Комплексний засіб для уповільнення процесів старіння шкіри

Комплексний засіб для уповільнення процесів старіння шкіри, що містить гіалуронат натрію, який 3 калів і їхнім впливам на процеси метаболізму клітин. Вільними радикалами називаються молекули, що мають вільну валентність, тому вони активно вступають у хімічну реакцію. За даними деяких досліджень, ймовірність ранньої появи зморщок у жінок, які палять, утричі вище, ніж у тих, котрі не палять. У курців утворюються передчасні зморшки навколо очей і рота, зумовлені звуженням дрібних кровоносних судин обличчя й активацією вільнорадикального окиснення. На нейтралізацію вільних радикалів, що утворюються у великій кількості при палінні, витрачається вітамін С, необхідний для побудови колагену. У процесі старіння епідермальний шар значно стоншується, особливо в мальпігієвому шарі клітин, ділянка переходу епідермісу в дерму сплющується, що призводить до в'ялості шкіри. Роговий шар потовщується, збільшується відшарування епітелію, шкіра значно зневоднюється, ушкоджується її водноліпідна плівка. Дерма стоншується в результаті кількісного та якісного зниження активності фібробластів. Волокна колагену та еластину стають менш щільними і погано організованими. Продукція міцних колагенових волокон, що запобігають розтягненню і розривам еластинових волокон, сповільнюється, і стійкість сполучнотканинної системи до механічних і хімічних ушкоджень унаслідок цього значно знижується. Зменшується кількість структурних глікопротеїнів, у дермі нагромаджуються колоїдні маси, що надають шкірі жовтуватого відтінку. Поступово погіршується мікроциркуляція, стінки капілярів потовщуються, погіршується живлення клітин, сповільнюється їх поділ і зменшується розмір, поступово розвивається м'язова дистрофія, обличчя змінює форму, шкіра набуває пергаментного відтінку. Отже, основними патогенетичними механізмами старіння шкіри є: - порушення оптимального водного балансу у шкірі, внаслідок зниження кількості гіалуронової кислоти у шкірі та зменшенню її здатності утримувати воду, що в свою чергу призводить до зневоднення шкіри та втрати її тонусу; - уповільнення синтезу колагену та еластину, та зменшення кількості колагенових та еластинових волокон, що призводить до втрати пружності та еластичності шкіри; - дія вільних радикалів, які пошкоджують клітинні мембрани, при цьому в клітинах порушуються всі обмінні процеси, що призводить до руйнації клітин; руйнують колаген; пошкоджують ДНК клітин, що також веде до їх гибелі. Це призводить до порушення мікроциркуляції, погіршенню кольору та текстури обличчя, та передчасного старіння шкіри загалом. Дослівний переклад слова біоревіталізація "біооживлення" ("біооновлення" або "біовідновлення") [див. www.clinicas.ru]. Це ін'єкційний метод омолодження та профілактики старіння шкіри з використанням препаратів гіалуронової кислоти біоферментного походження. Відомий косметичний засіб для профілактики старіння шкіри та омолодження Іаl-System™ 1,8% 42990 4 компанії Phitogen (Італія), що містить натуральну гіалуронову кислоту (гіалуронат натрію) нетваринного походження ідентичну власній гіалуроновій кислоті шкіри людини [див. http://www.maspi.ru/Ial_system.asp]. Кожна упаковка IAL-System™ включає шприц одноразового використання, заповнений препаратом (1,1мл), який не потребує розведення та готовий до вживання. Препарат вводять найтоншими голками. Даний препарат зареєстрований в Україні - реєстраційне свідоцтво №7551/2008. До недоліків прототипу слід віднести те, що наповнений шприц містить лише один діючий компонент - гіалуронову кислоту, яка, хоча і є потужним зволожуючим компонентом та посилює ендогенний синтез гіалуронової кислоти, але не може забезпечити комплексний вплив на різні ланки патогенезу старіння шкіри. В основу корисної моделі поставлене завдання створення комплексного засобу для уповільнення процесів старіння шкіри, в якому за рахунок сполучення потрібних компонентів