Спосіб штучного осіменіння тварин та пристрій для його здійснення

1. Спосіб штучного осіменіння тварин, що включає розморожування дози сперми, розміщення її в інструменті і введення в статеві шляхи самиці, який відрізняється тим, що перед осіменінням дозу сперми, заморожену в гранулі або паєті, розріджують безпосередньо в еластичній пластиковій ампулі, яка містить сольовий ізотонічний розчин, і вводять із неї розконсервовану сперму в статеві органи самиці без доступу мікроорганізмів C2 1 3 78045 4 його за прямим призначенням потребує високої 1мл, який термостатують у біотермостаті при кваліфікації операторів і їх спеціальної підготовки. +40°С. Після досягнення розчином цієї температуДо того ж паєтоввід не забезпечує збереження ри концентровану гранулу сперми за допомогою санітарної якості сперми і асептичного введення її пінцета переносять із рідкого азоту в теплий розу статеві шляхи самиць у зв'язку з необхідністю чин і витримують гам до перетворення її із твердопопередньої розгерметизації паєти зі спермою го у рідкий стан. Експозиція розморожування спеперед осіменінням Це призводить до контакту рми становить 30-40сек. Потім розморожену сперми і окремих деталей інструмента із зовнішнім сперму переливають із флакона в ампулу, яку середовищем, забрудненим мікрофлорою (не стез'єднують з катетером і проводять штучне осімерильним повітрям лабораторії і манежу, пункту ніння корови. штучного осіменіння, мікрофлорою піхвового слизу Недоліками конструкції інструмента і способу і т. п.), яка потім разом з інструментом і спермою його використання є складність процесу розморовноситься у матку, інфікує її, що є однією з голожування сперми, бактеріальне забруднення і невних причин розповсюдження захворювань статеможливість пристосування санітарного чохла для вих органів самиць і зниження заплідненості. Сутасептичного введення сперми в статеві шляхи, тєвим недоліком інструмента і способу додаткові матеріальні затрати на придбання склявикористання сперми в паєтах є те, що вони не них ампул і флаконів та їх стерилізацію. При манізабезпечують визначення оцінки якості сперми у пуляціях зі спермою вона підлягає багаторазовим кожній дозі перед введенням її у статеві шля хи контактам із зовнішнім середовищем, що призвосамиць і не дають можливості прогнозувати редить до її мікробного забруднення, а також до зультативність запліднення. Безконтрольне ж виускладнень і незручності в роботі при осіменінні користання неякісної сперми в свою чергу може самиць із-за ненадійності фіксації катетера в канапризвести до масового непліддя і значним збитлі ампули, які часто роз'єднуються, або ж навпаки кам. До недоліків паєтовводу слід додати неможкінець катетера просовується в ампулу і не дає ливість його використання для введення в статеві можливості повністю витіснити сперму із ампули у шляхи самиць сперми, замороженої у відкритих, статеві шляхи самиці. Суттєвим недоліком також є або облицьованих гранулах, що знижує його практе, що при розгерметизації скляних ампул в розтичну цінність. Крім того він призначений для багачин потрапляють мілкі осколки скла, які неможлиторазового використання, що потребує його миття во відокремити від сперми після її розморожувані стерилізації перед кожним осіменінням тварин і ня. При осіменінні самиць інструментом осколки пов'язано з додатковими трудовими і матеріальскла потрапляють разом зі спермою у статеві ними затратами. А, згідно технологічного регламешляхи, травмують їх і викликають симптоматичне нту, при тривалому (понад 5 років) зберіганні спенепліддя [Успенский А.Н., Морозов Н.Л. и др. Отрми у пластикових паєтах у рідкому азоті її таивание спермы провоцирующее симптоматичеснеобхідно перед осіменінням тварин розморожукое бесплодие коров. // С.-х. наука Сев.-Вост. еввати у 3%-ному розчині натрію цитрату, що повнісроп. части России Т.З / НИИ с.х. Сев.-Bocт. - 1995. тю виключає можливість використання для осіме- C.87-88]. ніння самиць паєтоввода і пластикової паєти, із-за Завданням винаходу є уніфікація інструмента необхідності додаткового розрідження і збільшенпід штучне осіменіння самиць спермою, замороня об'єму дози сперми від 0,25 до 1мл. [Інструкція женою у формі гранул і в паєта х, покращення умов зі штучного осіменіння корів і телиць. - Київ, 2001. збереження санітарної якості сперми при її розмоС.11]. рожуванні і введенні у статеві шляхи, підвищення Відомий також інструмент для штучного осімезаплідненості, спрощення технології осіменіння і ніння включає еластичну пластикову ампулу в фозниження матеріальних затрат. рмі конусу із запаяним дном і шийкою із каналом, Поставлене завдання досягається тим, що у звуженим в її вершині, а також вставний катетер, відомому інструменті, який складається із пластиякі з'єднують при використанні. Спосіб викорискової ампули в формі конусу з запаяним дном, тання інструмента заключається в заповненні амшийкою з каналом звуженим в її вершині і вставнопули спермою об'ємом 1мл і введенні її через каго катетера, відрізняється тим, що ампула містить тетер у шийку матки. [Чирков В. А. Обоснование и ізотонічний сольовий розріджувач для розморожупроизводственное испытание маноцервикального вання сперми і додатково обладнана жорсткою метода искусственного осеменения коров. / Моловставною опорною муфтою, виконаною у формі чно-мясное скотоводство. 