Спосіб одержання рослинної субстанції з протизапальною та сечогінною активністю

Реферат: Спосіб одержання рослинної субстанції з протизапальною та сечогінною активністю, зокрема трави розхідника звичайного (Glechoma hederacea L.) включає технологічний етап водного екстрагування. Екстракцію спочатку проводять 70 % етиловим спиртом. UA 87817 U (54) СПОСІБ ОДЕРЖАННЯ РОСЛИННОЇ СУБСТАНЦІЇ З ПРОТИЗАПАЛЬНОЮ ТА СЕЧОГІННОЮ АКТИВНІСТЮ UA 87817 U UA 87817 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Корисна модель належить до фармації, зокрема способів одержання фармакологічно активної субстанції з лікарської сировини, а саме з трави розхідника звичайного (Glechoma hederacea L.), комплексу фенольних сполук (флавоноїдів, гідроксикоричних кислот, дубильних речовин) із вираженою протизапальною і сечогінною активністю для використання їх як діючих речовин лікарських засобів протизапальної і сечогінної дії. Відомий спосіб одержання рослинної субстанції з протизапальною активністю, зокрема із пирію повзучого, що включає технологічний етап екстрагування [Патент 7213 U. Україна, МПК А61К 35/78. Спосіб отримання фармакологічно активної субстанції з рослинної сировини]. Недоліком відомого способу є недостатній рівень технологічності, що випливає із обмеження його лише станом водного екстрагування. В силу цього, розчинні в спирті компоненти не потрапляють в екстракт. Наведене вище обумовлює недостатній спектр фармакологічної активності. В основу корисної моделі поставлено задачу розробки способу одержання рослинної субстанції з протизапальною та сечогінною активністю шляхом спиртово-водного екстрагування з рослинної сировини - трави розхідника звичайного біологічно активних речовин, який забезпечить повне екстрагування діючих речовин та високу фармакологічну активність, отриманої субстанції. При вирішенні технічної задачі були взяті до уваги результати попередніх фітохімічних досліджень, які показали, що трава розхідника звичайного містить біологічно активні речовини: флавоноїди, гідроксикоричні кислоти, дубильні речовини, органічні кислоти, ефірні олії, які характеризуються протизапальними та сечогінними властивостями, а отриманий сухий екстракт трави розхідника звичайного (ЕРЗ) у вигляді сухої субстанції є перспективним для використання протизапальним і сечогінним засобом. Виходячи з наведеного вище, одержання фармакологічно активної субстанції із трави розхідника звичайного, проводять екстракцією біологічно активних речовин 70 % етиловим спиртом. Одержаний спиртовий екстракт відфільтровують крізь паперовий фільтр під вакуумом і згущують до густого стану в ротаційно-вакуумному випарювачі, потім проводять екстрагування киплячою водою, водний витяг згущують у роторно-вакуумному випарювачі до густого екстракту, згущені спиртовий і водний витяги об'єднують та висушують у роторно-вакуумному випарювачі до сухого порошку. Спосіб здійснюють наступним чином. Повітряно-суху сировину (траву розхідника звичайного) подрібнюють до розміру часток, що проходять крізь сито з діаметром отворів 5 мм і заливають 70 % спиртом етиловим до дзеркала. Сировину екстрагують протягом 24 год. при кімнатній температурі. Далі сировину відфільтровують крізь вакуумний фільтр. Отриманий фільтрат упарюють на вакуумно-ротаційному випарювачі при температурі 60-70 °C до густого екстракту. Сировину заливають гарячою водою (не окропом) у співвідношенні 1:10 і екстрагують на водяній бані протягом 2 год. Сировину відфільтровують крізь вакуумний фільтр і повторюють екстракцію ще двічі по 30-40 хв. Водні екстракти об'єднують і упарюють до густого. Густі спиртовий і водний екстракти об'єднують і висушують до сухого стану під вакуумом. Приклад 1. 