в одному шприці/або флаконі реалізується комплексний підхід до уповільнення процесів старіння шкіри та омолодження, забезпечуючи краще відновлення пружності та еластичності шкіри, рівня зволоженості та тонусу, кольору та текстури обличчя, усунення ознак старіння та втоми, що визначає його високу ефективність. Поставлене завдання вирішується тим, що комплексний засіб для уповільнення процесів старіння шкіри, який містить гіалуронат натрію, згідно корисної моделі, додатково містить амінокислоти, аскорбінову кислоту, буферний розчин при такому співвідношенні компонентів, в г/л: гіалуронат натрію 0,02-37,0 амінокислоти 0,01-30,0 аскорбінова кислота 0,05-130,0 буферний розчин решта. Співвідношення кількісного вмісту компонентів, які входять до складу комплексного засобу, в межах значень, що заявляються, було визначено експериментально. Експериментальним шляхом також встановлено, що при зменшенні кількісного вмісту його компонентів не забезпечуються лікувальні властивості засобу, а при збільшенні - існує загроза виникнення побічних реакцій (наприклад, алергічні реакції). Гіалуронова кислота (гіалуронат натрію) це глікозаміноглікан, що складається з Dглюкуронової кислоти та N-ацетил-D-глікозамін дисахаридних з'єднань. Він містить не менше 95,0% та не більше, ніж 105,0% гіалуронату натрію, обчисленого з посиланням на висушену суміш. Має властиву в'язкість не менше 90,0% і не більше 120,0% цінності вказаної на ярлику. Гіалуронова кислота це білий, або наближений до білого, високо гігроскопічний порошок, що важко розчиняється у воді, практично не розчиняється у ацетоні, етанолі та ефір (Європейська Фармакопея 4,01/2002:1472, С. 1915). Як амінокислоти засіб може містити пролін, лізин, гліцин, треонін, аспарагінову кислоту і інші фармацевтично прийнятні амінокислоти. 5 Амінокислоти (наприклад, пролін, лізин, гліцин, аспарагінова кислота, треонін) беруть участь в формуванні основних структурних білків шкіри колагену та еластину, які забезпечують пружність та еластичність шкіри. Пролін, лізин та гліцин є попередниками утворення колагену та покращують структуру шкіри. Пролін (пірролідін-б-карбонова кислота) - гетероциклічна амінокислота. Пролін являє собою безколірні легко розчинні у воді кристали, які плавляться при температурі 220°С. Пролін добре розчиняється в етанолі, гірше - в ацетоні та бензолі, не розчинний в ефірі (ДФУ, випуск 1.0, С. 439). Пролін - одна з двадцяти протеїногенних амінокислот. Вважається, що пролін входить до складу всіх білків організму. Особливо багатий проліном основний білок сполучної тканини - колаген. У складі колагену пролін при участі вітаміну С (аскорбінової кислоти) окислюється до оксіпроліну. Залишки проліну та оксіпроліну, що чергуються, сприяють створенню стабільної трьохспіральної структури колагену, яка придає молекулі пружність [див. www.novsu.ru]. Лізин - аліфатична незамінна амінокислота, яка входить до складу практично всіх білків організму. Хімічна формула: C6H14N2O2 (ДФУ, випуск 1.0, С. 404). Лізин приймає участь в формуванні колагену та відновленні тканин. Присутність проліну та лізину в колагені значно відрізняє його від інших білків в живих організмах (ці амінокислоти не зустрічаються у складі інших білків). Роль цих амінокислот дуже важлива в стабілізації трьохспіральної конформації молекул колагену. Молекула колагену побудована з трьох ланцюгів та являє собою потрійну спіраль. Амінокислоти в поліпептидному ланцюзі колагену розташовані групами (тріадами), схожими один з одним по структурі, які складаються з трьох амінокислот. Кожна третя амінокислота в первинній структурі колагену - гліцин (тріада (або група): (глі-Х-Y)n, де X - будь-яка амінокислота або пролін (оксіпролін), Y - будь-яка амінокислота, пролін (оксіпролін) або лізин (оксілізин). Ці поліпептидні групи в поліпептидному ланцюзі неодноразово повторюються. Незвичайна й вторинна структура колагену: шаг одного витку спіралі складають