1965.3.С.4-11. Інструкція циліндра з патрубком, зовнішній діаметр патрубка зі штучного осіменіння корів і телиць. - Київ, 2001. відповідає внутрішньому діаметру каналу шийки С14-15]. ампули, забезпечуючи їх герметичне з'єднання, а Для осіменіння самиць використовують спервнутрішній канал муфти виконано у вигляді каскаму, заморожену у відкритих гранула х, об'ємом ду обойм із різними внутрішніми діаметрами: під 0,25мл і додатково розріджувач для сперми (2,9%гранулу замороженої сперми, під катетер і під паєний розчин натрію цитрату), розфасований по 1мл. ти, а вставний катетер герметизовано еластичним і герметизований у скляних ампулах, які постачачохлом, який на відкритому кінці має петлевидний ються біологічною промисловістю. [Інструкція зі отвір під палець руки оператора. Спосіб викорисштучного осіменіння корів і телиць. - Київ, 2001. тання інструмента полягає у тому, що виключаючи С.14-15]. скляні ампули, флакони і паєтовводи, пластикову При розморожуванні сперми від скляної ампуампулу заздалегідь асептично заповнену довголи відбивають запаяну горловину і переливають із збережним стерильним розріджувачем, герметичампули у флакон розчин натрію цитрату, об'ємом но з'єднують з муфтою і через неї вводять в ампу 5 78045 6 лу дозу сперми, заморожену в гранулі або в паєті, но конічним під різні діаметри паєт. а після її розрідження до ампули під'єднують встаНа Фіг.3 зображено ампулу з розріджувачем вний катетер, герметизують еластичним чохлом і для сперми (1) і опорну муфту (2) із дозою сперми, проводять штучне осіменіння тварин асептичним замороженою в гранулі (3) в положенні її розмоспособом одним із зазначених методів (маноцервірожування і перефасування в ампулу. кальним, ректоцервікальним, візоцервікальним На Фіг.4 зображено ампулу з розріджувачем або епіцервікальним). В даному разі еластична для сперми (1) і опорну муфту (2) із під'єднаною до пластикова ампула виконує функції: ємності для неї паєтою (3) в положенні перефасування розмоцентралізованого виробництва розчину натрію роженої сперми із паєти в ампулу. цитрату і його зберігання, ємності для розморожуПриклади конкретного виконання. вання і додаткового розрідження сперми, а також Приклад №1. Згідно винаходу замість скляних робочого органа інструмента для введення сперми взяли еластичні пластикові ампули, заповнили їх в статеві шля хи самиць. асептично ізотонічним розчином натрію цитрату На Фіг.1 зображено запропонований інстру(2,9%) і запаяли канали шийок ампул термічним мент для штучного осіменіння тварин (загальний способом. В контролі використали стандартний вигляд), який включає еластичну полімерну ампурозчин натрію цитрату у скляних ампулах промислу (1), заповнену розріджувачем для сперми, ополового виробництва. Дослідні і контрольні зразки рну муфту (2) і полімерний катетер (3), герметизоампул з розчином зберігали протягом 12 місяців ваний тонкостінним еластичним полімерним при кімнатній температурі. Оцінку якості розчинів чохлом (4), який на відкритому кінці має подовжній визначали через 3, 6 і 12 місяців зберігання за розріз, утворюючий петлеподібний отвір (5). біологічними і санітарними показниками. На Фіг.2 зображено опорну муфту, яка виконаБіологічні показники дослідного і контрольного на у формі циліндра (1) з патрубком (2) і внутрірозріджувачів визначали на спермі бугаїв, за рухшнім каналом (3), виконаним у вигляді каскаду ливістю статеви х клітин після їх розморожування у обойм із різними внутрішніми діаметрами: під грацих середовищах, а при бактеріологічних дослінулу замороженої сперми (верхня секція - А), під дженнях визначали у розріджувачах загальну кількатетер (середня секція - Б) і під паєту зі спермою кість мікроорганізмів і Колі-титр. Одержані резуль(нижня секція - В), причому канал секції-В виконатати досліджень наведені в таблиці. Таблиця Залежність біологічних і санітарних показників розчину натрію цитрату від строків зберігання його в скляних і полімерних ампулах Показники біоСтроки зберігання (місяці) логічної і саніта0 3 6 12 рної якості роздослід контр. дослід контр. дослід контр. дослід контр. ріджувача Рухливість спе4,1 4,0 4,2 4,2 4,1 4,1 4,3 4,3 рми після реконсервації, бали Кількість мікробних тіл в 1мл, стерильно стерильно стерильно стерильно стерильно стерильно стерильно стерильно шт. Колі-титр негативнийнегативнийнегативнийнегативнийнегативнийнегативнийнегативнийнегативний Наведені дані показують, що використання