Спосіб визначення стійкості картоплі до фомозу phoma exiqua

Реферат: Спосіб визначення стійкості картоплі до фомозної гнилі Phoma exigua включає зараження бульб різних за стійкістю до патогену сортів картоплі. Аналіз ураження дисків картоплі проводять способом інфрачервоної спектроскопії. UA 69133 U (12) UA 69133 U UA 69133 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Корисна модель належить до галузі сільського господарства, зокрема до захисту рослин від негативної дії шкідливих організмів та хвороб. В сільському господарстві відомий метод інфрачервоної мікроскопії для діагностики ушкодження і стійкості зернових до шкідників [1]. В картоплярстві відомі лабораторні способи визначення стійкості сортів та гібридів картоплі до фомозної гнилі Phoma exigua [2]. Лабораторний спосіб, включає в себе зараження бульб картоплі інокулюмом фомозної гнилі (найближчий аналог) [3]. Спосіб, що вирішується у найближчому аналозі, полягає в тому, що він включає в себе зараження бульб картоплі інокулюмом фомозної гнилі. Через 7 тижнів проводять облік ураження хворобою. У сприйнятливих сортів картоплі спостерігається поява коричневих плям на бульбах, а у стійких - їх відсутність. Згадані способи та спосіб-аналог мають такі недоліки: 1. Вони є трудомісткими. 2. Їх використання пов'язане з затратою часу. В основу корисної моделі поставлено задачу розробити спосіб визначення стійкості картоплі до фомозної гнилі шляхом інфрачервоної спектроскопії. Поставлена задача вирішується тим, що у запропонованому способі шляхом зараження фомозною гниллю бульб різних за стійкістю до патогену зразків картоплі з наступним їх аналізом інфрачервоною спектроскопією при довжині хвилі 1510 нм і таким чином вдається визначити ступінь стійкості до хвороби. 1. Запропонований спосіб дозволяє визначити ступінь стійкості за значно коротший термін часу - за 20 хвилин (в аналозі - протягом 4-х годин). 2. Суттєвою відмінністю нового способу є те, що інфрачервоною спектроскопією вдається точніше визначити ступінь стійкості картоплі до фомозної гнилі, ніж іншими способами, особливо способом-аналогом. Приклади здійснення способу. Приклад 1 (аналог). Лабораторна оцінка стійкості бульб картоплі до фомозу проводилась шляхом зараження картоплі різних сортів зі внесенням інокулюму (двотижнева культура патогену на картопляноглюкозному агарі) в лунки, виконані пробковим свердлом в бульбах на глибину 10 мм. Інокульовані бульби зберігались протягом 6-7 тижнів при 4-8 °С до прояву захворювання. Інокуляція бульб проводилась в березні-квітні, тобто в період найбільшої сприйнятливості бульб до хвороби [3, 4]. Ступінь ураження визначають на основі оцінки кожної окремої бульби за п'ятибальною шкалою. Тобто оцінюють, скільки п'ятих частин бульби є ураженими, і в залежності від цього визначають бал ураження від 0 до 5. Для характеристики зразка використовували шкалу оцінки стійкості бульб з визначенням показника ураження (Пу) у відсотках: 1. Стійкі - 0-5 %; 2. Відносностійкі - 6-10 %; 3. Середньостійкі - 11-25 %; 4. Сприйнятливі - 26-50 %; 5. Високосприйнятливі - 51-100 %. В аналізованих таким чином 6 сортах картоплі (Таблиця) ступінь ураження фомозною гниллю склала: 1 - 0 сортів; 2 - 3 сорти: Невська - 6,0 %, Серпанок - 4,0 %, Слов'янка - 8,0 %; 3 - 1 сорт картоплі: Санте - 15,6 %; 4 - 1 сорт картоплі: Явір - 33 %; 5 - 1 сорт картоплі: Лілея - 100 %. Приклад 2. Вирізані лунки бульб сортів картоплі заражали збудником хвороби в лабораторних умовах (як за прикладом 1) при 4-8 °С протягом 7 тижнів [2, 3]. Після цього провели аналіз реакції зразків картоплі на зараження патогеном. Для цього диски бульб картоплі, що заражались фомозною гниллю поміщали у кювету інфрачервоного аналізатора ІФА-61 (фірми JEOL, Японія) і при довжині хвилі 1510 нм визначали їх ступінь ураження фомозною гниллю (%) [1]. Математичну обробку даних проводили за Масловим Ю.