тільки 3 амінокислоти, а не 3,6 амінокислот на 1 виток, як це спостерігається у інших білків. Така щільна упаковка спіралі пояснюється присутністю гліцину. Ця особливість визначає вищі структури колагену. Аспарагінова кислота та треонін є попередниками утворення структурного білку шкіри еластину, який забезпечує еластичність шкіри [див. www.novsu.ru]. Гліцин - амінооцетова кислота, хімічна формула NH2CH2COOH. Безбарвні або білі кристали, солодкі на смак [див. http://www.biochemical.com.ua]. За хімічними властивостями гліцин - типова аліфатична аамінокислота, замінна. У складі білків зустрічається частіше, ніж інші амінокислоти (ДФУ, випуск 1.0, ст. 359). Треонін - (a-аміно-b-гідроксимасляна кислота), незамінна амінокислота. Хімічна формула 42990 6 СН3СН(ОН)СН(NH2)СООН. Природний L-треонін у кількості 2-6% входить до складу всіх природних білків та бере участь в їх утворенні. Існує у вигляді 4 оптично активних форм [див. http://ru.wikipedia.org] (ДФУ, випуск 1.0, ст. 459). Аспарагінова кислота - аліфатична амінокислота, яка зустрічається у вільному вигляді та у складі білків. Хімічна формула COOHCH2CHNH2COOH. (Європейська Фармакопея 5.0, С 1029). Аскорбінова кислота (вітамін С) активізує функцію фібробластів, за рахунок чого прискорюється синтез колагену та еластину, збільшується кількість колагенових таеластинових волокон. Також вітамін С забезпечує потужний антиоксидантний ефект та бореться з вільними радикалами (Європейська Фармакопея 5.0, С. 1025). Наводимо конкретні приклади одержання комплексного засобу, що заявляється. Приклад 1. В резервуар засипають у відповідній кількості амінокислоти (наприклад, пролін, лізин, гліцин, аспарагінову кислоту та треонін), аскорбінову кислоту (вітамін С) та добавляють, 80% від повного об'єму, буферний розчин. Субстанції гіалуронової кислоти, нагрівають до температурі 60°С та перемішують протягом 1 години, після чого доводять буферним розчином до 100% об'єму, і перемішують до повного розчинення. Проводять відбір проби та аналіз: рН розчину від 5,0 до 8,5, кількісний вміст компонентів засобу в 1мл приготовленого розчину повинен відповідати мінімальному вмісту всіх його компонентів в межах зазначених інтервалів, а саме в г/л: гіалуронат натрію 0,02 амінокислоти 0,01 аскорбінова кислота 0,05 буферний розчин до 1мл При відповідності розчину вищевказаним показникам його розливають у шприци місткістю 1, 1,5, 2,25 або 2,5мл та скляні флакони місткістю 6, 8, 10 або 15мл. Шприци закупорюють гумовими плунжерами. Флакони закупорюють гумовими пробками та герметизують алюмінієвими ковпачками. Попередньо наповнені шприци та флакони з розчином стерилізують в паровому стерилізаторі при температурі 105-121°С (тиск 1,1кПа протягом 1560хв.). Стерильні шприци та флакони з препаратом, після перегляду на механічні включення, етикетують та упаковують. Для отримання сертифікату якості проводять контроль якості препарату відповідно до ТУ по всіх показниках. Після отримання сертифікату якості на готову продукцію його передають на склад, після чого він поступає споживачу. Розчин отриманого комплексного засобу являє собою прозору рідину жовтуватого кольору. Стабільність розчину перевірена в умовах стерилізації, а також при тривалому збереженні та методом прискореного старіння. До та після стерилізації, а також в процесі прискореного старіння проводився контроль прозорості та кольоровості розчину, а також кількісного вмісту дійової речовини - гіалуронату натрію. Було встановлено, що лікувальні властивості засобу, що заявляється, залишаються 7 стабільними після стерилізації та його збереженні протягом 2 років. Приклад 2. Засіб одержують по схемі як в прикладі 1. Проводять відбір проби та аналіз: рН розчину від 5,0 до 8,5, кількісний вміст компонентів засобу в 1мл приготовленого розчину повинен відповідати середньому вмісту всіх його компонентів в межах зазначених інтервалів, а саме в г/л: гіалуронат натрію 18,5 амінокислоти 