100 г повітряно-сухої трави розхідника звичайного подрібнювали до розміру часток, що проходять крізь сито з діаметром отворів 5 мм та заливали 70 % спиртом етиловим до дзеркала. Сировину екстрагували протягом 24 год. при кімнатній температурі. Далі сировину відфільтрували через вакуумний фільтр. Отриманий фільтрат випарювали на вакуумноротаційному випарювачі при температурі 60-70 °C до густого екстракту. Потім сировину заливали гарячою водою (не окропом) у співвідношенні 1:10 і екстрагували на водяній бані протягом 2 год. Сировину відфільтрували з допомогою вакуумного фільтру і повторили екстракцію ще двічі по 30-40 хв., після чого водні витяги об'єднали та упарили до густого екстракту. Густі спиртовий та водний екстракти змішали та висушили під вакуумом до сухого стану. Вихід отриманого сухого екстракту трави розхідника звичайного становив 22,66 %. Сухий екстракт трави розхідника - це кристалічний порошок темно-коричневого кольору із зеленуватим відтінком, специфічного запаху, розчинний у холодній воді, легко розчинний у гарячій воді, погано розчинний у 40 % етиловому спирті, краще - у 96 % спирті. Приклад 2. Дослідження протизапальної активності сухого екстракту трави розхідника звичайного проводили на 56 мишах, масою 22-25 г, по 7 тварин у кожній групі, на моделі карагенінового набряку кінцівки мишей, яку відтворювали субплантарним введенням 0,05 мл 1 % розчину карагеніну в праву задню кінцівку тварини. На 3-й годині (піку розвитку) набряку тварин виводили з досліду дислокацією шийних хребців та порівнювали масу здорової та набряклої 1 UA 87817 U кінцівок після їх екзартикуляції в тазостегнових суглобах. Протизапальну активність сполук розраховували за відповідними формулами, порівняно до контрольних тварин: A  100 %  де (m1  m2 )  100 (m1k  m2k ) m1 - маса набряклої кінцівки у досліджуваній групі тварин, г; m2 - маса здорової кінцівки у досліджуваній групі тварин, г; m1k - маса набряклої кінцівки у контрольній групі тварин, г; 5 m 2k - маса здорової кінцівки у контрольній групі тварин, г. 10 15 Досліджувані сполуки та препарати порівняння вводили внутрішньошлунково за 1 годину до ін'єкції карагеніну. Групі контролю вводили еквівалентну кількість фізіологічного розчину натрію хлориду. Досліджуваний екстракт вводили в декількох дозах (25, 50, 75 та 100 мг/кг). Референспрепарати рослинного походження, такі як силібінін та кверцетин досліджували в дозах 100 мг/кг. Диклофенак натрію досліджували в його ефективній дозі 10 мг/кг. Статистичну обробку результатів виконували з допомогою Microsoft Excel XP. Порівняння отриманих величин проводили з використанням t-критерію Ст′юдента. Зміни вважали достовірними при р ≤ 0,05. Результати досліджень представлені в табл. 1. Таблиця 1 Протизапальна дія сухого екстракту розхідника звичайного та препаратів порівняння на моделі карагенінового набряку у мишей (M±m, n=7) № Препарат Доза, мг/кг Маса інтактної per os лапки миші (мг) Маса набряклої лапки миші (мг) Карагенін 914,3±26,1 1450±83,8 Екстракт 2 25 1031,4±36,9 1381,4±23,5 розхідника Екстракт 3 50 1064,3±32,2 1330,0±23,5 розхідника Екстракт 4 75 1071,0±21,4 1342±34,3 розхідника Екстракт 5 100 1090,0±53,0 1270,0±54,8 розхідника Диклофенак6 10 1058,6±47,5 1180,0±49,8 натрій 7 Силібінін 100 1012,9±32,1 1240,7±26,5 8 Кверцетин 100 1130,0±36,1 1305,7±37,0 Примітки: * - відмінності вірогідні відносно групи контролю (р