знижує інтенсивність люмінесценції комплексу Тв-ципрофлоксацин-ТОФО у 7 разів. В пропонованому способі для утворення рН розчину використовується уротропін. В прототипі для цих же цілей використовують триетиламін, котрий являє собою досить сильний луг, який може вступати в процеси комплексоутворення з випромінюючою системою і сприяти, таким чином, безвипромінювальної дезактивації комплексу. Уротропін являє собою більш слабкий комплексоутворювач, і тому у концентраціях, котрі ми використовуємо, звичайно не вступає в процеси комплексоутворювання з лантанідами. Взаємодія ципрофлоксацину з тербієм відбувається в області рН від 5,0 до 11,0 максимум люмінесценції комплексу спостерігається в інтервалі рН 6,5-7,0 (фіг. 1), яке утворювали шляхом додавання 0,1мл 40%-го розчину уротропіну. Інтенсивність люмінесценції тербію .у розчині оптимальна при вмісті 3х10-4 моль/л триоктилфосфиноксиду (фіг. 2) і 1х10-3 моль/л додецилсульфату натрію (фіг.3). Фіг. 1. Залежність Ілюм тербію у комплексі з ципрофлоксацином від рН розчину Сть31= -5 =1х10 моль/л. Фіг. 2. Залежність Ілюм тербію у комплексі з ципрофлоксацином від кількості доданого розчину ТОФО Сть31=1х10-5 моль/л. Фіг. 3. Залежність Ілюм тербію у комплексі з ципрофлоксацином від кількості доданого розчину додецилсульфату натрію Сть31=Іх10-5 моль/л. Приклад Таблетку лікарського препарату "Цифран" ретельно розтирають у ступці. Наважку препарату 150 мг розчиняють у етанолі в мірній колбі на 100 мл при 50°С. Суміш відстоюють, розчин фільтрують. Визначення проводять за методом добавок (див.: Васильєв В.П. Аналитическая химия. – М.: Высшая школа, 1989. - Т. 2. - С. 8). Для цього у три пробірки вміщують по 0,1 мл приготовленого аналізованого розчину, у дві пробірки додають 0,1 мл та 0,2 мл робочого розчину ципрофлоксацину з концентрацією 1 мг/мл. У кожну пробірку додають по 0,1 мл розчину хлориду тербію із заданою кількістю 0,1 моль/л, а також по 0,1 мл 40% розчину уротропіну, 1 мл 1х10-2М водного розчину додецилсульфату натрію і 0,5 мл 1х10-2 моль/л етанольного розчину триоктилфосфиноксиду і доводять об'єм до 10мл водою. Паралельно готують розчин холостої проби, яка містить усі компоненти, крім ципрофлоксацину. Проби перемішують, вимірюють інтенсивність люмінесценції тербію при l=545 нм на спектрометрі СДЛ-1, або на іншому люмінесцентному спектрометрі, який дозволяє реєструвати інтенсивність люмінесценції у видимій області спектру. Вміст ципрофлоксацину розраховують за методом добавок. Чутливість способу, яка визначена за допомогою стандартних розчинів ципрофлоксацину, складає 0,00001 мкг/мл. Точність і достовірність визначення ципрофлоксацину у розчині перевірені шляхом статистичної обробки результатів визначення. При n=5, Р=0,95 величина відносного стандартного відхилення Sr=0,07. Таким чином, спосіб дозволяє підвищити чутливість визначення ципрофлоксацину на три порядки величини. 2 33566 Фіг. 1 3 33566 Фіг. 2 4 33566 Фіг. 3 __________________________________________________________ ДП "Український інститут промислової власності" (Укрпатент) Україна, 01133, Київ-133, бульв. Лесі Українки, 26 (044) 295-81-42, 295-61-97 __________________________________________________________ Підписано до друку ________ 2001 р. Формат 60х84 1/8. Обсяг ______ обл.-вид. арк. Тираж 50 прим. Зам._______ ____________________________________________________________ УкрІНТЕІ, 03680, Київ-39 МСП, вул. Горького, 180. (044) 268-25-22 ___________________________________________________________ 5