15,0 аскорбінова кислота 65,0 буферний розчин до 1мл При відповідності розчину вищевказаним показникам його розливають у шприци місткістю 1, 1,5, 2,25 або 2,5мл та скляні флакони місткістю 6, 8, 10 або 15мл. Шприци закупорюють гумовими плунжерами. Флакони закупорюють гумовими пробками та герметизують алюмінієвими ковпачками. Попередньо наповнені шприци та флакони з розчином стерилізують в паровому стерилізаторі при температурі 105-121°С (тиск 1,1кПа протягом 1560хв.). Стерильні шприци та флакони з препаратом, після перегляду на механічні включення, етикетують та упаковують. Для отримання сертифікату якості проводять контроль якості препарату відповідно до ТУ по всіх показниках. Після отримання сертифікату якості на готову продукцію його передають на склад, після чого він поступає споживачу. Розчин отриманого комплексного засобу являє собою прозору рідину жовтуватого кольору. Стабільність розчину перевірена в умовах стерилізації, а також при тривалому збереженні та методом прискореного старіння. До та після стерилізації, а також в процесі прискореного старіння проводився контроль прозорості та кольоровості розчину, а також кількісного вмісту дійової речовини - гіалуронату натрію. Було встановлено, що лікувальні властивості засобу, що заявляється, залишаються стабільними після стерилізації та його збереженні протягом 2 років. Приклад 3. Засіб одержують по схемі як в прикладах 1 та 2, але кількісний вміст компонентів засобу в 1мл приготовленого розчину був максимальним в межах зазначених інтервалів, в г/л: гіалуронат натрію 37,0 амінокислоти 30,0 аскорбінова кислота 130,0 буферний розчин до 1мл При відповідності розчину вищевказаним показникам його розливають у шприци місткістю 1, 1,5, 2,25 або 2,5мл та скляні флакони місткістю 6, 8, 10 або 15мл. Шприци закупорюють гумовими плунжерами. Флакони закупорюють гумовими пробками та герметизують алюмінієвими ковпачками. Попередньо наповнені шприци та флакони з розчином стерилізують в паровому стерилізаторі при температурі 105-121°С (тиск 1,1кПа протягом 1560хв.). Стерильні шприци та флакони з препаратом, після перегляду на механічні включення, етикетують та упаковують. Для отримання сертифікату якості проводять контроль якості препарату відповідно до ТУ по всіх показниках. Після отри 42990 8 мання сертифікату якості на готову продукцію його передають на склад, після чого він поступає споживачу. Розчин отриманого комплексного засобу являє собою прозору рідину жовтуватого кольору. Стабільність розчину перевірена в умовах стерилізації, а також при тривалому збереженні та методом прискореного старіння. До та після стерилізації, а також в процесі прискореного старіння проводився контроль прозорості та кольоровості розчину, а також кількісного вмісту дійової речовини - гіалуронату натрію. Було встановлено, що лікувальні властивості засобу, що заявляється, залишаються стабільними після стерилізації та його збереженні протягом 2 років. Комплексний засіб для уповільнення процесів старіння шкіри, завдяки комбінації гіалуронової кислоти, амінокислот та аскорбінової кислоти, діє одночасно в трьох напрямках направлених проти старіння шкіри: 1) гіалуронова кислота усуває зневоднення шкіри, зволожує, за рахунок поповнення її дефіциту в тканинах та стимулює проліферацію фібробластів посилюючи ендогенний синтез гіалуронової кислоти. Підтримує достатній рівень зволоженості та тонус шкіри; 2) амінокислоти (наприклад, пролін, лізин, гліцин, треонін, аспарагінова кислота) сприяють виробленню основних структурних білків шкіри колагену та еластину тому, що є його попередниками, і тим самим відновлюють еластичність та пружність шкіри; 3) аскорбінова кислота (вітамін С) забезпечує потужний антиоксидантний ефект, бореться з вільними радикалами та стимулює активність фібробластів, які в свою чергу синтезують колаген. Покращує колір та текстуру обличчя. Кожний компонент комплексу діє цілеспрямовано та обґрунтовано