Протизапальний та антимікробний лікарський засіб з рослинної сировини

Реферат: UA 96137 U UA 96137 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Корисна модель належить до фармацевтичної галузі, а саме до лікарських засобів з лікарської рослинної сировини. Відомий лікувальний засіб (пат. UA № 9147, А61К 36/18, 15.09.2005, бюл. № 9), до складу якого входять компоненти рослинного походження, зокрема меліса лікарська, деревій звичайний і супліддя вільхи сірої. Додатково містить пробіотик ентерол. До недоліків слід віднести те, що він має вузько спрямовану дію, використовується лише для обпилення слизової оболонки кишечнику, також містить не тільки рослинну сировину. Відомий лікарський засіб (пат. UA № 22792, А61К 36/185, 15.09.2000, бюл. № 4), що містить апіс, беладону, фітолякку, календулу, меркуріус солюбіліс і ехінацею. Однак засіб має багатокомпонентний склад. У даному лікарському засобі використовується дуже багато трав, що дуже часто призводить до алергічних реакцій та й відвари не дають у більшості випадків очікуваного результату. Засіб має обмежену лікувальну дію. Відома настойка звіробою (Tinctura Hiperici) на 40 % етиловому спирті при співвідношенні сировини до екстрагенту 1:5 [М.Д. Машковский Лекарственные средства. Пособие для врачей в 2-х томах 14-е издание. - М.: ООО "Новая волна", Издатель С.Б. Дивов, 2002. - T. 1. - С. 300]. Використовується як в'яжучій і протизапальний засіб у стоматологічній практиці. Застосовують для прийому всередину та для полоскання. Відоме використання спиртової настойки з кореневища перстачу прямостоячого (Potentilla erecta (L.), Raeusch, Tormentilla erecta) як антиоксидантного засобу (пат. UA № 4655, А61К 36/882, 17.01.2005, бюл. № 1). Широко використовують також відомий лікарський засіб у вигляді настойки календули (Tinctura Calendulae) на 70 % спирті етиловому при співвідношенні сировини до екстрагенту 1:10 (М.Д. Машковский Лекарственные средства. Пособие для врачей в 2-х томах 14-е издание. - М.: ООО "Новая волна", Издатель С.Б. Дивов, 2002. - Т. 2. - С. 401). Настойку календули застосовують при порізах, для полоскання горла при запальних захворюваннях. До недоліків можна віднести вузький спектр дії. В основу корисної моделі поставлена задача удосконалити протизапальний та антимікробний лікарський засіб шляхом використання рослинних настойок щоб забезпечити антимікробну лікувальну дію на організм хворого при захворюваннях, що спричинені патогенними мікроорганізмами, та високий терапевтичний ефект. Поставлена задача вирішується тим, що у відомому протизапальному та антимікробному лікарському засобі, що містить настойку лікарських рослин, згідно з корисною моделлю, як настойку лікарських рослин використовують настойку із листя бруслини європейської на 70 % спирті етиловому при співвідношенні сировини до екстрагенту 1:10. Бруслина європейська (Euonymus europaeus L.) містить діючі речовини - алкалоїди, дігіталоіди, гіркоти. В народній медицині бруслину застосовують як блювотне і сильне проносне, при хронічній малярії, проти глистів, корости. Всі частини рослини використовуються для приготування серцевих засобів і, крім того, діють як легке проносне. Спосіб отримання настойки полягає в наступному. Сировину, у вигляді листя бруслини європейської подрібнюють до розміру часток 0,5-3,0 мм, просіють до фракції з частинками 3-5 мм, далі вилучають біологічно активні речовини екстрагентом - спиртом етиловим 70 % у співвідношенні сировина:екстрагент 1:10 протягом 3 діб. Приклад 1. Попередньо відсіяли від пилу на ситі № 38 і від великих частинок на ситі № 50, помістили в х-ним мацераційний бак і залили 10 об'ємом екстрагенту - спиртом етиловим 70 % та настояли при періодичному перемішуванні при кімнатній температурі (15-20 °C) протягом 3 діб. Витяг злили, шрот піддали пресуванню, промили чистим екстрагентом, знову спресували, всі витяги об'єднали, і після відстоювання протягом 1 доби настоянку фільтрували на друк - фільтрі, стандартизували та розфасували у герметичну тару. Отриманий продукт рідина зеленувато-бурого кольору, слабко ароматного запаху і гіркуватого смаку. Приклад 2. Проведення дослідження протимікробної активності. Було одержано зразки настойки бруслини європейської із використанням у якості екстрагента спирту етилового 70 % та здійснено порівняльний аналіз із аналогічною настойкою на спирті етиловому 40 % за рівнем антимікробної активності, згідно з методикою Державної фармакопеї України. Антимікробну дію настойок визначали відносно 5 музейних штамів: грампозитивних коків S. aureus ATCC 6538, грампозитивних паличок В. subtilis ATCC 6633, грамнегативних паличок Е. coli ATCC 25922 та P. aeruginosa ATCC 9027, дріжджових грибів С. albicans ATCC 885-653. 