пластикових ампул в якості ємностей для розфасування і довготривалого зберігання розчину нагрію цитрату у порівнянні з скляними ампулами не впливає негативно на санітарні і біологічні показники розчину. За цими показниками як у досліді, так і в контролі одержані ідентичні результати, що дає підставу для заміни скляних на еластичні пластикові ампули при виготовленні 2,9%-ного розчину натрію цитрату для розрідження сперми. Ефективність такої заміни обумовлена виключенням додаткових затрат на виготовлення і придбання скляних ампул для розчину натрію цитрату, уникненням розтріскування ампул в процесі їх зберігання і транспортування, а при розморожуванні сперми запобігання можливого попадання осколків скла в сперму і в статеві шляхи самиць при штучному осіменінні, що сприяє оптимізації умов запліднення і підвищенню результативності технології осіменіння корів і телиць. Приклад №2. Взяли пластикову ампулу із розчином цитрату, помістили її у біотермостат і витримали при +40°С до досягнення заданої температури розчинником. Звужену вер хівку шийки ампули відокремили стерильними ножицями і герметично з'єднали ампулу з патрубком опорної муфти як показано на Фіг.3. Паралельно з цим за допомогою пінцета вийняли із рідкого азоту заморожену гранулу сперми і розмістили її у розширену частину муфти (сектор А, Фіг.3). При цьому вказівним і великим пальцями руки стиснули пружні стінки пластикової ампули і витіснили із неї теплий розчин натрію цитрату у розширену частин у муфти з гранулою сперми. Під дією теплого розріджувача гранулу розморозили і розрідили у розчині. Після завершення переходу спермодози із твердого у рідкий стан стінки ампули відпустили, при цьому вони за рахунок пружності прийняли першопочат 7 78045 8 кове положення, що сприяло зворотному переміго азоту за допомогою пінцета пластикову паєту з щенню розчину з розмороженою спермою в ампузамороженою спермою і занурили її у воду біотерлу. Одн у краплю сперми нанесли на предметне мостату до повного її розморожування. Після розскло і визначили рухливість сперміїв за 10-ти баморожування сперми поверхню паєти протерли льною системою. Після цього в канал муфти (секстерильною серветкою і знезаразили тампоном тор Б, Фіг.2) вставили кінець катетера, загерметизмоченим 70° етиловим спиртом. зованого з вихідного кінця еластичним чохлом і Кінець паєти (герметизований термозваркою) після санітарної обробки корови асептично ввели відрізали стерильними ножицями, одночасно з розморожену сперму в її статеві шляхи одним із цим пальцями руки стиснули стінки ампули з розспособів (ректоцервікальним, маноцервікальним, чином натрію цитрату і витіснили із неї повітря над візоцервікальним або епіцервікальним). розчином. Запропоноване технічне рішення у порівнянні В такому положенні відкритим кінцем паєту з прототипом забезпечує: ввели в опорну муфту в нижню кінцеву (секцію В) - значне спрощення техніки розморожування до герметичного вклинювання відкритого кінця сперми у відкритих гранула х за рахунок виключенпаєти у каналі муфти. Після герметичного з'єднання із технологічного процесу скляних ампул і фланя паєти з муфтою відп устили пружні стінки ампуконів; ли, що створило вакуум в ампулі. Після цього від- зниження вірогідності додаткового забрудрізали протилежний кінець соломинки разом з нення сперми мікроорганізмами зовнішнього серевставною пробкою. При цьому сперма спонтанно довища при її розморожуванні; перемістилась із соломинки безпосередньо у амзабезпечення зручності і надійності введення пулу з теплим розчином натрію цитрату. інструмента і сперми в статеві шляхи самицям за Після розморожування сперми у розчині одну рахунок надійної фіксації в опорній муфті ампули і краплю сперми наносили на предметне скло і оцікатетера, а також зручної фіксації опорної муфти нювали рухли вість сперми під мікроскопом. рукою оператора при введенніінструмента в шийДалі спорожнену від сперми пластикову паєту ку матки. утилізували, а в канал муфти (сектор Б, Фіг.4) Приклад №3. Взяли пластикову ампулу із розвставили кінець катетера загерметизованого з чином натрія цитрату, помістили її у біотермостат і вихідного кінця еластичним чохлом і після санітарвитримали при +40°С до досягнення розчином ної обробки корови асептично ввели відтаяну спезаданої температури. рму в її ста теві шля хи одним із способів (ректоцеЗвужену верхівку ампули відокремили спеціарвікальним, маноцервікальним або льними ножицями і до неї герметично під'єднали епіцервікальним) аналогічно попередньому приопорну муфту, паралельно з цим вийняли із рідкокладу. 9 Комп’ютерна в ерстка О. Гапоненко 78045 Підписне 10 Тираж 26 прим. Міністерство осв іт и і науки України Держав ний департамент інтелектуальної в ласності, вул. Урицького, 45, м. Київ , МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислов ої в ласності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601