на патогенетичні механізми старіння. А завдяки синергічній дії вказаних компонентів забезпечується комплекс фізіологічних ефектів, що призводить до відновлення фізіологічних властивостей шкіри. Комплексний засіб для уповільнення процесів старіння шкіри вводять інтрадермально (внутрішньошкірно) використовуючи такі техніки: - мультипунктурна техніка: препарат вводять роблячи внутрішньошкірні мікроін'єкції до виникнення маленьких папул вздовж зморшок та ліній. Маленькі папули вводять на відстані декілька міліметрів один від одного. Голку вводять під кутом 30-45° до поверхні шкіри в верхню третину дерми на глибину 2-3мм, зрізом доверху. Використовуються голки 32G 4, 9, 12 або 13мм, 30G 4, 9, 12 або 13мм; 27G 4, 9, 12 або 13мм; - «наппаж»: роблять внутрішньошкірні дуже поверхневі мікроін'єкції, мікропапули на відстані приблизно 1см по всьому обличчю, зоні декольте та тильній стороні китиць. Для з'ясування ефективності запропонованого засобу були проведені експериментальні доклінічні випробування на лабораторних тваринах. Проводили вивчення токсичності та нешкідливості комплексного засобу в умовах гострого та хронічного досліду. В результаті проведених досліджень 9 42990 встановлена його практична нешкідливість, відсутність алергогенних властивостей та негативного впливу на морфологію клітин шкіри тварин. Комплексний засіб для уповільнення процесів старіння шкіри з різними концентраціями амінокислот, аскорбінової кислоти та з різними концентраціями гіалуронової кислоти вводили шляхом ін'єкції інтрадермально в шкіру спини кроликів: (по шість тварин із кожної групи були використані для спостереження за почервонінням і підтримкою об'єму протягом 10 днів, а іншим шести тваринам з кожної була зроблена евтаназія на 2, 6, 8, 10, 14 і 21 день (по одній тварині в кожний зазначений день) для гістологічного дослідження біосумісності). Проведеними дослідженнями встановлено, що комплексний засіб для уповільнення процесів старіння шкіри з різними концентраціями амінокислот, аскорбінової кислоти та з різними концентраціями гіалуронової кислоти мав тривалий час знаходження в тканинах, демонструючи в той же час значно кращий результат по підтримці об'єму, чим контрольні зразки препаратів, що містили лише гіалуронову кислоту, особливо на початковій стадії (71% початкового об'єму проти 23% і 21%, відповідно, на 2-й день). При дослідженнях під мікроскопом у піддослідних тварин не спостерігалось ніяких негативних проявів. Гістологічна перевірка підтвердила відсутність випадків негативних реак Комп’ютернаверстка Л.Литвиненко 10 цій, стійкого запалення, дегенерації тканин чи некрозу. Фагоцитоз проміжних макрофагів при використанні комплексного засобу для уповільнення процесів старіння шкіри з різними концентраціями амінокислот, аскорбінової кислоти та з різними концентраціями гіалуронової кислоти був більш постійним порівняно з препаратом, який містить тільки гіалуронову кислоту, що обумовлено його більш довгим часом присутності в тканинах. Таким чином, комплексний засіб для уповільнення процесів старіння шкіри, повною мірою виявляє свої властивості саме в межах обраних компонентів та їх кількісного співвідношення, що заявляються; лікарська форма даного засобу у вигляді розчину для інтрадермального введення зберігає специфічну активність та стабільність активного інгредієнту під час застосування і зберігання, а також необхідний рівень якості, тобто залишається прозорою та безбарвною до та після стерилізації, а також при збереженні у формі розчину тривалий час (протягом 2 років). Комплексний засіб є багатообіцяючим дермальним біоревіталізатором, що характеризується високими показниками безпеки і пролонгованим часом наявності в тканинах в порівнянні з препаратом, що містить лише гіалуронову кислоту. Засіб може бути рекомендований широкому колу пацієнтів завдяки його універсальній дії. Підписне Тираж 28 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601