1 UA 96137 U 5 10 Антимікробні властивості препаратів вивчали за допомогою методу "колодязів". Для цього у чашки Петрі наливали 10 мл незараженого "голодного" агару. Після застигання цього шару на нього ставили стерильні скляні циліндри висотою 10 мм із внутрішнім діаметром 10 мм, і заливали їх 15 мл "зараженого" агару. Для цього в розтоплений і охолоджений агар додавали суспензію добової культури тест-мікроорганізму у концентрації 0,5 за Mc-Farland. Після застигання другого шару агару циліндри виймали й лунки, які утворилися, заповнювали дослідними зразками. В одній чашці Петрі досліджували активність одного зразка. Посіви інкубували при температурі 37 °C на протязі 48 годин. Результати визначали за наявністю зон затримки росту тест-мікроорганізмів, які чітко було видно навколо лунок. Кожний дослід повторювали десятикратно. Результати оброблені за методом варіаційної статистики з використанням значення медіани (Me). Результати дослідження занесені у таблицю 1. Як показали проведені експерименти (табл. 1), більшість тест-культур були чутливими до дії настойок. Виключення становили спороутворюючі В. subtilis, які виявились малочутливими до 40 % настойки. 15 Таблиця 1 Настойка бруслини європейської, яка виготовлена на спирті етиловому у концентрації: 40 % 70 % 13,2±1,13 16,5±1,08 16,4±0,84 18,5±0,71 20,5±0,85 22,8±1,03 17,9±0,74 24,4±1,07 18,7±0,67 20,1±0,57 Тест-мікроорганізм В. subtilis ATCC 6633 С. albicans ATCC 885-653 E. coli ATCC 25922 S. aureus ATCC 6538 P. aeruginosa ATCC 9027 20 25 30 35 Досліджувані настойки бруслини європейської мали антибактеріальні властивості проти тест-штамів грамнегативних паличок Е. coli та P. aeruginosa. Культура синьо-гнійної паличок виявилася менш чутливою, ніж культура кишкових паличок до 40 % настойки. До 70 % настойки бруслини європейської обидві тест-культури були чутливими із затримкою їх росту 22,8±1,03 мм (Е. соlі) та 20,1±0,57 (Р. aeruginosa). 70 % настойка бруслини європейської була ефективнішою за 40 % настойку й проти грампозитивних коків S. aureus. Тест-штам виявився чутливим до першого з них (зона затримки становила 24,4±1,07 мм), й малочутливим до другого (17,9±0,74 мм). Антимікробна активність настойок виявлена проти дріжджових грибів роду Candida. До обох препаратів культура С. albicans була чутливою і зони затримки росту навколо "колодязів" із 40 % та 70 % настойкою становили (16,4±0,84) мм і (18,5±0,71) мм відповідно. Отже встановлено, що настойка бруслини європейської, яка виготовлена на 70 % спирті етиловому має більш виражену антимікробну дію проти всіх тест-штамів мікроорганізмів, ніж настойка, яка виготовлена на 40 % спирті етиловому. Приклад 3. З метою дослідження фіто-хімічного складу настойки бруслини європейської, одержаної методом мацерації, було визначено кількісний вміст суми флавоноїдів у перерахунку на рутин спектрофотометричним методом у настойці бруслини європейської на 70 % спирті етиловому у порівнянні з настойкою бруслини європейської на 40 % спирті етиловому. Результати дослідження занесені у таблицю 2. Таблиця 2 Характеристика екстрагента Спирт етиловий 40 % Спирт етиловий 70 % 40 0,5 години 0,12 2,35 Часовий інтервал взяття проб на дослідження 1,5 години 2,5 години 3,5 години Кількісний вміст суми флавоноїдів, % 0,25 0,70 0,95 2,50 3,05 3,50 24 години 2,15 5,17 Встановлено, що кількісний вміст суми флавоноїдів у настойках бруслини європейської динамічно зростає упродовж усього періоду екстрагування як і у настойці на 40 % спирті етиловому, так і у настойці на 70 % спирті етиловому. Проте, дана динаміка спостерігається інтенсивнішою у випадку використання, як екстрагента, спирту етилового 70 % у більш ніж 2,4 рази. 2 UA 96137 U 5 Приклад 4 З метою дослідження фіто-хімічного складу настойки бруслини європейської, одержаної методом мацерації, було визначено кількісний вміст суми флавоноїдів у перерахунку на рутин спектрофотометричним методом у настойці бруслини європейської на 70 % спирті етиловому у співвідношенні сировина:екстрагент 1:10 у порівнянні з настойкою бруслини європейської на 70 % спирті етиловому у співвідношенні сировина:екстрагент 1:20. Результати дослідження занесені у таблицю 3. Таблиця 3 Співвідношення сировина:екстрагент 1:10 1:20 10 15 Часовий інтервал взяття проб на дослідження 0,5 години 1,5 години 2,5 години 3,5 години 24 години Кількісний вміст суми флавоноїдів, % 2,35 2,50 3,05 3,50 5,17 0,80 1,13 1,35 1,70 2,53 Встановлено, що кількісний вміст суми флавоноїдів у настойках бруслини європейської динамічно зростає упродовж усього періоду екстрагування 70 % спиртом етиловим як і у настойці, яка виготовлена у співвідношенні 1:10 так і у співвідношенні 1:20. Проте, дана динаміка спостерігається інтенсивнішою у випадку приготування настойки бруслини європейської у співвідношенні 1:10 у більш ніж 2 рази. Одержанні дані свідчать, що настойка бруслини європейської має високий вміст біологічно активних сполук - флавоноїдів та значний ступінь антимікробної активності проти деяких грампозитивних та грамнегативних мікроорганізмів та дріжджових грибів роду Candida. ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 20 Протизапальний та антимікробний лікарський засіб з рослинної сировини, що містить настойку лікарських рослин, який відрізняється тим, що як настойку лікарських рослин використовують 70 % етанольну настойку із листя бруслини європейської у співвідношенні сировини до екстрагенту 1:10. 25 Комп’ютерна верстка Д. Шеверун Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 3