І. [6]. Результати досліджень представлені у таблиці, кресленні. 1 UA 69133 U 5 10 15 За результатами аналізу ступеня ураження картоплі фомозною гниллю у сприйнятливих сортів картоплі коливається в межах 33-100 %; у середньо-стійкого сорту Санте ступінь ураження склав 15,6 %, у стійких сортів картоплі Невська, Серпанок та Слов'янка ступінь ураження сягав лише 6,8-8,3 %, таблиця, креслення. На кресленні зображено ступінь ураження стійких до фомозної гнилі сортів картоплі Невська (8,3 %) Серпанок (7,6 %) Слов’янка 6,8 %), середньо-стійкого до хвороби сорту Санте (15,3 %), сприйнятливих до фомозної гнилі сортів картоплі Явір (29,6 %) та Лілея (100 %). Таким чином, аналізом ураження контрастних за стійкістю до фомозної гнилі сортів картоплі інфрачервоною спектроскопією вдається визначити їх ступінь стійкості до патогену. Процес визначення ступеня стійкості 6 сортів картоплі до фомозної гнилі інфрачервоною спектроскопією склав 20 хвилин, а способом зараження бульб картоплі суспензією хвороби (аналог) - 4 години. Запропонований спосіб визначення стійкості картоплі до фомозної гнилі картоплі підтверджує експериментальна перевірка, яка здійснювалась при ураженні патогеном сортів та гібридів, отриманих із Інституту картоплярства НААН, Поліського відділення Інституту картоплярства НААН України. Таблиця Ступінь ураження зразків картоплі фомозною гниллю, визначений різними способами (2010-2011 рр.) № п/п Сорти, гібриди картоплі 1 1. 2. 3. 4. 5. 6. 20 25 30 2 Невська Серпанок Слов'янка Санте Явір Лілея Ступінь ураження Прямим способом зараження Способом інфрачервоної (%) (аналог) спектроскопії, % (М±m) 3 4 6,0 8,3±0,33 4,0 7,6±0,33 8,0 6,8±0,66 15,6 15,3±0,66 33,0 29,6±0,33 100 100,0±0,00 Літературні джерела: 1. Вилкова И.А. Использование инфракрасной спектроскопии для диагностики повреждения и устойчивости зерновок к клопам. Шапиро И.Д., Борщова Т.А. // Методы исследований патологических изменений растений. М.: Колос. - 1986. - С. 216-219. 2. Методы фитопатологии. // Кирай З., Клемент З., Шоймоши Ф., Вереш Й. - М.: Колос, 1974. - с. 82-159. 3. Хвороби і шкідники картоплі. // Положенець В.М., Марков І.Л., Мельник П.О. - Житомир: Полісся, 1994. - 246 с. 4. Otazu, V.; Boerema, G.H.; Mooi, J.C.; Salas, В. (1979) Possible geographical origin of Phoma exigua var. foveata, the principal causal organism of potato gangrene. Potato research 22, 333-358. 5. Boerema, G.H.; Kesteren, H.A. van (1981) Mycological diagnostic problems. Bulletin OEPP/EPPO Bulletin 11, 115-118. 6. Маслов Ю.И. Статистическая обработка данных биохимических исследований // Методы биохимического анализа растений. Л., 1978. - С. 163-178. ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 35 Спосіб визначення стійкості картоплі до фомозної гнилі Phoma exigua, що включає зараження бульб різних за стійкістю до патогену сортів картоплі, який відрізняється тим, що аналіз ураження дисків картоплі проводять способом інфрачервоної спектроскопії при довжині хвилі 1510 нм. 2 UA 69133 U Комп’ютерна верстка Л.Литвиненко Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 3